Идентификация и определение резистентности к антимикотическим факторам клинических изолятов дрожжей, выделенных при заболевании дыхательных путей

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Распространенность дрожжевых инфекций значительно возросла за последние несколько десятилетий, все более актуальна проблема резистентности выделяемых возбудителей к антимикробным препаратам. К часто встречающимся патогенным грибам относятся дрожжи рода Candida. Доминирующим видом, как в поверхностных, так и в инвазийных инфекционных процессах, является вид Candida albicans. В настоящем сообщении приводятся данные по идентификации и определению устойчивости к антимикотическим препаратам изолятов дрожжей, выделенных из клинического материала от пациентки с хроническим бронхитом и пациента с генерализованной дрожжевой инфекцией. В результате геномной идентификации штамм, вызвавший генерализованную инфекцию, определен как Candida utilis, что подтверждает литературные данные о все большем распространении этого вида, считавшегося редко встречающимся возбудителем инвазионных процессов, в качестве нового опасного патогена. Тестирование на чувствительность к антимикотикам выявило резистентность штамма C. utilis к широко применяемым противогрибковым препаратам, таким как кетоконазол, итраконазол и флуконазол, слабую чувствительность к клотримазолу, нистатину и амфотерицину В. Штамм из материала пациентки с хроническим бронхитом идентифицирован как C. africana, считающийся разновидностью C. albicans. За исключением итраконазола, штамм проявил чувствительность, выраженную в разной степени, к пяти антимикотическим препаратам, использованным в опыте. Оба выделенных штамма дрожжей обладали активным ростом при повышенной температуре, способностью к образованию капсулы, формированию гифальных проростков и биопленок — признаками, отличающими потенциально патогенные штаммы кандид от сапротрофных штаммов. Комбинированная противогрибковая терапия включает в себя применение пробиотических препаратов на основе микроорганизмов, проявляющих антагонизм относительно грибов. В настоящей работе показано эффективное ингибирующее влияние на активность роста исследуемых штаммов патогенных дрожжей и типовой контрольный штамм C. albicans Y-583 секретируемых водорастворимых метаболитов спорообразующих бактерий Bacillus subtilis и Bacillus lichenformis, антисептиков «Октенисепт» и «Хлоргексидин», а также масляных экстрактов розмарина и сандала.

Об авторах

Ирина Сергеевна Андреева

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора

Автор, ответственный за переписку.
Email: andreeva_is@vector.nsc.ru

к.б.н., доцент, ведущий научный сотрудник отдела биофизики и экологических исследований

Россия, п. Кольцово, Новосибирская область

В. В. Морозова

Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН

Email: andreeva_is@vector.nsc.ru

к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории молекулярной биологии

Россия, Новосибирск

А. С. Кабанов

Koltsovo, Novosibirsk Region

Email: andreeva_is@vector.nsc.ru

к.б.н., старший научный сотрудник отдела «Коллекция микроорганизмов»

