Состояние микробиоценоза влагалища у женщин с трихомониазом

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Актуальность. Трихомониаз сопровождается выраженной колонизацией половых путей разнообразными условно-патогенными микроорганизмами и снижением количества лактобацилл. Оба процесса негативно влияют на репродуктивное здоровье и на развитие плода. Однако сегодня при лечении трихомониаза недостаточно внимания уделяется восстановлению нормальной микрофлоры влагалища. 

Цель. Оценка состояния микробиоценоза влагалища у пациенток с трихомониазом с использованием методов микроскопического исследования окрашенных препаратов и амплификации нуклеиновых кислот. 

Материалы и методы. Использовали архивные клинические материалы отделяемого влагалища 37 женщин с трихомониазом, помещенные на предметные стекла, фиксированные в пламени горелки и окрашенные по Граму и метиленовым синим, хранившиеся в боксах в течение 15 лет. Применяли метод микроскопического исследования окрашенных препаратов с оценкой микробиоценоза влагалища, а также метод амплификации нуклеиновых кислот с использованием теста Фемофлор и тест-систем для выявления ДНК возбудителей инфекций, передающихся половым путем. 

Результаты. По данным микроскопического исследования нарушение вагинального микробиоценоза выявлено у 89,2 % пациенток с трихомониазом. Chlamydia trachomatis обнаружены в 8,1 % проб. Облигатно-анаэробные микроорганизмы определялись во всех образцах. У большинства женщин они составили от 8 до 100 % бактериальной массы. Факультативно-анаэробная микрофлора обнаружена также у всех пациенток. При этом лактобациллы выявлены у 8,1 % женщин, а микоплазмы — у 37,8 % пациенток. 

Заключение. Показано, что при трихомониазе часто имеет место нарушение нормальной микрофлоры влагалища, проявляющееся как присутствие значительного разнообразия условно-патогенной микрофлоры и сопровождающееся воспалительной реакцией. У половины обследованных трихомониаз сопровождался бактериальным вагинозом. Обращает на себя внимание высокая частота выявления при трихомониазе Mycoplasma hominis. Впервые апробирована методика оценки ДНК в клинических материалах, нанесенных на предметные стекла, после длительного хранения.

Об авторах

Алексей Николаевич Григорьев

ФГБУ «НИИАГ им. Д. О. Отта» СЗО РАМН

Автор, ответственный за переписку.
Email: iagmail@ott.ru
научный сотрудник лаборатории микробиологии Россия

Елена Владимировна Рыбина

ФГБУ «НИИАГ им. Д. О. Отта» СЗО РАМН

Email: iagmail@ott.ru
врач-бактериолог лаборатории микробиологии Россия

Зинаида Михайловна Мартикайнен

ФГБУ «НИИАГ им. Д. О. Отта» СЗО РАМН

Email: iagmail@ott.ru
канд. биол. наук, старший научный сотрудник лаборатории микробиологии Россия

Алевтина Михайловна Савичева

ФГБУ «НИИАГ им. Д. О. Отта» СЗО РАМН

Email: savitcheva@mail.ru
д-р мед. наук, профессор, зав. лабораторией микробиологии Россия

