ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИРИБОЗИЛРИБИТОЛФОСФАТА В КАЧЕСТВЕ АКТИВНОЙ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ПОЛИСАХАРИДНЫХ ВАКЦИН


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Несмотря на мировую практику, в Российской Федерации иммунизация против гемофильной инфекции проводится только у детей из групп риска, что может быть связано с отсутствием производства данной вакцины в РФ. Поэтому разработка технологии получения полирибозилрибитолфосфата (ПРФ, действующее вещество Hib-вакцины) остается актуальной. Ранее сотрудниками ФГУП СПбНИИВС ФМБА России был выделен и идентифицирован штамм Haemophilus influenzae SPB тип b В-7884, подобраны условия его культивирования и первичного выделения ПРФ из культуральной жидкости. Цель работы – изучение возможности исключения стадии центрифугирования для отделения биомассы H. influenzae SPB тип b В-7884 перед осветлением на каскаде фильтровальных дисков, а также разработка последующих этапов выделения ПРФ из полученного промежуточного продукта. Материалы и методы. Выделение ПРФ из инактивированной культуральной жидкости штамма В-7884 проводили при помощи центрифугирования, фильтрации, осаждения, гомогенизации, экстракции при различных условиях. Концентрацию ПРФ в промежуточных продуктах определяли орциноловым методом, подлинность – при помощи реакции латекс-агглютинации. Результаты и обсуждение. Подобрана оптимальная схема выделения и очистки активной фармацевтической субстанции ПРФ, включающая фильтрацию через каскад глубинных фильтров Zeta plus LP 60 (0,3–0,6 мкм) и Zeta plus LP 90 (0,1–0,3 мкм), концентрирование и диафильтрацию на ультрафильтрационных кассетах с номинальным отсечением по молекулярной массе 30 кДа, осаждение 10% раствором цетилтриметиламмония бромида (5% по объему) с последующей гомогенизацией полученного осадка (в присутствии 12,5% этанола от объема концентрата) и экстракцией (32,5% этанола), фильтрацию через глубинные фильтры Zeta Plus SP 30 и угольные фильтры Zeta Plus Carbon R53, а также осаждение 1,0% (по объему) 4,0 M раствором натрия хлорида и заморозку при –(20±2)°С. Заключение. Полученные результаты станут основой для дальнейшей наработки субстанции полисахарида и позволят приступить к следующему этапу разработки технологии вакцины против Haemophilus influenzae тип b – конъюгации с белком-носителем. 

Об авторах

Е. Л. Салимова

Федеральное государственное унитарное предприятие «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов» Федерального медико-биологического агентства

Email: e.l.salimova@spbniivs.ru

А. Д. Конон

Федеральное государственное унитарное предприятие «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов» Федерального медико-биологического агентства

Email: a.d.konon@spbniivs.ru

В. П. Трухин

Федеральное государственное унитарное предприятие «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов» Федерального медико-биологического агентства

Email: fake@neicon.ru

И. В. Красильников

Федеральное государственное унитарное предприятие «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов» Федерального медико-биологического агентства

