Деструктивное действие РНКазы А на вирус SARS-CoV-2 (исследование in vitro)

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Обоснование. На сегодняшний день самым главным и обсуждаем вопросом в профессиональном медицинском сообществе остается проблема профилактики и лечения новой коронавирусной инфекции (COVID-19). Среди причин не спадающего роста заболеваемости и смертности доминирует отсутствие препарата этиотропного действия. В нашем исследовании предлагается использовать выпускаемый ранее для лечения клещевого энцефалита препарат рибонуклеазы А, получаемый из поджелудочной железы крупного рогатого скота.

Цель — изучить противовирусную активность РНКазы А в отношении SARS-CoV-2 в экспериментах in vitro.

Материалы и методы. В эксперименте применяли пробы 50 пациентов с подтвержденным (методом полимеразной цепной реакции) первичным диагнозом новой коронавирусной инфекции (COVID-19). Препаратом для исследования служила рибонуклеаза A (neoFroxx GmbH, Германия) в концентрациях 0,5; 1; 5 и 10 мг/мл. Пробы инкубировали при 4 и 37 °С, экспозиция — 20 мин и 20 ч. Полимеразную цепную реакцию проводили с использованием набора реагентов ОТ-ПЦР-РВ-SARS-CoV-2 (ООО «Синтол», Россия).

Результаты. Выявлена противовирусная активность рибонуклеазы А в минимальной концентрации 0,5 мг/мл при инкубации 20 мин и 20 ч в температурном диапазоне от 4 до 37 °С.

Заключение. Полученные в исследовании in vitro данные о способности рибонуклеазы А разрушать вирусную РНК предполагают возможность применения препарата как для лечения пациентов, так и для обработки объектов окружающей среды.

Об авторах

Илья Андреевич Морозов

Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера

Автор, ответственный за переписку.
Email: Lonny8@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-4233-3711

студент лечебного факультета

Россия, Пермь

Анатолий Петрович Годовалов

Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера

Email: agodovalov@gmail.com

д-р мед. наук, ведущий научный сотрудник центральной научной лаборатории, доцент кафедры микробиологии и вирусологии

Россия, Пермь

Денис Александрович Оборин

Пермский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями

Email: DAOborin@yandex.ru

врач-бактериолог

Россия, Пермь

Список литературы

  1. Романов Б.К. Коронавирусная инфекция COVID-2019 // Безопасность и риск фармакотерапии. 2020. Т. 8, № 1. С. 3–8. doi: 10.30895/2312-7821-2020-8-1-3-8
  2. Никифоров В.В., Суранова Т.Г., Чернобровкина Т.Я. и др. Новая коронавирусная инфекция (COVID-19): клинико-эпидемиологические аспекты // Архивъ внутренней медицины. 2020. Т. 10, № 2(52). С. 87–93. doi: 10.20514/2226-6704-2020-10-2-87-93
  3. Абатуров А.Е., Агафонова Е.А., Кривуша Е.Л., Никулина А.А. Патогенез COVID-19 // Здоровье ребенка. 2020. Т. 15, № 2. С. 133–144. doi: 10.22141/2224-0551.15.2.2020.200598
  4. Rosenberg H.F. RNase A ribonucleases and host defense: an evolving story // J. Leukoc. Biol. 2008. Vol. 83, No. 5. P. 1079–1087. doi: 10.1189/jlb.1107725
  5. Абатуров А.Е. Рибонуклеазы А — древнейшие компоненты неспецифической защиты респираторного тракта // Здоровье ребенка. 2011. Т. 5, № 32. С. 136–142.
  6. Ильинская О.Н., Шах Махмуд Р. Рибонуклеазы как противовирусные агенты // Молекулярная биология. 2014. Т. 48, № 5. С. 707. doi: 10.7868/S0026898414040053
  7. Dyer K.D., Rosenberg H.F. The RNase a superfamily: generation of diversity and innate host defense // Mol. Divers. 2006. Vol. 10, No. 4. P. 585–597. doi: 10.1007/s11030-006-9028-2

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Кинетические кривые роста сигнала флюоресценции по каналам HEX, FAM, Cy5, ROX в пробе № 26: а — до обработки РНКазой; b — после обработки РНКазой в концентрации 0,5 мг/мл в течение 20 мин при 37 °С. Регистрация сигналов по зеленому (FAM) и синему (Cy5) графикам свидетельствует об успешном выделении РНК из пробы и успешном прохождении полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени. Регистрация сигналов по красному (HEX) и фиолетовому (ROX) графикам свидетельствует о наличии специфической РНК вируса SARS-CoV-2

Скачать (300KB)
3. Рис. 2. Кинетические кривые роста сигнала флюоресценции по каналам HEX, FAM, Cy5, ROX в пробе № 26: а — до обработки изотоническим раствором натрия хлорида; b — после обработки изотоническим раствором натрия хлорида в течение 20 мин при 37 °С. Регистрация сигналов по зеленому (FAM) и синему (Cy5) графикам свидетельствует об успешном выделении РНК из пробы и успешном прохождении полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени. Регистрация сигналов по красному (HEX) и фиолетовому (ROX) графикам свидетельствует о наличии специфической РНК вируса SARS-CoV-2

Скачать (281KB)

© Морозов И.А., Годовалов А.П., Оборин Д.А., 2021

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».