ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ ТРАВЫ ПОДОРОЖНИКА ПЕСЧАНОГО (PLANTAGO ARENARIA WALDST. & KIT.)

Полный текст

Введение Plantago arenaria Waldst. & Kit. или Подорожник песчаный - растение из семейства Подорожниковых (Plantaginaceae) [6], произрастающее на юго-востоке России [плантариум]. В ряде источников подорожник песчаный считается синонимом подорожника индийского (Plantago indica L.) [7, 14, 20]. В фармацевтической практике традиционно подорожник индийский называют Подорожником блошным (Plantago psyllium L.) [4]. В российской ботанической литературе Plantago arenaria Waldst. & Kit. и некоторых зарубежных статьях принято считать самостоятельным таксоном [5, 8, 19] и мы в нашей работе будем следовать этому правилу. Несмотря на то, что в отношении названия растения до сих пор ведутся дискуссии, сырье этого растения издавна используется в медицине. В его составе обнаружены слизи, флавоноиды, иридоиды [18]. Его семена содержат слизи, жирные кислоты, большое количество альбуминовых веществ, плантиозу, тритерпеноид β-олеаноловая кислота, иридоидный гликозид плантареналозид и фенилпропаноидный гликозид вербаскозид [15]. Трава подорожника блошного является официнальным, импортируемым из Туркменистана, лекарственным растительным сырьем [2]. Стандартизация его проводится по ФС 42-567-86, в числовых показателях приводятся требования только к содержанию сухого остатка в соке [4]. Трава подорожника блошного содержит полисахариды, флавоноиды, каротиноиды и дубильные вещества [1, 2, 20], используется как слабительное, гипогликемическое, гиполипидемическое, жаропонижающее, ранозаживляющее, противопростудное, кровоостанавливающее средство [1, 2, 21]. Порошок семян используют как легкое слабительное. Слизь семян используют наружно, при лечении термических ожогов. Успешно семена подорожника блошного используются при лечении разных видов гастритов, свойства растения связывают с пищевыми волокнами [2, 3, 16, 21]. Из подорожника блошного получают препарат «Плантаглюцид», который применяется для лечения заболеваний ЖКТ и является одним из наиболее часто назначаемых препаратов [9]. В последнее время всё больше усилий направляется на решение вопроса импортозамещения, одной из основных задач которого, является сокращение зависимости от импорта для снижения политических и валютных рисков. Поскольку сырье «Подорожника блошного трава» является импортируемым, поиск отечественного аналога его является актуальным. Целью исследования явилась оценка возможности использования подорожника песчаного, произрастающего в Волгоградской области, как источника лекарственного растительного сырья, способного заменить траву подорожника блошного. Методика Объектом изучения является сырье «Подорожника песчаного трава», собранное в Городищенском районе Волгоградской области. Заготовка сырья была осуществлена в фазу массового цветения растения в июне 2023 г. Изучение морфологических и анатомических признаков осуществлялось в соответствии с требованиями Государственной Фармакопеи Российской Федерации XV издания: ОФС.1.5.1.0002 «Травы» [11], ОФС.1.5.3.0003 «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» [12]. Анализ проводили при помощи микроскопа «Zeiss Primo Star», микрофотографии делали с помощью цифровой камеры «Zeiss Axiocam 105 color», с соответствующим программным обеспечением. Количественное определение содержания действующих веществ в сырье «Подорожника песчаного трава» проводили, используя методики ФС.2.5.0032.15 «Подорожника большого листья» [15], так как данный вид сырья имеет сходный химический состав и также используется для изготовления препарата «Плантаглюцид». Определение влажности сырья проводили согласно ОФС.1.5.3.0007 «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» [10]. Результаты исследования Исследуемое сырье «Подорожника песчаного трава» представляет собой верхушки растений с прямыми, маловетвистыми обильно железисто опушенными стеблями, супротивными листьями и соцветиями. Стебли до 30 см. Листья длиной от 2 до 7 см, простые, цельные, линейные, с клиновидным основанием, опушенные железистыми и простыми волосками. Цветки мелкие, собраны в густые головчатые соцветия, расположенные на длинных цветоносах. Прицветники заостренные, с пленчатыми краями, чашелистики тупые, реже с заостренной верхушкой, по краю пленчатые. Венчик трубчатый, с четырехлопастным отгибом, буроватый, пленчатый, зев венчика волосистый, тычинок 4, завязь верхняя. Запах слабый, вкус водного извлечения слабо-горьковатый. Рис. 1. Внешние признаки лекарственного растительного сырья «Подорожника песчаного трава». 