Подходы к изучению клеточного иммунного ответа к антигенам SARS-CoV-2 на модели сирийских хомячков

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Обоснование. Пандемия, вызванная появлением вируса SARS-CoV-2 в конце 2019 г., все еще остается серьезной проблемой здравоохранения. Ввиду постоянного антигенного дрейфа возбудителя, приводящего к снижению эффективности лицензированных вакцин от COVID-19, актуальна разработка вакцин широкого спектра действия, эффективных в отношении эволюционно удаленных вариантов коронавируса. В отличие от вирусспецифических антител c достаточно узким диапазоном действия, Т-клеточное звено иммунитета обладает более широким кросс-протективным потенциалом. Сирийские хомячки — адекватная модель для доклинической оценки новых вакцинных кандидатов, поскольку эти животные не только чувствительны к новой коронавирусной инфекции, но и способны проявлять клинические симптомы заболевания. Однако тестирование Т-клеточных вакцин на хомяках осложняется отсутствием доступных реагентов и тест-систем, позволяющих адекватно оценивать уровни вирусспецифического клеточного иммунитета на вакцинацию.

Цель работы — оптимизация условий стимуляции иммунных клеток сирийских хомячков живым вирусом SARS-CoV-2 для оценки уровней вирусспецифического Т-клеточного иммунного ответа.

Материалы и методы. Интраназальное заражение животных вирусом SARS-CoV-2 с последующей стимуляцией иммунных клеток различными дозами цельного живого коронавируса и подсчетом IFNγ-продуцирующих клеток методом ELISpot.

Результаты. Показано, что стимуляция клеток селезенок и легких хомяков вирусом в дозе 0,1 ТЦИД50/клетку оптимальна для определения максимальных уровней цитокин-продуцирующих клеток у животных, зараженных SARS-CoV-2. Кроме того, стимуляция клеток цельным вирусом показала большее количество вирусспецифических клеток по сравнению с пулом перекрывающихся пептидов, соответствующих белкам S и N коронавируса.

Заключение. В целом новая методика позволит более точно оценивать иммуногенность Т-клеточных вакцин от COVID-19 в доклинических исследованиях на модели сирийских хомячков.

Об авторах

Дарья Андреевна Меженская

Институт экспериментальной медицины

Автор, ответственный за переписку.
Email: dasmez@iemspb.ru
ORCID iD: 0000-0001-6922-7682
SPIN-код: 5799-8802
Scopus Author ID: 57188763106

научный сотрудник лаборатории иммунологии и профилактики вирусных инфекций отдела вирусологии им. А.А. Смородинцева

Россия, Санкт-Петербург

Ирина Николаевна Исакова-Сивак

Институт экспериментальной медицины

Email: isakova.sivak@iemspb.ru
ORCID iD: 0000-0002-2801-1508
SPIN-код: 3469-3600
Scopus Author ID: 23973026600

д-р биол. наук, заведующая лабораторией иммунологии и профилактики вирусных инфекций отдела вирусологии им. А.А. Смородинцева

Россия, Санкт-Петербург

Лариса Георгиевна Руденко

Институт экспериментальной медицины

Email: vaccine@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-0107-9959
SPIN-код: 4181-1372
Scopus Author ID: 7005033248

