Получение и оценка свойств рекомбинантного аналога мажорного аллергена пыльцы березы Bet v 1


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Цель работы. Для внедрения покомпонентной аллергодиагностики в лабораторную практику необходимо создать протоколы получения, очистки и верификации свойств синтетических аллергенов. Мажорный белок пыльцы березы Bet v 1, являющийся представителем суперсемейства PR-10, представляет значительный интерес благодаря высокой частоте случаев сенсибилизации и проявлению кросс-реактивных свойств. Материалы и методы. Для получения синтетического белка были применены методы клонирования ДНК с последующей экспрессией в культуре клеток E. coli. Очистка выполнена методом металл-аффинной хроматографии. Оценка иммунохимических свойств проведена в аллергосорбентном тесте, ИФА-анализе и лайн-блоте. Результаты. В ходе работы нами получен высокопродуктивный бактериальный штамм E. coli, содержащий экспрессионную конструкцию мажорного аллергена пыльцы березы — белок Bet v 1. Произведена оценка его физико-химических и иммунологических свойств в различных тест-системах с использованием референсных препаратов и панели сывороток. Заключение. Показано, что полученный синтетический аналог белка Bet v 1 может быть использован для тестирования наличия аллерген-специфических иммуноглобулинов класса Е в образцах сыворотки крови. Данный аллергенный компонент может быть применен для покомпонентной оценки профиля сенсибилизации пациента.

Об авторах

А Е Павлов

ООО «Вега» Группа компаний «Алкор био»; Санкт-Петербургский Государственный университет

Email: apavlov@alkorbio.ru
г. Санкт-Петербург

Н А Сейлиева

ООО «Вега» Группа компаний «Алкор био»

г. Санкт-Петербург

О Ю Мухортых

ООО «Вега» Группа компаний «Алкор био»

г. Санкт-Петербург

В Е Стефанов

Санкт-Петербургский Государственный университет

г. Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Madsen C. Prevalence of food allergy: an overview. Proc. Nutr. Soc. 2005, v. 64, p. 413-417.
  2. Ebo D.G., Hagendorens M.M., Bridts C.H., Stevens W.J. In vitro diagnosis of IgE-mediated allergy: breakthroughs in the last decade. Expert. Rev. Clin. Immunol. 2012, v. 8, p. 9-11.
  3. Eriksson N.E., Ahlstedt S. Diagnosis of reaginic allergy with house dust, animal dander and pollen allergens in adult patients. V. A comparison between the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), provocation tests, skin tests and RAST Int. Arch. Allergy Appl. Immunol. 1977, v 54, p. 88-95.
  4. Dolen W.K. Allergen extract standartization: reality, myth, or dream? Ann. Allergy Asthma Immunol. 1995, v. 75, p. 81-82.
  5. Ipsen H., Løwenstein H. Isolation and immunochemical characterization of the major allergen of birch pollen (Betula verrucosa). J. Allergy Clin. Immunol. 1983, v. 72, p. 150-159.
  6. Павлов А.Е., Сейлиева Н.А., Стефанов В.Е. Перспективы развития молекулярной диагностики аллергии в формате микрочипа. Клин. лаб. диагн. 2011, № 12, с. 3-7.
  7. Asturias J.A., Ibarrola I., Amat P. et al. Purified allergens vs. complete extract in the diagnosis of plane tree pollen allergy. Clin. Exp. Allergy. 2006, v. 36, p. 1505-1512.
  8. Midoro-Horiuti T., Brooks E.G., Goldblum R.M. Pathogenesis-related proteins of plants as allergens. Ann. Allergy Asthma Immunol. 2001, v. 87, p. 261-271.
  9. WHO/IUIS Allergen Nomenclature Sub-committee: [www. allergen.org]. URL: http://www.allergen.org/.
  10. Swoboda I., Jilek A., Ferreira F. et al. Isoforms of Bet v 1, the major birch pollen allergen, analyzed by liquid chromatography, mass spectrometry and cDNA cloning. J. Biol. Chem. 1995, v. 270, p. 2607-2613.
  11. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970, Aug 15, v. 227 (5259), р. 680-685.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Фармарус Принт Медиа, 2012

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».