1 - общий вид соцветия, 2 - прицветники, 3 - листья, 4 - верхушка соцветия, 5 -верхушка побега с листьями При рассмотрении тотального поверхностного микропрепарата листа наблюдаются изодиаметрические клетки эпидермиса, которые с обеих сторон одинаковые, слегка вытянутые по длине листа, с почти прямыми стенками. Устьица расположены равномерно на обеих сторонах листа. Устьичный аппарат аномоцитный, число побочных клеток от 2 до 4, причем, если околоустьичных клеток 2 - тип устьичного аппарата приближен к диацитному, если 4 - к тетрацитному. При рассмотрении листа с поверхности диагностическое значение имеют волоски. Простые волоски, конусовидные с расширенным основанием, с толстой оболочкой, многоклеточные. Средняя длина волосков варьирует от 220 до 320 мкм. Головчатые волоски трех типов крупные с многоклеточной ножкой и одноклеточной головкой размером около 200 мкм, с одноклеточной ножкой и двуклеточной головкой, длина около 40 мкм в среднем, и многоклеточные, которые состоят из 3-5 секретирующих клеток, расположенных друг над другом, размером около 70 мкм. На тотальном поверхностном микропрепарате чашечки и прицветника на пленчатой части видны сильно извилистые клетки эпидермиса с утолщенными стенками, вытянутые параллельно центральной жилке. В центральной части чашелистиков и прицветников клетки эпидермиса с почти прямыми стенками, также вытянутыми вдоль центральной жилки. Устьица расположены на обеих сторонах, такого же типа, как и на листьях. На пленчатой части чашечки и прицветника волосков несколько меньше. Эпидермис лепестков очень тонкий, состоит из клеток с прямыми стенками, вытянутых вдоль лепестка. Устьица здесь встречаются крайне редко, а волоски всех типов сосредоточены в зеве трубки венчика. Рис. 2. Фрагменты тотального поверхностного микропрепарата листа подорожника песчаного. 1 - эпидермис с устьицами, 2 - многоклеточный головчатый волосок, 3 - головчатый волосок с одноклеточной ножкой и двуклеточной головкой, 4 - простой волосок, 5 - головчатый волосок с многоклеточной ножкой и одноклеточной головкой На микропрепарате поперечного среза листа подорожника песчаного хорошо видны изодиаметрические клетки эпидермиса. Под эпидермисом находятся клетки мезофилла, более мелкие ближе к эпидермису, более крупные ближе к жилкам. В жилках располагаются коллатеральные проводящие пучки, окруженные с обеих сторон склеренхимными волокнами. Пучок центральной жилки крупный, остальные значительно мельче. Все пучки расположены в одной плоскости (жилки параллельны друг другу). В мелких проводящих пучках со стороны ксилемы склеренхимных волокон относительно мало, а в некоторых они могут отсутствовать. На микропрепарате поперечного среза стебля подорожника песчаного наблюдается классическая картина вторичного строения, характерная для двудольных растений. Покровная ткань представлена однослойной эпидермой, покрытой толстым слоем кутикулы с утолщенными стенками. Под эпидермой находятся ткани первичной коры. Колленхима отсутствует. Ассимилирующая паренхима состоит из нескольких слоев крупных округлых и эллиптических клеток с небольшими межклетниками. Эндодерма двухслойная, состоит из крупных, вытянутых вдоль центрального осевого цилиндра клеток. Перицикл представлен прерывистым склеренхимным кольцом. Флоэма и ксилема образуют сплошные слои. Во флоэме отсутствуют лубяные волокна. В ксилеме сосредоточено большое количество древесных волокон, паренхимные клетки практически не заметны. Протоксилема состоит из мелких сосудов, которые тяжами вдаются в сердцевину. Клетки сердцевины постепенно увеличиваются к центру и имеют утолщенные стенки. Содержание основных действующих веществ в исследуемом сырье «Подорожника песчаного трава» проводили, используя методики ФС.2.5.0032.15 «Подорожника большого листья» [13]. Определение содержания полисахаридов проводили гравиметрически. Точную навеску (10 г) измельченного сырья поместили в колбу со шлифом вместимостью 500 мл, прибавили 200 мл воды очищенной, нагретой до кипения. Колбу присоединили к обратному холодильнику и кипятили при перемешивании на электрической плитке в течение 30 мин. Экстракцию повторили дважды, добавляя 200 и 100 мл воды. Рис. 3. Фрагменты тотального поверхностного микропрепарата цветка подорожника песчаного. 1 - край прицветника, 2 - простые волоски на чашелистике, 3 - головчатые волоски на чашелистике, 4 - клетки эпидермиса на пленчатой части чашелистика, 5 - эпидермис лепестка Рис. 4. Фрагменты тотального поверхностного микропрепарата поперечного среза листа подорожника песчаного. 1 - центральная жилка, 2 - нижний эпидермис, 3 - проводящий пучок второстепенной жилки, 4 - проводящий пучок центральной жилки, 5 - верхний эпидермис и клетки мезофилла Рис. 5. Фрагменты микропрепарата поперечного среза стебля подорожника песчаного. 