д-р мед. наук, профессор, заведующая отделом вирусологии им. А.А. Смородинцева

Россия, Санкт-Петербург

Список литературы

  1. COVID-19 Dashboard by the Center for Systems Science and Engineering (CSSE) at Johns Hopkins University (JHU) [Электронный ресурс]. Режим доступа: https://coronavirus.jhu.edu/map.html. Дата обращения: 01.05.2022.
  2. Zheng C., Shao W., Chen X. et al. Real-world effectiveness of COVID-19 vaccines: a literature review and meta-analysis // Int. J. Infect. Dis. 2022. Vol. 114. P. 252–260. doi: 10.1016/j.ijid.2021.11.0093.
  3. Tatsi E.B., Filippatos F., Michos A. SARS-CoV-2 variants and effectiveness of vaccines: a review of current evidence // Epidemiol. Infect. 2021. Vol. 149. P. e237. doi: 10.1017/S0950268821002430
  4. Kedzierska K., Thomas P.G. Count on us: T cells in SARS-CoV-2 infection and vaccination // Cell Rep. Med. 2022. Vol. 3, No. 3. P. 100562. doi: 10.1016/j.xcrm.2022.100562
  5. Zollner A., Watschinger C., Rössler A. et al. B and T cell response to SARS-CoV-2 vaccination in health care professionals with and without previous COVID-19 // EBioMedicine. 2021. Vol. 70. P. 103539. doi: 10.1016/j.ebiom.2021.103539
  6. Abbasi J. COVID-19 vaccine focused on T-Cell response promising in early trial // JAMA. 2022. Vol. 327, No. 2. P. 115. doi: 10.1001/jama.2021.24118
  7. Cox J.H., Ferrari G., Janetzki S. Measurement of cytokine release at the single cell level using the ELISPOT assay // Methods. 2006. Vol. 38, No. 4. P. 274–282. doi: 10.1016/j.ymeth.2005.11.006
  8. Bonifacius A., Tischer-Zimmermann S., Santamorena M.M. et al. Rapid manufacturing of highly cytotoxic clinical-grade SARS-CoV-2-specific T cell products covering SARS-CoV-2 and its variants for adoptive T cell therapy // Front. Bioeng. Biotechnol. 2022. Vol. 10. P. 867042. doi: 10.3389/fbioe.2022.867042
  9. Mak W.A., Koeleman J.G.M., Ong D.S.Y. Development of an in-house SARS-CoV-2 interferon-gamma ELISpot and plate reader-free spot detection method // J. Virol. Methods. 2022. Vol. 300. P. 114398. doi: 10.1016/j.jviromet.2021.114398
  10. Matyushenko V., Kotomina T., Kudryavtsev I. et al. Conserved T-cell epitopes of respiratory syncytial virus (RSV) delivered by recombinant live attenuated influenza vaccine viruses efficiently induce RSV-specific lung-localized memory T cells and augment influenza-specific resident memory T-cell responses // Antiviral. Res. 2020. Vol. 182. P. 104864. doi: 10.1016/j.antiviral.2020.104864
  11. Fiolet T., Kherabi Y., MacDonald C.J. et al. Comparing COVID-19 vaccines for their characteristics, efficacy and effectiveness against SARS-CoV-2 and variants of concern: a narrative review // Clin. Microbiol. Infect. 2022. Vol. 28, No. 2. P. 202–221. doi: 10.1016/j.cmi.2021.10.005
  12. Martinez-Flores D., Zepeda-Cervantes J., Cruz-Reséndiz A. et al. SARS-CoV-2 vaccines based on the spike glycoprotein and implications of new viral variants // Front. Immunol. 2021. Vol. 12. P. 701501. doi: 10.3389/fimmu.2021.701501
  13. Swadling L., Maini M.K. T cells in COVID-19 – united in diversity // Nat. Immunol. 2020. Vol. 21, No. 11. P. 1307–1308. doi: 10.1038/s41590-020-0798-y
  14. Rong Y., Wang F., Liu J. et al. Clinical characteristics and risk factors of mild-to-moderate COVID-19 patients with false-negative SARS-CoV-2 nucleic acid // J. Med. Virol. 2021. Vol. 93, No. 1. P. 448–455. doi: 10.1002/jmv.26242
  15. Dai L., Gao G.F. Viral targets for vaccines against COVID-19 // Nat. Rev. Immunol. 2021. Vol. 21, No. 2. P. 73–82. doi: 10.1038/s41577-020-00480-0

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Изучение специфического ответа к антигенам SARS-CoV-2 методом ELISpot на модели сирийских хомячков: a — пример данных анализа индивидуальных лунок планшета для ELISpot с помощью прибора AID vSpot Spectrum; b — оценка количества спотов после стимуляции клеток инфицированных животных. Двукратное заражение сирийских хомячков проведено с использованием вируса SARS-CoV-2 или фосфатно-солевого буфера (PBS). Статистический анализ проводился методом двухфакторного дисперсионного анализа ANOVA с поправкой Тьюки на множественное сравнение. MOI — multiplicity of infection, множественность заражения. * p < 0,05, ** p < 0,01, *** p < 0,001, **** p < 0,0001

Скачать (352KB)
Метаданные

© Эко-Вектор, 2022



Согласие на обработку персональных данных

 

Используя сайт https://journals.rcsi.science, я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных») даю согласие на обработку персональных данных на этом сайте (текст Согласия) и на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика» (текст Согласия).