ДИФФЕРЕНЦИРОВКА CD34+ КЛЕТОК ПУПОВИННОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА В МЕГАКАРИОЦИТЫ И ТРОМБОЦИТЫ В УСЛОВИЯХ EX VIVO


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Основные моменты тромбоцитопоэза достаточно хорошо изучены, но при этом все еще остается большое количество вопросов, связанных с механизмами этого процесса. А в силу того, что мегакариоциты представлены в костном мозге в очень малом количестве (<1%), для изучения требуется получение их в культуре. Разработка подходов по получению мегакариоцитарных предшественников, мегакариоцитов и тромбоцитов ex vivo вызывает большой интерес и открывает невероятные перспективы для их использования в клинической практике. В настоящей работе представлен протокол по получению мегакариоцитарных предшественников и мегакариоцитов человека из CD34+ клеток пуповинной крови, способных в условиях ex vivo образовывать тромбоциты с использованием бессывороточных сред с добавлением тромбопоэтина, фактора стволовых клеток, интерлейкина-6 и -9.

Об авторах

Д Ю КЛЮЧНИКОВ

Самарский государственный университет

Email: dmklyu@gmail.com

М Ю ЯЗЫКОВА

Самарский государственный университет

Email: yazykovasamgu@mail.ru

О В ТЮМИНА

Самарский областной центр планирования семьи и репродукции

Email: centr123@bk.ru

Список литературы

  1. Kaushansky K. Thrombopoiesis // Semin Hematol. 2015. Vol.52(1). P.4-11.
  2. Кислякова Л.П. Донорство как компонент национальной безопасности // Современные проблемы науки и образования. - 2014. - № 4; url: www.science-education.ru/118-14092.
  3. Stasi R. How to approach thrombocytopenia // Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2012. P.191-197.
  4. Приказ Минздрава России от 25 ноября 2002 г. № 363 “Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови”
  5. Чечеткин А.В., Данильченко В.В., Макеев А.Б., Григорьян М.Ш. Новые технологии обеспечения инфекционной и иммунологической безопасности в учреждениях службы крови Российской Федерации // «Трансфузиология». 2014. №15-1. С.70-71.
  6. Гаврилов А.О., Жуковская Е.В., Спичак И.И., Рудакова Г.А. Биологическая безопасность - один из главных критериев качества трансфузионной помощи // Вестник службы крови России. 2009. №2. С.11-17.
  7. Schiffer C.A. Diagnosis and management of refractoriness to platelet transfusion // Blood Rev. 2001. Vol.15(4). P.175-80.
  8. Fujimi A., Matsunaga T., Kobune M., Kawano Y., Nagaya T., Tanaka I., Iyama S., Hayashi T., Sato T., Miyanishi K., Sagawa T., Sato Y., Takimoto R., Takayama T., Kato J., Gasa S., Sakai H., Tsuchida E., Ikebuchi K., Hamada H., Niitsu Y. Ex vivo large-scale generation of human red blood cells from cord blood CD34+ cells by co-culturing with macrophages // Int J Hematol. 2008. Vol.87(4). P.339-50.
  9. Nakamura S., Takayama N., Hirata S., Seo H., Endo H., Ochi K., Fujita K., Koike T., Harimoto K., Dohda T., Watanabe A., Okita K., Takahashi N., Sawaguchi A., Yamanaka S., Nakauchi H., Nishimura S., Eto K. Expandable megakaryocyte cell lines enable clinically applicable generation of platelets from human induced pluripotent stem cells // Cell Stem Cell. 2014. Vol.14(4). P.535-48.
  10. Lu S.J., Li F., Yin H., Feng Q., Kimbrel E.A., Hahm E., Thon J.N., Wang W., Italiano J.E., Cho J., Lanza R. Platelets generated from human embryonic stem cells are functional in vitro and in the microcirculation of living mice // Cell Res. 2011. Vol.21(3). P.530-45.
  11. Hatami J., Andrade P.Z., Alves de Matos A.P., Djokovic D., Lilaia C., Ferreira F.C., Cabral J.M., da Silva C.L. Developing a co-culture system for effective megakaryo/thrombopoiesis from umbilical cord blood hematopoietic stem/progenitor cells // Cytotherapy. 2015. Vol.17(4). P.428-42.
  12. Pallotta I., Lovett M., Kaplan D.L., Balduini A. Three-dimensional system for the in vitro study of megakaryocytes and functional platelet production using silk-based vascular tubes // Tissue Eng Part C Methods. 2011. Vol.17(12). P.1223-1232.
  13. Di Buduo C.A., Wray L.S., Tozzi L., Malara A., Chen Y., Ghezzi C.E., Smoot D., Sfara C., Antonelli A., Spedden E., Bruni G., Staii C., De Marco L., Magnani M., Kaplan D.L., Balduini A. Programmable 3D silk bone marrow niche for platelet generation ex vivo and modeling of megakaryopoiesis pathologies // Blood. 2015. Vol.125(14). P.2254-2264.
  14. Thon J.N., Mazutis L., Wu S., Sylman J.L., Ehrlicher A., Machlus K.R., Feng Q., Lu S., Lanza R., Neeves K.B., Weitz D.A., Italiano J.E. Jr. Platelet bioreactor-on-a-chip // Blood. 2014. Vol.124(12). P.1857-1867.
  15. Sullenbarger B., Bahng J.H., Gruner R., Kotov N., Lasky L.C. Prolonged continuous in vitro human platelet production using three-dimensional scaffolds // Exp Hematol. 2009. Vol.37(1). P.101-110.
  16. Nakagawa Y., Ikeda S., Fukuda T., Arai F., Nakamura S., Eto K. Production system of platelet from iPS cells by two-way flow bioreactor // MHS. 2012. P.178-181.
  17. Schlinker A.C., Radwanski K., Wegener C., Min K., Miller W.M. Separation of in-vitro-derived megakaryocytes and platelets using spinning-membrane filtration // Biotechnol Bioeng. 2015. Vol.112(4). P.788-800.
  18. Avanzi M.P., Mitchell W.B. Ex vivo production of platelets from stem cells // Br J Haematol. 2014. Vol.165(2). P.237-247.
  19. Lambert M.P., Sullivan S.K., Fuentes R., French D.L., Poncz M. Challenges and promises for the development of donor-independent platelet transfusions // Blood. 2013. Vol.121(17). P.3319-3324.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© КЛЮЧНИКОВ Д.Ю., ЯЗЫКОВА М.Ю., ТЮМИНА О.В., 2015

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».