Email: i.v.krasilnikov@spbniivs.ru

Список литературы

  1. World Health Organization: Immunization, Vaccines and Biologicals. Haemophilus influenzae type b (Hib). URL: http://www.who.int/immunization/monitoring_surveillance/burden/vpd/surveillance_type/sentinel/Hib/en/ (дата обращения: 29.01.2018).
  2. Yang Y., Pan X., Cheng W., Yang Y., Scherpbier R.W., Zhu X., Chen Y., Zhou Y., Jiang Q. Haemophilus influenzae type b carriage and burden of its related diseases in Chinese children: Systematic review and meta-analysis // Vaccine. 2017. Vol. 35. Is. 46. P. 6275–6282. doi: 10.1016/j.vaccine.2017.09.057
  3. Wang S., Tafalla M., Hanssens L., Dolhain J. A review of Haemophilus influenzae disease in Europe from 2000-2014: challenges, successes and the contribution of hexavalent combination vaccines // Expert Rev Vaccines. 2017. Vol. 16. Is. 11. P. 1095–1105. doi: 10.1080/14760584.2017.1383157
  4. Chongmelaxme B., Hammanee M., Phooaphirak W., Kotirum S., Hutubessy R., Chaiyakunapruk N. Economic evaluations of Haemophilus influenzae type b (Hib) vaccine: a systematic review // J Med Econ. 2017. Vol. 20 Is. 10. P. 1094–1106. doi: 10.1080/13696998.2017.1359181
  5. Sakata H., Adachi Y., Morozumi M., Ubukata K. Invasive Haemophilus influenzae infections in children in Kamikawa subprefecture, Hokkaido, Japan, 2006-2015: The effectiveness of H. influenzae type b vaccine // J Infect Chemother. 2017. Vol. 23. Is. 7. P. 459–462. doi: 10.1016/j.jiac.2017.03.019
  6. Yohou K.S., Aka N.L., Noufe S., Douba A., Assi Assi B., Dagnan S.N. Evaluation of introduction of the Haemophilus influenzae vaccine in Côte d’Ivoire// Sante Publique. 2016. Vol. 28. Is. 5. P. 655–664.
  7. Casey R.M., Dumolard L., Danovaro-Holliday M.C., Gacic-Dobo M., Diallo M.S., Hampton L.M., Wallace A.S. Global Routine Vaccination Coverage, 2015 // Morb Mortal Wkly Rep (MMWR). 2016. Vol. 65. Is. 45. P. 1270– 1273. doi: 10.15585/mmwr.mm6545a5
  8. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. МР 3.3.1.0001-10 Эпидемиология и вакцинопрофилактика гемофильной инфекции типа b. М, 2010. 32 с.
  9. Союз педиатров России. Федеральные клинические рекомендации по вакцинопрофилактике гемофильной инфекции типа b у детей. URL: http://www.pediatr-russia.ru/sites/default/files/file/kr_gemib.pdf (дата обращения: 29.01.2018).
  10. Приказ Минздрава России от 21.03.2014 № 125н «Об утверждении национального календаря профилактических прививок и календаря профилактических прививок по эпидемическим показаниям».
  11. Салимова Е.Л., Конон А.Д., Трухин В.П., Петровский С.В., Красильников И.В. Haemophilus influenzae SPB тип b В-7884 – производственный штамм полисахаридных вакцин // Актуальная биотехнология. 2016. № 3 (18). С. 77–81.
  12. Трухин В.П., Петровский С.В., Красильников И.В., Начарова Е.П., Евтушенко Ф.Э., Салимова Е.Л., Конон А.Д., Уйба С.В. Штамм Haemophilus influenzae SPB тип в – высокоактивный продуцент капсульного полисахарида полирибозилрибитолфосфата. Пат. 2624014 Рос. Федерация N 2016113658; заявл. 08.04.2016; опубл. 30.06.2017, Бюл. N 19. 8 с.
  13. Конон А.Д., Салимова Е.Л., Трухин В.П., Петровский С.В., Красильников И.В. Особенности культивирования Haemophilus influenzae SPB тип b В-7884 – продуцента полирибозилрибитолфосфата // Актуальная биотехнология. 2016. № 3 (18). С. 67–71.
  14. Салимова Е.Л., Конон А.Д., Басакина И.И., Красильников И.В. Выделение целевого продукта полисахарида полирибозилрибитолфосфата из культуральной жидкости Haemophilus influenzae тип b с целью производства субстанции для полисахаридных вакцин // V Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием «Инновации в здоровье нации» (г. Санкт-Петербург, 8–9 ноября 2017 г.). С. 337–340.