Список литературы

  1. Nijhawan AE, DeLong AK, Celentano DD, et al. The association between trichomonas infection and incarceration in HIV-seropositive and at-risk HIV-seronegative women. Sex Transm Dis.2011;38(12):1094-1100. doi: 10.1097/OLQ.0b013e31822ea147.
  2. Schwebke JR, Burgess D. Trichomoniasis. Clin Microbiol Rev. 2004;17(4):794-803. doi: 10.1128/CMR.17.4.
  3. -803.2004.
  4. Zaki MElS, Raafat D, Emshaty WEl, et al. Correlation of Trichomonas vaginalis to bacterial vaginosis: a laboratory-based study. J Infect Dev Ctries. 2010;4 (3):156-163. doi: 10.3855/jidc.434.
  5. Rathod SD, Krupp K, Klausner JD, et al. Bacterial vaginosis and risk for Trichomonas vaginalis infection: a longitudinal analysis. Sex Transm Dis. 2011;38(9):882-886. doi: 10.1097/OLQ.0b013e31821f91a1.
  6. Street DA, Wells C, Taylor-Robinson D, Ackers JP.
  7. Interaction between Trichomonas vaginalis and other pathogenic micro-organisms of the human genital tract.
  8. Br J Vener Dis. 1984;60:31-38. doi: 10.1136/sti.60.1.31.
  9. Gatski M, Martin DH, Clark RA, et al. Co-occurrence of Trichomonas vaginalis and bacterial vaginosis among HIV-positive women. Sex Transm Dis. 2011;38(3):163-166. doi: 10.1097/OLQ.0b013e3181f22f56.
  10. Allsworth JE, Ratner JA, Peipert JF. Trichomoniasis and
  11. other sexually transmitted infections: results from the
  12. –2004 NHANES surveys. Sex Transm Dis. 2009;
  13. (12):738-744. doi: 10.1097/OLQ.0b013e3181b38a4b.
  14. Ginocchio CC, Chapin K, Smith JS, et al. Prevalence of Trichomonas vaginalis and coinfection with Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae in the United States as determined by the Aptima Trichomonas vaginalis nucleic acid amplification assay. J Clin Microbiol. 2012;50(8):2601-2608. doi.org/10.1128/JCM.00748-12.
  15. Conrad MD, Bradic M, Warring SD, et al. Getting trichy: tools and approaches to interrogating Trichomonas vaginalis in a post-genome world. Trends Parasitol. 2013;29(1):17-25. doi: 10.1016/j.pt.2012.10.004.
  16. Kissinger P. Trichomonas vaginalis: a review of epidemiologic, clinical and treatment issues. BMC Infect Dis. 2015;15:307. doi: 10.1186/s12879-015-1055-0.
  17. Petrin D, Delgaty K, Bhatt R, Garber G. Clinical and microbiological aspects of Trichomonas vaginalis. Clin Microbiol Rev. 1998;11(2):300-317.
  18. Hardy PH, Hardy JB, Nell EE, et al. Prevalence of six sexually transmitted disease agents among pregnant inner-city adolescents and pregnancy outcome. Lancet. 1984;2:333-337. doi: 10.1016/S0140-6736(84)92698-9.
  19. Cotch MF, Pastorek JG, Nugent RP, et al. Trichomonas vaginalis associated with low birth weight and preterm delivery. The vaginal infections and prematurity study group. Sex Transm Dis. 1997;24:353-360. doi: 10.1097/00007435-199707000-00008.
  20. Ness RB, Kip KE, Hillier SL, et al. A cluster analisis of bacterial vaginosis-associated microflora and pelvic inflammatory disease. Am J Epidemiol. 2005;162(6):585-590. doi: 10.1093/aje/kwi243.
  21. Martin DH. The microbiota of the vagina and its influence on women’s health and disease. Am J Med Sci. 2012;343(1):2-9. doi: 10.1097/MAJ.
  22. b013e31823ea228.
  23. McIver CJ, Rismanto N, Smith C, et al. Multiplex PCR testing detection of higher-than-expected rates of cervical Mycoplasma, Ureaplasma, and Trichomonas and viral agent infections in sexually active australian women. J Clin Microbiol. 2009;47(5):1358-1363. doi: 10.1128/JCM.01873-08.
  24. McKechnie ML, Hillman R, Couldwell D, et al. Simultaneous identification of 14 genital microorganisms in urine by use of a multiplex PCR-based reverse line blot assay. J Clin Microbiol.2009;47(6):1871-1877. doi: 10.1128/JCM.00120-09.
  25. Zhou X, Bent SJ, Schneider MG, et al. Characterization of vaginal microbial communities in adult healthy women using cultivation-independent methods. Microbiology. 2004;150(8):2565-2573. doi: 10.1099/mic.0.26905-0.
  26. Bartlett JG, Onderdonk AB, Drude E, et al. Quantitative bacteriology of the vaginal flora. J Infect Dis. 1977;136(2):271-277. doi: 10.1093/infdis/136.2.271.
  27. Oakley BB, Fiedler TL, Marrazzo JM, Fredricks DN. Diversity of human vaginal bacterial communities and associations with clinically defined bacterial vaginosis. Appl Environ Microbiol.2008;74(15):4898-4909. doi: 10.1128/AEM.02884-07.
  28. Мартикайнен З.М., Григорьев А.Н., Рыжкова О.С., и др. Сравнение лабораторных методов диагностики инфекций, вызываемых Trichomonas vaginalis // Журнал акушерства и женских болезней. — 2014. — Т. LXIII. — № 1 . — С. 5–9. [Martikaynen ZM, Grigoryev AN, Ryzhkova JS, et al. Comparison of laboratory methods for diagnosis of Trichomonas vaginalis. Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2014; LXIII(1):5-9. (In Russ).]
  29. Григорьев А.Н. Современное состояние проблемы лабораторной диагностики урогенитального трихомониаза // Журнал акушерства и женских болезней. — 2013. — Т. LXII. — № 1. — С. 32–41. [Grigoryev AN. Current state of the problem of the laboratory diagnostics of urogenital trichomoniasis. Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2013; LXII(1):32-41. (In Russ).]
