Использование метода молекулярно-генетического типирования для определения вариантов слабого антигена D в диагностике резус-принадлежности

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Актуальность. Определение резус-принадлежности обязательно для доноров и реципиентов, хирургических пациентов, беременных и др. Существуют варианты антигена D, которые сложно идентифицировать серологическими методами, например слабый антиген D.

Цель. Определение резус-принадлежности с помощью генотипирования в сложных случаях, когда использование серологических методов не позволяет получить достоверный результат.

Материал и методы исследования. Исследовали образцы крови доноров (n=18), беременных (n=17) и пациентов с гематологическими заболеваниями (n=15): 22 мужчин и 28 женщин, медиана возраста 36 лет (от 25 до 54 лет). Серологически антиген D определяли гелевой технологией в ID-картах и в непрямом антиглобулиновом тесте с реактивом анти-D-IgG. Диагностику вариантов слабого антигена D и определение фенотипа проводили с использованием полимеразной цепной реакции с помощью аллель-специфических праймеров. Для достоверности различий частоты типов слабого антигена D применяли непараметрический статистический метод с использованием двустороннего точного критерия Фишера. Различия рассматривали как статистически значимые при p <0,05.

Результаты. Использование генотипирования позволило выявить присутствие слабого антигена D в 41 исследуемом образце. Его специфичность была представлена следующими типами: 1; 1.1; 2; 3. Остальные типы слабого антигена D [4; 4.0; 4.1; 4.2 (DAR); 5; 11; 14; 15; 17] отсутствовали. Исследование фенотипа антигенов эритроцитов системы резус с использованием генотипирования выявило преобладание фенотипа Ссее у людей со слабым антигеном D. Выявлены достоверные различия по частоте типов этого антигена.

Вывод. Применение молекулярно-генетического типирования позволило определить типы слабого антигена D и точно установить резус-принадлежность обследуемых.

Об авторах

Наталья Витальевна Минеева

Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства

Автор, ответственный за переписку.
Email: izoserologia@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-7137-8877

докт. биол. наук, проф., руководитель, научно-исследовательская лаборатория иммуногематологии и геномики групп крови

Россия, г. Санкт-Петербург, Россия

Светлана Викторовна Гавровская

Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии
Федерального медико-биологического агентства

Email: izoserologia@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-2987-2956

м.н.с., научно-исследовательская лаборатория иммуногематологии и геномики групп крови

Россия, г. Санкт-Петербург, Россия

Елена Анатольевна Сысоева

Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства

Email: izoserologia@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-9465-4704

м.н.с., научно-исследовательская лаборатория иммуногематологии и геномики групп крови

Россия, г. Санкт-Петербург, Россия

Станислав Семенович Бессмельцев

Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства

Email: bessmeltsev@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-7280-7100

докт. мед. наук, проф., зам. директора по научной работе

Россия, г. Санкт-Петербург, Россия

Сергей Владимирович Сидоркевич

Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства

Email: bloodsciense@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-9931-9406

