КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СУММЫ ФЕНИЛПРОПАНОИДОВ В НАСТОЙКЕ СТЕВИИ МЕТОДОМ СПЕКТРОФОТОМЕРИИ

Полный текст

Введение В настоящее время не угасает интерес к лекарственным растительным препаратам, которые могут использоваться в терапии различных заболеваний наряду с препаратами синтетического происхождения. Стевия Ребо (Stevia rebaudiana Bertoni, сем. Астровые - Asteraceae) является потенциальным лекарственным растением для получения фармацевтических субстанции. В настоящее время стевия является малоизученным растением, недостаточно изучен химический состав. Следовательно, актуальным представляется разработка лекарственных растительных препаратов на основе стевии листьев, в том числе такой лекарственной формы, как настойка [1, 2, 4, 11]. Стевия Ребо является источником получения биологически активных соединений, применяемых в составе комплексной терапии для профилактики и лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта, эндокринной системы, сердечно-сосудистой системы, ротовой полости [1, 10]. В стевии листьях обнаружены дитерпеновые гликозиды: стевиозид, ребаудиозиды А, В, С, Д и Е, дулиобиозид, стеревины Е, F, G, H, стевиолбиозид. Кроме комплекса дитерпеновых гликозидов в стевии листьях обнаружены биологически активные соединения других классов химических соединений (эфирные маасла, флавоноиды, сапонины, органические кислоты, каротиноиды, фенилпропаноиды) [2, 3, 5, 6, 9]. Известно, что стевия обладает широким спектром фармакологической активности, включая гипогликемический, противовоспалительный, адаптогенный и антиоксидантный эффекты [1, 11]. Цель исследования - провести определение количественного содержания суммы фенилпропаноидов в настойке стевии. Методика Объектами исследования служили образцы настоек из листьев стевии на спиртах различной концентрации - 40%, 70%, 96%. Количественное определение содержание суммы фенилпропаноидов оценивали методом прямой спектрофотометрии в пересчете на хлорогеновую кислоту [5, 7, 8, 12]. Образцы настоек на основе листьев стевии были получены методом модифицированной мацерации, перколяции мацерации и ремацерации [8]. Полученные настойки представляют собой прозрачную или опалесцирующую жидкость коричнево-зеленого цвета, запах - специфический, вкус - сладковатый. Результаты исследования и их обсуждение Определение содержания суммы фенилпропаноидов в настойке в пересчете на хлорогеновую кислоту в процентах (X) вычисляют по формуле: , где X - содержание фенилпропаноидов в 1 мл настойки, %; D - оптическая плотность исследуемого раствора; 497 - удельный показатель поглощения хлорогеновой кислоты при аналитической длине волны 330 нм. Одним из наиболее распространенных методов определения фенилпропаноидов является прямая спектрофотометрия [7]. Количественное определение суммы фенилпропаноидов в настойке стевии спектрофотометрическим методом проводили в пересчете на хлорогеновую кислоту, исходя из спектров извлечения из настойки и хлорогеновой кислоты (рис.). Рис. УФ-спектр настойки стевии (1) и хлорогеновой кислоты (2) В ходе исследования были получены образцы настоек из листьев стевии методом ремацерации, мацерации, перколяции на 20%, 30%, 40%, 50%, 60% и 70% спирте этиловом. В качестве метода количественного анализа для определения содержания суммы фенилпропаноидов в настойках стевии нами предложен метод прямой спектрофотометрии в пересчете на хлорогеновую кислоту. Определены максимумы собственного поглощения фенилпропаноидов настоек из листьев стевии - 290 нм (плечо) и 330 нм (максимум). Положение максимумов не меняется при использовании в качестве экстрагента этанола различной концентрации. Раствор СО хлорогеновой кислоты имеет максимум поглощения при 330±2 нм и «плечо» при 290±2 нм. Ввиду близкого расположения максимумов поглощения исследуемой настойки из сырья стевии и вещества-стандарта хлорогеновой кислоты, одним из целесообразных вариантов стандартизации является прямая спектрофотометрия. С целью пересчета содержания веществ фенольной природы в настойке из листьев стевии на хлорогеновую кислоту нами был использован удельный показатель поглощения хлорогеновой кислоты при λ=330 нм для прямой