  30. Гущин А.Е., Рыжих П.Г., Махлай Н.С. Сравнение пределов обнаружения микроскопии, культурального посева и методов амплификации нуклеиновых кислот, используемых в лабораторной практике для выявления Trichomonas vaginalis // Клиническая дерматология и венерология. — 2012. — № 3. — С. 16–21. [Gushin AE, Ryzhih PG, Makhlaĭ NS. Comparison of detection limits of microscopy, culture, and nucleic acid amplification techniques using in the laboratory practice for the identification of Trichomonas vaginalis. Klinicheskaja dermatologija i venerologija. 2012;3:16-21. (In Russ).]
  31. Шипицына Е.В., Золотоверхая Е.А., Григорьев А.Н., и др. Оценка методов амплификации нуклеиновых кислот для диагностики трихомониаза // Журнал акушерства и женских болезней. — 2011. — Т. LX. — № 2. — С. 73–79. [Shipitsyna YeV, Zolotoverhaja YeF, Grigoryev AN, et al. Assessment of methods of amplification of nucleic asids for diagnostics of trichomoniasis. Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2011; LX(2):73-79. (In Russ).]
  32. Pillay A, Radebe F, Fehler G, et al. Comparison of a TaqMan-based real-time polymerase chain reaction with conventional tests for the detection of Trichomonas vaginalis. Sex Transm Infect.2007;83:126-129. doi: 10.1136/sti.2006.022376.
  33. Nye MB, Schwebke JR, Body BA. Comparison of APTIMA Trichomonas vaginalis transcription-mediated amplification to wet mount microscopy, culture, and polymerase chain reaction for diagnosis of trichomoniasis in men and women. Am J Obstet Gynecol. 2009;200(2):188.e1-188.e7. doi: 10.1016/j.ajog.2008.10.005.
  34. Simpson P, Higgins G, Qiao M, et al. Real-time PCRs for detection of Trichomonas vaginalis beta-tubulin and 18S rRNA genes in female genital specimens. J Med Microbiol. 2007;56: 772-777. doi: 10.1099/jmm.0.47163-0.
  35. Schirm J, Bos PA, Roozeboom-Roelfsema IK, et al. Trichomonas vaginalis detection using real-time TaqMan PCR. J Microbiol Methods. 2007;68:243-247. doi: 10.1016/j.mimet.2006.08.002.
  36. Nugent RP, Krohn MA, Hillier SL. Reliability of diagnosing bacterial vaginosis in improved by a standardized method of gram stain interpretation. J Clin Microbiol. 1991;29(2):297-301.
  37. Рыбина Е.В. Современные методы оценки микробиоценоза влагалища // Журнал акушерства и женских болезней. — 2015. — Т. LXIV. — № 1. — С. 53–66.
  38. [Rybina EV. Current methods for evaluation of the vaginal microbiocenosis. Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2015; LXIV(1):53-66. (In Russ).]
  39. Brotman RM, Bradford LL, Conrad M, et al. Association between Trichomonas vaginalis and vaginal bacterial community composition among reproductive-age women. Sex Transm Dis. 2012;39(10):807-812. doi: 10.1097/OLQ.0b013e3182631c79.
  40. Brotman RM, Klebanoff MA, Nansel TR, et al. Bacterial vaginosis assessed by gram stain and diminished colonization resistance to incident gonococcal, chlamydial, and trichomonal genital infection. J Infect Dis. 2010;202(12):1907-1915. doi: 10.1086/657320.
  41. Balkus JE, Richardson BA, Rabe LK, et al. Bacterial vaginosis and the risk of Trichomonas vaginalis acquisition among HIV-1 negative women. Sex Transm Dis. 2014;41(2):
  42. -128. doi: 10.1097/OLQ.0000000000000075.
  43. Martin DH, Zozaya M, Lillis RA, et al. Unique vaginal microbiota that includes an unknown Mycoplasma-like organism is associated with Trichomonas vaginalis infection. J Infect Dis.2013;207(12):1922-1931. doi: 10.1093/infdis/jit100.
  44. Amsel R, Totten PA, Spiegel CA, et al. Nonspecific vaginitis. Diagnostic criteria and microbial and epidemiological associations. Am J Med. 1983;74:14-22. doi: 10.1016/0002-9343(83)91112-9.
  45. Demirezen S, Korkmas E, Beksa MS. Association between trichomoniasis and bacterial vaginosis: examination of 600 cervicovaginal smears. Cent Eur J Pablic Health. 2005;13(2):96-99.
  46. Sharma H, Tal R, Clark NA, Segars JH. Microbiota and pelvic inflammatory disease. Semin Reprod Med. 2014;32(1):43-49. doi: 10.1055/s-0033-1361822.
  47. Wijgert J, Borgdorff H, Verhelst R, et al. The vaginal microbiota: what have we learned after a decade of molecular characterization? PLoS One. 2014;9(8): e105998. doi: 10.1371/journal.pone.0105998.
  48. Fettweis JM, Serrano MG, Huang B, et al. An emerging mycoplasma associated with trichomoniasis, vaginal infection and disease. PLoS One. 2014;9(10): e110943. doi: 10.1371/journal.pone.0110943.
  49. Verhelst R, Verstraelen H, Claeys G, et al. Cloning of 16S rRNA genes amplified from normal and disturbed vaginal microflora suggests a strong association between Atopobium vaginae, Gardnerellavaginalis and bacterial vaginosis. BMC Microbiol. 2004;4:16. doi: 10.1186/1471-2180-4-16.
  50. Pavlova SI, Kilic AO, Kilic SS, et al. Genetic diversity of vaginal lactobacilli from women in different countries based on 16S rRNA gene sequences. J Appl Microbiol. 2002;92(3):451-459. doi: 10.1046/j.1365-2672.2002.01547.x.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Григорьев А.Н., Рыбина Е.В., Мартикайнен З.М., Савичева А.М., 2016

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».