  15. Конон А.Д., Салимова Е.Л., Басакина И.И., Красильников И.В. Оптимизация методики определения концентрации полирибозилрибитолфосфата в процессе производства субстанции для полисахаридных вакцин // V Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием «Инновации в здоровье нации» (г. Санкт-Петербург, 8–9 ноября 2017 г.). С. 194–198.
  16. Junqiang L., Qian S., Qiumin Zh., Yabing L., Hejun L., Yongjie J., inventor; Tasly Pharmaceutical Group Co., Ltd., assignee. Haemophilus influenzae type B polysaccharide conjugate vaccine preparation method. CN103623404 (B). 2016 Aug 03.
  17. Acep R., Neni N. Isolation and purification of capsular polysaccharide of Haemophilus influenzae type b (Hib) by hexadecyltrimethylammonium bromide (CTAB) precipitation and chromatography / Proceeding of The International Seminar on Chemistry. 2008 Oct: 294–296.
  18. Hamidi A., Beurret M.F., inventor; De Staat Der Nederlanden, Vert. Door De Minister Van Vws, assignee. Process for producing a capsular polysaccharide for use in conjugate vaccines. United States patent. US 7582459 B2. 2009 Sep 1.
  19. Ella K.M., Ramasamy V., Naidu M.G., Sarma A.D., inventor; Bharat Biotech International Limited, assignee. Nonalcoholic vaccine compositions free from animal- origin and process for preparation thereof / World intellectual property organization WO 2014009971 (A2). 2014 Jan 16.
  20. Wieruszeski J.M., Talaga P., Lippens G. Development of a high-resolution magic-angle spinning nuclear magnetic resonance identity assay of the capsular polysaccharide from Haemophilus influenzae type b present in cetavlon precipitate // Anal Biochem. 2005. Vol. 338. Is. 1. P. 20-25. doi: 10.1016/j.ab.2004.10.038
  21. Biswas S.C., Chattoraj D.K. Polysaccharide-surfactant interaction. 2. Bindingof cationic surfactants to carboxymethyl cellulose and dextrin // Langmuir. 1997. Vol. 13. P. 4512–4519.
  22. Bao H., Li L., Gan L.H., Zhang H. Interactions between ionic surfactants and polysaccharides in aqueous solutions // Macromolecules. 2008. Vol. 41.Is. 23. P. 9406–9412.
  23. Maulik S., Jana P., Moulik S., Chattoraj D. Biopolymer-surfactant interation. I. Kinetics of binding of cetyltrimethyl ammonium bromide with carboxymethylcellulose // Biopolymers. 1995. Vol. 35. P. 533–541. DOI: 10.1002/ bip.360350512
  24. Noyes A., Boesch A., Godavarti R., Titchener-Hooker N., Coffman J., Mukhopadhyay T. High throughput quantification of capsular polysaccharides for multivalent vaccines using precipitation with a cationic surfactant // Vaccine. 2013. Vol. 31. Is. 48. P. 5659–5665. doi: 10.1016/j.vaccine.2013.09.075
  25. Rana R., Dalal J., Singh D., Kumar N., Hanif S., Joshi N., Chhikara M.K. Development and characterization of Haemophilus influenzae type b conjugate vaccine prepared using different polysaccharide chain lengths // Vaccine. 2015. Vol. 33. Is. 23. P. 2646–2654. doi: 10.1016/j.vaccine.2015.04.031
  26. Abdelhameed A.S., Adams G.G., Morris G.A., Almutairi F.M., Duvivier P., Conrath K., Harding S.E. A glycoconjugate of Haemophilus influenzae Type b capsular polysaccharide with tetanus toxoid protein: hydrodynamic properties mainly influenced by the carbohydrate // Sci Rep. 2016. Vol. 6. P. 22208. DOI: 10.1038/ srep22208
  27. Sigma Aldrich: Glycobiology Analysis Manual, 2nd Edition. Lipopolysaccharides. URL: https://www.sigmaaldrich. com/content/dam/sigma-aldrich/articles/biology/Glycobiology/glycobiology-pdf/lipopolysaccharides.pdf (дата обращения: 29.01.2018).
  28. Arsang A., Tabatabaie A., Vaziri F., Nejati M., Zolfaghari M.R., Fateh A., Jamnani F.R., Bahrmand A.R., Siadat S.D. Optimization of large scale production of Haemophilus influenzae type b polyribosyl-ribitol phosphate // Minerva Biotecnologica. 2017. Vol. 29. Is. 1. P. 17–23. doi: 10.23736/S1120-4826.16.01855-3

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Салимова Е.Л., Конон А.Д., Трухин В.П., Красильников И.В., 2018

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
 

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».