Метод идентификации acinetobacter baumannii bv. tryptophandestruens и его суббиоваров А и В

Цель исследования — повысить диагностическую чувствительность идентификации бактерий A. baumannii bv. tryptophandestruens и определить распространенность этого биовара и его суббиоваров среди клинических изолятов A. baumannii. Объектом исследования были 210 первичных штаммов A. baumannii, выделенных в 2021–2022 гг. в бактериологической лаборатории Военно-медицинской академии имени С.М. Кирова, из них 42 — штаммы A. baumannii bv. tryptophandestruens. Бактерии биовара tryptophandestruens идентифицировали по хромогенной биотрансформации бензоата натрия на плотной питательной среде (г/л): пептон ферментативный 5,0; NaCl 5,0; FeCl₃ 6H₂O (10% водный раствор) 0,1–1 мл; бромтимоловый синий (1,6% водный раствор) 3 мл; агар 15,0; NaOH (4% раствор) 2,6–3 мл; вода дистиллированная 1 л; все компоненты растворяли при нагревании, затем добавляли бензоат натрия (CAS 532-32-1) 1,0–2,0; корректировали рН 7,2±0,2; стерилизовали при 121°С, разливали в чашки. Бактерии суббиоваров А и В биовара tryptophandestruens идентифицировали по хромогенной биотрасформации L-триптофана, используя эту же питательную среду с L-триптофаном (1,0–2,0 г/л) вместо бензоата натрия. Обе питательные среды применяли одновременно. Исследуемые культуры A. baumannii засевали петлей на среды в виде бляшки, инкубировали аэробно при 37°С 18–24 ч, затем учитывали результат: наличие темно-коричневой зоны окраски питательной среды вокруг газона бактерий на среде с бензоатом натрия и на среде с L-триптофаном указывало на их принадлежность к суббиовару А биовара tryptophandestruens; при наличии зоны темно-коричневой окраски питательной среды вокруг газона бактерий на среде с бензоатом натрия и отсутствии зоны окраски на среде с L-триптофаном идентифицировали биовар tryptophandestruens суббиовар В. В результате исследования впервые выявлена хромогенная биотрансформация бензоата натрия (бензойной кислоты) и ее значение как маркера биовара tryptophandestruens A. baumannii. Обнаружены два суббиовара А и В биовара tryptophandestruens. Разработан метод идентификации биовара tryptophandestruens A. baumannii и его суббиоваров А и В по хромогенной биотрасформации бензоата натрия и L-триптофана, что повышает диагностическую чувствительность метода за счет выявления суббиовара В. Установлена частота распространения бактерий биовара tryptophandestruens среди первичных клинических изолятов A. baumannii в 2021–2022 гг.: из 210 штаммов A. baumannii — 42 (20,0±3,5%) — штаммы bv. tryptophandestruens, в том числе суббиовар А — 27 (12,9±2,3%), суббиовар В — 15 (7,1±1,7%).