Разработка и валидация методик количественного определения компонентов лиофилизата дигидрокверцетин-глицин

Введение. Наряду с синтетическими лекарственными средствами важную часть в медицинской практике занимают фитопрепараты. Во многих из них основная группа биологически активных веществ представлена флавоноидами, агликоны которых, как правило, мало растворимы в воде при комнатной температуре. Для преодоления низкой растворимости предпринимаются попытки получения кокристаллических и коаморфных форм флавоноидов, например, с аминокислотами. Как у флаванонола дигидрокверцетина (ДКВ), так и у аминокислоты глицин наблюдали нейропротекторное действие, что послужило отправной точкой получения твердофазного продукта на их основе путем лиофилизации.

Целью настоящей работы является разработка и валидация методик идентификации и количественного определения действующих веществ композиции дигидрокверцетин-глицин.

Материал и методы. Глицин определяли спектрофотометрически после реакции с нингидрином. Анализ ДКВ проводили на базе метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ-УФ) на фенильном силикагеле. Оценивали следующие валидационные характеристики: правильность, прецизионность, специфичность, линейность, диапазон применения.

Результаты. Линейная зависимость оптической плотности пурпура Руэманна от концентрации глицина наблюдается в диапазоне 100 – 500 мкг/мл и подчиняется уравнению A=5,1237C − 0,5553 (r=0,9968). Относительные стандартные отклонения поглощения по результатам 3 определений для концентраций 0,28, 0,36 и 0,43 мг/мл лиофилизата дигидрокверцетин-глицин составляют 3,2, 1,9 и 1,3% соответственно. Линейная зависимость площади пика ДКВ на хроматограмме от его концентрации наблюдается в диапазоне 10–200 мкг/мл и подчиняется уравнению S=121,518C – 47,935 (r=0,9998). Относительные стандартные отклонения площади пика основного вещества по результатам 3 определений для концентраций 10, 50 и 200 мкг/мл ДКВ составляют 2,8, 3,9 и 1,2% соответственно.

Заключение. Валидированные методики пригодны для фармацевтического анализа и могут быть использованы в контроле качества композиции, которая разрабатывается как основа лекарственной формы «Лиофилизат для приготовления раствора для инфузий».