1 - поперечный срез стебля, 2 - первичная кора, 3 - граница коры и центрального осевого цилиндра, 4 - вторичная ксилема, 5 - первичная ксилема и сердцевина Водные извлечения объединили и профильтровали в мерную колбу вместимостью 500 мл через 5 слоев марли, вложенной в стеклянную воронку и предварительно промытой водой очищенной. Фильтр промыли водой и довели объём раствора до метки (раствор А). 25 мл раствора А помещают в коническую колбу на 100 мл, прибавили 75 мл спирта 95%, перемешали, подогрели на водяной бане в течение 30 мин. Содержимое колбы профильтровали через предварительно высушенный и взвешенный беззольный бумажный фильтр. Осадок на фильтре последовательно промыли 15 мл раствора спирта 95% в воде очищенной (3:1), 10 мл смеси этилацетата и спирта 95% (1:1). Фильтр с осадком высушили постоянной массы. Содержание полисахаридов (Х) вычисляют по формуле: где m1- масса фильтра, г; m2 - масса фильтра с осадком, г; m - навеска сырья, г; W - влажность, %. Расчеты: Содержание полисахаридов составило 10,7%. Содержание суммы флавоноидов проводили методом дифференциальной спектрофотометрии [13]. Около 1 г (точная навеска) измельченного сырья или порошка поместили в колбу со шлифом вместимостью 150 мл, прибавили 80 мл спирта 70%. Колбу присоединили к обратному холодильнику и нагрели на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Горячее извлечение профильтровали через вату в мерную колбу вместимостью 100 мл. К содержимому колбы добавили спирт 70% дважды по 10 мл и фильтруем в ту же мерную колбу. Извлечение охлаждаем, доводим до метки спиртом 70% и перемешиваем (раствор А). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещаем 2 мл раствора А и 2 мл алюминия хлорида раствора спиртового 2% в 95% спирте этиловом. Доводим объем раствора спиртом 95% до метки. Через 40 мин. измеряем оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 385 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используем раствор, состоящий из 2 мл извлечения, 1 капли кислоты уксусной разведенной и доведенный спиртом 95% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид в процентах (Х) вычисляют по формуле: где А - оптическая плотность испытуемого раствора, а - масса сырья, г; W - влажность, %; 361-удельный показатель поглощения комплекса стандартного образца цинарозида с алюминия хлоридом при длине волны 385 нм. Расчеты: В результате сумма флавоноидов в пересчете на цинарозид составила 1,04%. Обсуждение результатов исследования В результате фармакогностического анализа лекарственного растительного сырья «Подорожника песчаного трава» были изучены морфологические и анатомические, макро- и микроскопические признаки данного сырья. В целом картина микроскопии сходна с картиной микроскопии сырья Подорожника блошного трава [11], однако есть несколько отличий: на листьях, чашечке и прицветниках имеется несколько типов волосков, один из которых не приводится в качестве диагностического признака для сырья Подорожника блошного. Это многоклеточные железистые волоски, которые состоят из 3-5 секретирующих клеток, расположенных друг над другом. В других работах наличие этих волосков не указывается [17], однако на листьях растений из популяций, произрастающих в Волгоградской области, эти волоски отмечаются из года в год. Описание поперечных срезов стеблей и листьев, может дополнять картину микроскопии сырья «Подорожника песчаного трава». Особое значение это имеет для измельченного сырья, поскольку стебли составляют до половины массы сырья и при измельчении сохраняют свою внутреннюю структуру. Картина микроскопии поперечных срезов листьев и стеблей подорожника песчаного полностью совпадает с описанием таковой у подорожника песчаного, произрастающего в Румынии [17], это говорит о стабильности данных признаков для сырья «Подорожника песчаного трава». В подорожнике большом, сырье которого также используется для получения препарата «Плантаглюцид», содержание полисахаридов должно быть не менее 12%, а сумма флавоноидов в пересчете на циннарозид не менее 0,6% [13]. В результате исследования сырья «Подорожника песчаного трава» содержание полисахаридов составило 10,7%, сумма флавоноидов в пересчете на цинарозид составила 1,04%. В сырье «Подорожника песчаного трава» содержание действующих веществ сопоставимо с таковым в официнальном лекарственном сырье. Все это говорит о перспективности дальнейшего изучения данного сырья. Заключение Сырье «Подорожника песчаного трава», произрастающего в Волгоградской области накапливает достаточное количество действующих веществ, что не уступает по показателям подорожника блошного, и может рассматриваться как источник лекарственного растительного сырья, что особенно важно при поиске аналогов импортируемых продуктов и субстанций.

