Production and evaluation of the clinical efficacy of the recombinant T. pallidum antigen Tp0453 for syphilis diagnosis


如何引用文章

全文:

详细

Goal. Production of a recombinant T. pallidum antigen Tp0453 and the evaluation of the efficacy of its clinical use for syphilis diagnosis. Materials and methods. To produce the target recombinant T. pallidum antigen, a Tp0453 protein coding fragment of the DNA of the causative agent of syphilis, was cloned into the pET28а vector. Heterological expression of the recombinant T. pallidum antigen was performed in the E. coli BL21 (DE3) strain. The recombinant Tp0453 six-histidine-tagged protein was purified by the metal-chelate affinity chromatography. The resulting homogenous recombinant T. pallidum Tp0453 protein was used to reveal specific IgG antibodies in the serum of syphilis patients using a microarray technology. Results and conclusion. The use of the resulting recombinant protein enabled authors to reveal anti- T. pallidum antibodies in the blood serum of patients suffering from syphilis (primary, secondary, early and late latent syphilis). None of the uninfected controls had a significant reactivity to the recombinant Tp0453. These data allow to propose, that the recombinant protein Tp0453 show promise for laboratory diagnosis of syphilis. The introduction of Tp0453 antigen into the test systems for diagnosis of syphilis (ELISA, immunoblotting or microarray) increases the potential of serodiagnosis of this disease due to the broader range of the revealed antitreponemal antibodies.

作者简介

R KHAIRULLIN

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology, Ministry of Healthcare of the Russian Federation

Email: khairullin@cnikvi.ru
к.х.н., старший научный сотрудник отдела лабораторной диагностики ИППП и дерматозов

A RUNINA

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology, Ministry of Healthcare of the Russian Federation

лаборант-исследователь отдела лабораторной диагностики ИППП и дерматозов

K ROG

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology, Ministry of Healthcare of the Russian Federation

младший научный сотрудник отдела лабораторной диагностики ИППП и дерматозов

N FRIGO

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology, Ministry of Healthcare of the Russian Federation

д.м.н., заместитель директора по научно-образовательной работе

S ROTANOV

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology, Ministry of Healthcare of the Russian Federation

д.м.н., доцент, врач Лабораторного центра

参考

  1. Черешнев В.А., Патрушева Н.Б., Бейкин Я.Б. и др. Сифилис: Иммунитет и лабораторная диагностика. Екатеринбург: УрО РАН; 2006
  2. Соколовский Е., Фриго Н., Ротанов С. Руководство по лабораторной диагностике сифилиса в странах Восточной Европы. Вестн дерматол и венерол 2008; (1): 87—96
  3. Овчинников Н.М., Беднова В.Н., Делекторский В.В. Лабораторная диагностика заболеваний, передающихся половым путем. М: Медицина; 1987
  4. Китаева Н.В., Фриго Н.В., Мелехина Л.Е. Актуальные проблемы сифилидологии. Современные технологии диагностики сифилитической инфекции. Вестн дерматол и венерол 2008; (5): 51—59
  5. Китаева Н.В., Фриго Н.В., Ротанов С.В., Хайруллин Р.Ф. Перспективы диагностического использования протеомных технологий в диагностике ИПППизаболеваний кожи. Вестн дерматол и венерол 2010; (4): 17—27
  6. Sambri V., Marangoni A., Simone M. et al. Evaluation of recomWell Treponema, a novel recombinant antigen-based enzyme-linked immunosorbent assay for the diagnosis of syphilis. Clin Microbiol Infect 2001; 7: 200—205
  7. Хайруллин Р.Ф., Ротанов С.В., Фриго Н.В., Белоусова А.В. Биоинформатический анализ специфических антигенов T. pallidum. Вестн дерматол и венерол 2012; (5): 56—64
  8. Carlson J.A., Dabiri G., Cribier B., Sell S. The im-munopathobiology of syphilis: the manifestations and course of syphilis are determined by the level of delayed-type hypersensitivity. Am J Dermatopathol 2011; 33: 433—460
  9. Cox D.L., Luthra A., Dunham-Ems S. et al. Surface immunolabeling and consensus computational framework to identify candidate rare outer membrane proteins of Treponema pallidum. Infect Immun 2010; 78: 5178—5194.
  10. Luthra A., Zhu G., Desrosiers D.C. et al. The transition from closed to open conformation of Treponema pallidum outer membrane-associated lipoprotein Tp0453 involves membrane sensing and integration by two amphipathic helices. J Biol Chem 2011; 286: 41656—41668.
  11. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 1970; 227: 680—685.
  12. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem 1976; 72: 248—254.

补充文件

附件文件
动作
1. JATS XML

版权所有 © KHAIRULLIN R.F., RUNINA A.V., ROG K.V., FRIGO N.V., ROTANOV S.V., 2013

Creative Commons License
此作品已接受知识共享署名 4.0国际许可协议的许可

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».