спектрофотометрии [6, 7, 8]. Значение =497 было включено в формулу расчета, что позволило не использовать СО хлорогеновой кислоты в последующих определениях. Для снятия спектров настоек в мерную колбу на 50 мл помещали 1 мл исследуемой настойки листьев стевии и доводили спиртом этиловым необходимой концентрации до метки (раствор А). Затем 1 мл раствора А помещали в мерную колбу на 25 мл и доводили объем раствора до метки спиртом этиловым 70% (раствор В). Спектры снимали на фоне раствора сравнения - 70% спирте. Полученные УФ-спектры по своим спектральным характеристикам сопоставимы с таковыми растворов извлечений из листьев стевии. Изучалось влияние экстрагента на процесс экстракции, методом перколяции (табл. 1). При этом спирт этиловый 70%-ной концентрации был выбран в качестве оптимального экстрагента. Таблица 1. Зависимость выхода БАС настойки стевии от концентрации спирта, методом перколяции № п/п Концентрация спирта, % Содержание суммы фенилпропаноидов в пересчете на хлорогеновую кислоту, % 1 20 1,31±0,09% 2 30 1,25±0,07% 3 40 1,57±0,07% 4 50 1,66±0,08% 5 60 1,89±0,07% 6 70 1,92±0,07% Изучалось влияние способа настаивания (табл. 2). При этом метод модифицированной мацерации выбран в качестве оптимального. Таблица 2. Зависимость выхода БАС настойки стевии от концентрации спирта, методом перколяции № п/п Концентрация спирта, % Содержание суммы фенилпропаноидов в пересчете на хлорогеновую кислоту 1 Модифицированная мацерация 2,95±0,10% 2 Мацерация 1,80±0,06% 3 Перколяция 1,71±0,08% 4 Ремацерация 1,92±0,07% Установлено, что содержание фенилпропаноидов в настойке стевии варьирует от 1,71 до 2,95%. Метрологические характеристики методики количественного определения суммы фенилпропаноидов в настойке стевии методом прямой спектрофотометрии указаны в табл. 3. Результаты статистической обработки полученных результатов свидетельствуют о том, что ошибка единичного определения с доверительной вероятностью 95% составляет не более ±3,5% при определении суммы фенилпропаноидов методом прямой спектрофотометрии в пересчете на хлорогеновую кислоту. Таблица 3. Метрологические характеристики методики количественного определения суммы фенилпропаноидов в настойке стевии ЛРС N F S P, % t (P, f) ∆ E, % Модифицированная мацерация 5 4 2,95 0,00628 0,079246 95 2,776 ±0,069 ±3,33 Заключение Проведены исследования по получению и стандартизации настойки стевии. В качестве метода количественного определения суммы фенилпропаноидов настойки стевии, нами предложен метод прямой спектрофотометрии с определением суммы фенилпропаноидов в пересчете на хлорогеновую кислоту, при аналитической длине волны 330 нм. Выявлено, что содержание фенилпропаноидов в настойке стевии варьирует в интервале 1,71-2,95%. Наибольшее количество фенилпропаноидов содержится в настойке стевии полученной способом модифицированной мацерации (2,95%).

Об авторах

Евгений Евгеньевич Курдюков

Пензенский государственный университет

Email: email@example.com
кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры «Общая и клиническая фармакология» ФГБОУ ВО «Пензенский государственный университет» Минздрава России Россия 440026, Пенза, ул. Красная 40

Ольга Евгеньевна Правдивцева

Самарский государственный медицинский университет

Email: email@example.com
доктор фармацевтических наук, профессор кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Минздрава России Россия, 443099, Самара, ул. Чапаевская, 89

Кристина Артуровна Фриндак

Пензенский государственный университет

Email: email@example.com
студентка 3 курса специальности «Фармация» ФГБОУ ВО «Пензенский государственный университет» Россия 440026, Пенза, ул. Красная 40

Виктория Андреевна Неклюдова

Пензенский государственный университет

Email: email@example.com
студентка специальности «Фармация» ФГБОУ ВО «Пензенский государственный университет» Минздрава России Россия 440026, Пенза, ул. Красная 40

Дарья Александровна Плешакова

Пензенский государственный университет

Email: email@example.com
студентка специальности «Фармация» ФГБОУ ВО «Пензенский государственный университет» Минздрава России Россия 440026, Пенза, ул. Красная 40

Список литературы

Дополнительные файлы