Об авторах

Инна Владимировна Землянская

Волгоградский государственный медицинский университет

Email: email@example.com
кандидат биологических наук, доцент кафедры фармакогнозии и ботаники ФГБОУ ВО «Волгоградского государственного медицинского университета» Минздрава России Россия, 400066, Волгоград, площадь Павших Борцов, 1

Алла Владимировна Яницкая

Волгоградский государственный медицинский университет

Email: email@example.com
кандидат биологических наук, заведующая кафедрой фармакогнозии и ботаники ФГБОУ ВО «Волгоградского государственного медицинского университета» Минздрава России Россия, 400066, Волгоград, площадь Павших Борцов, 1

Инна Камоевна Саркисян

Волгоградский государственный медицинский университет

Email: email@example.com
ассистент кафедры фармакогнозии и ботаники ФГБОУ ВО «Волгоградского государственного медицинского университета» Минздрава России Россия, 400066, Волгоград, площадь Павших Борцов, 1

Дарья Владимировна Бескрылова

Волгоградский государственный медицинский университет

Email: email@example.com
студентка ФГБОУ ВО «Волгоградского государственного медицинского университета» Минздрава России Россия, 400066, Волгоград, площадь Павших Борцов, 1

Эмина Гафиловна Гасанова

Волгоградский государственный медицинский университет

Email: email@example.com
студентка ФГБОУ ВО «Волгоградского государственного медицинского университета» Минздрава России Россия, 400066, Волгоград, площадь Павших Борцов, 1

Список литературы

Дополнительные файлы