докт. мед. наук, директор

Россия, г. Санкт-Петербург, Россия

Список литературы

  1. Flegel WA. Modern Rhesus (Rh) typing in transfusion and pregnancy. CMAJ. 2021;193(4):E124. doi: 10.1503/cmaj.201212.
  2. Минеева Н.В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии. Изд. 2-е, переработанное и дополненное. СПб.: Гангут; 2020. 360 с.
  3. Головкина Л.Л., Каландаров Р.С., Пшеничникова О.С., Сурин В.Л., Стремоухова А.Г., Пушкина Т.Д., Хасигова Б.Б. Выявление распространённых и новых редких типов слабого антигена RHD у больных с заболеваниями системы крови и здоровых лиц. Онкогематология. 2019;14(3):52–59. doi: 10.17650/1818-8346-2019-14-3-52-59.
  4. Wagner FF, Frohmajer А, Ladewig В, Eicher NI, Lonicer CB, Müller TH, Siegel MH, Flegel WA. Weak D alleles express distinct phenotypes. Blood. 2000;95(8):2699–2708. doi: 10.1182/blood.V95.8.2699.008k12_2699_2708.
  5. Flegel WA, Zabern IV, Wagner FF. Six years’ experience performing RHD genotyping to confirm D− red blood cell units in Germany for preventing anti-D immunizations. Transfusion. 2009;49:465–471. doi: 10.1111/j.1537-2995.2008.01975.x.
  6. Sandler SG, Chen LN, Flegel WA. Serological weak D phenotypes: A review and guidance for interpreting the RhD blood type using the RHD genotype. Br J Haematol. 2017;179(1):10–19. doi: 10.1111/bjh.14757.
  7. Garratty G. Do we need to be more concerned about weak D antigens? Transfusion. 2005;45:1547–1551. doi: 10.1111/j.1537-2995.2005.00625.x
  8. Vege S, Sprogøe U, Lomas-Francis С, Jakobsen M, Antonsen B, Aeschlimann J, Yazer M, Westhoff CM. Impact of RHD genotyping on transfusion practice in Denmark and the United States and identification of novel RHD alleles. Transfusion. 2021;61:256–265. doi: 10.1111/trf.16100.
  9. Perez-Alvarez I, Hayes C, Tiruneh Hailemariam T, Shin E, Hutchinson T, Klapper E. RHD genotyping of serologic RhD-negative blood donors in a hospital-based blood donor center. Transfusion. 2019;59(7):2422–2428. doi: 10.1111/trf.15325.
  10. Sandler SG, Horn T, Keller J, Langeberdg A, Keller MA. A model for integrating molecular-based testing in a transfusion service. Blood Transfus. 2016;14(6):566–572. doi: 10.2450/2015.0070-15.
  11. Минеева Н.В., Елхина Е.В., Бодрова Н.Н., Заварзина О.А., Приезжева Л.С., Поединенко И.В. Разновидности антигена D и определение резус-принадлежности крови. Клиническая лабораторная диагностика. 2009;(3):19–21. EDN: KHPHOB.
  12. Головкина Л.Л., Стремоухова А.Г., Пушкина Т.Д., Каландаров Р.С., Атрощенко Г.В., Васильева М.Н., Сурин В.Л., Саломашкина В.В., Пшеничникова О.С., Митерев Г.Ю., Паровичникова Е.Н., Савченко В.Г. Молекулярно-серологические характеристики типов слабого антигена D системы резус. Терапевтический архив. 2016;88(7):78–83. doi: 10.17116/terarkh201688778-83.
  13. Ламзин И.М., Соколова М.Н., Хайруллин Р.М., Минеева Н.В., Хапман М.Э. Особенности иммуногематологических и гематологических показателей крови донора с редким фенотипом -D-. Гематология и трансфузиология. 2020;65(1):52–60. doi: 10.35754/02345730-2020-65-1-52-60.
  14. Sandler SG, Flegel WA, Westhoff CM, Denomme GA, Delaney M, Keller MA, Johnson ST, Katz L, Queenan JT, Vassallo RR, Simon CD. It’s time to phase in RHD genotyping for patients with a serologic weak D phenotype. Transfusion. 2015;55:680–689. doi: 10.1111/trf.12941.
  15. Sapatnekar S, Figueroa PI. How do we use molecular red blood cell antigen typing to supplement pre transfusion testing? Transfusion. 2014;54:1452–1458. doi: 10.1111/trf.12623.
  16. Chen LN, Fliegel WA. Serological phenotypes of weak D: A review and guide to the interpretation of the RhD blood group using the RHD genotype. Br J Haematol. 2017;179(1):10–19. doi: 10.1111/bjh.14757.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Характер агглютинации в геле в ID-картах при определении фенотипа и антигена D: а — сила реакции агглютинации при определении антигенов С и е (4+) и антигена D в непрямом антиглобулиновом тесте с анти-D-IgG (1+) в карте LISS/Coombs; б — сила реакции агглютинации при определении антигенов С, с, е, K (4+) и в непрямом антиглобулиновом тесте с анти-D-IgG (3+) в карте Coombs Anti-IgG

Скачать (53KB)
3. Рис. 2. Результат генотипирования образца крови пациента, имеющего слабый антиген D тип 1, на анализаторе FluoVista; зелёным цветом обозначено наличие аллеля гена, кодирующего вариант слабого антигена D, красным — отсутствие2

Скачать (40KB)
4. Рис. 3. Результат генотипирования эритроцитов реципиента на анализаторе FluoVista у пациента со слабым антигеном D; зелёным цветом обозначено наличие аллелей гена RHCE, кодирующего антигены С, с, е, красным — отсутствие

Скачать (45KB)
5. Рис. 4. Распределение фенотипов антигенов эритроцитов, выявленных в образцах с разными типами слабого антигена D; по оси X — типы антигена, по оси Y — количество образцов с выявленным типом слабого антигена D

Скачать (14KB)

© 2023 Эко-Вектор



Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».