Россия, п. Кольцово, Новосибирская область

Список литературы

  1. Бабьева И.П., Чернов И.Ю. Биология дрожжей // М.: Товарищество научных изданий КМК, 2004. 221 с. [Babieva I.P., Chernov I.Yu. Biology of yeast. Moscow: Partnership of Scientific Sditions of KMK, 2004, 221 с. (In Russ.)]
  2. Габриэлян Н.И., Горская Е.М., Крупенио Т.В., Зенкова В.А., Ефименко Т.А., Маланичева И.А., Сумарукова И.Г., Ефременкова О.В., Евлашкина В.Ф., Давыдов Д.С. Оценка антимикробной активности бациллярного пробиотика Bacillus subtilis (штамм 534) // Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы. 2016. № 1. С. 41–47. [Gabrielyan N.I., Gorskaya E.M., Krupenio T.V., Zenkova V.A., Efimenko T.A., Malanicheva I.A., Sumarukova I.G., Efremenkova O.V., Evlashkina V.F., Davydov D.S. Evaluation of the antimicrobial activity of the bacterial probiotic Bacillus subtilis-534. Epidemiologiya i infektsionnye bolezni. Aktual’nye voprosy = Epidemiology and Infectious Diseases. Current Items, 2016, no. 1, pp. 41–47. (In Russ.)]
  3. Годовалов А.П., Быкова Л.П., Ожгибесов Г.П. Значение грибов рода Candida при воспалительных заболеваниях дыхательных путей // Сибирский медицинский журнал. 2008. № 7. С. 10–12. [Godovalov A.P., Bykova L.P., Ozhgibesov G.P. Significance of Candida in inflammatory diseases of respiratory tract. Sibirskij medicinskij zurnal = Siberian Medical Journal, 2008, no. 7, pp. 10–12. (In Russ.)]
  4. Капустина О.А., Карташова О.Л., Потехина Л.П., Уткина Т.М. Биопленкообразование Candida spp., выделенных из разных биотопов тела человека // Проблемы медицинской микологии. 2011. Т. 13, № 2. С. 81–82. [Kapustina O.A., Kartashova O.L., Potekhina L.P., Utkina T.M. Biofilm formation of Candida isolated from different human’s biotopes. Problemy meditsinskoi mikologii = Problems of Medical Mycology, 2011, vol. 13, no. 2, pp. 81–82. (In Russ.)]
  5. Кольцов И.П., Стрельникова Н.В., Витько Е.В., Витько Л.Г., Савлюк О.Е. Микробиологические свойства условно-патогенных сахаромицетов рода Candida при хронических, рецидивирующих инфекционно-воспалительных процессах (обзор литературы) // Тихоокеанский медицинский журнал. 2023. № 1. С. 19–26. [Koltsov I.P., Strelnikova N.V., Vitko E.V., Vitko L.G., Savlyuk O.E. Microbiological properties of opportunistic saccharomycetes of the genus Candida in chronic, recurrent infectious inflammatory processes (literature review). Tihookeanskiy medicinskiy zhurnal = Pacific Medical Journal, 2023, no. 1, pp. 19–26. (In Russ.)] doi: 10.34215/1609-1175-2023-1-19-26
  6. Лыков И.Н., Викторова А.С., Муравьева А.С., Петелина К.О. Скрининг эфирных масел на предмет их антимикробной активности // Международный научно-исследовательский журнал. 2023. № 8 (110), Часть 2. С. 19–23. [Lykov I.N., Viktorova A.S., Muravyeva A.S., Petelina K.O. Screening of essential oils for their antimicrobial activity. Mezhdunarodnyi nauchno-issledovatel’skii zhurnal = International Research Journal, 2023, no. 8 (110), part 2, pp. 19–23. (In Russ.)] doi: 10.23670/IRJ.2021.110.8.039
  7. Маланичева И.А., Козлов Д.Г., Ефименко Т.А., Зенкова В.А., Катруха Г.С., Резникова М.И., Королев А.М., Борщевская Л.Н., Тарасова О.Д., Синеокий С.П., Ефременкова О.В. Новые антибиотики, образуемые штаммами Bacillus subtilis // Микробиология. 2014. Т. 83, № 5. С. 445–450. [Malanicheva I.A., Kozlov D.G., Efimenko T.A., Zenkova V.A., Katrukha G.S., Reznikova M.I., Korolev A.M., Borshchevskaya L.N., Tarasova O.D., Sineokii S.P., Efremenkova O.V. New antibiotics produced by Bacillus subtilis strains. Mikrobiologiya = Mikrobiologiya, 2014, vol. 83, no. 4, pp. 445–450. (In Russ.)] doi: 10.7868/S0026365614040119
  8. МУК 4.2.1890-04 Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: Методические указания. М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. 91 с. [MUK 4.2.1890-04 Determination of sensitivity of microorganisms to antibacterial drugs: Methodical instructions. Moscow: Federal Center of Gossanepidnadzor of the Ministry of Health of Russia, 2004. 91 p. (In Russ.)]
  9. Николаева Е.Н. Частота встречаемости в полости рта дрожжеподобных грибов рода Candida при остром респираторном заболевании // Международный научно-исследовательский журнал. 2013. № 5. С. 69–70. [Nikolaeva E.N. The frequency of occurrence in the mouth yeast-like fungi of the genus Candida with acute respiratory diseases. Mezhdunarodnyi nauchno-issledovatel’skii zhurnal = International Research Journal, 2013, vol. 12, no. 5, pp. 69–70. (In Russ.)] https://elibrary.ru/item.asp?id=19077906
  10. Саттон Д., Фотергилл А., Ринальди М. Определитель патогенных и условно патогенных грибов. М.: Мир, 2001. 468 с. [Sutton D., Fothergill A., Rinaldi M. The determination of pathogenic and conditionally pathogenic fungi. Moscow: Mir, 2001. 468 p. (In Russ.)]
  11. Сачивкина Н.П., Ленченко Е.М. Эффективные способы идентификации дрожжеподобных грибов рода Candida // Ветеринария. 2019. № 2. С. 25–28. [Sachivkina N.P., Lenchenko E.M. Effective ways to identify yeast-lice fungi of the genus Candida. Veterinariya = Veterinary Medicine, 2019, no. 2, pp. 25–28. (In Russ.)] doi: 10.30896/0042-4846.2019.22.2.25-28
  12. Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.Б. Кандидоз. Природа инфекции, механизмы агрессии и защиты, лабораторная диагностика, клиника и лечение. М.: Триада, 2001. 472 с. [Sergeev A.Yu., Sergeev Yu.B. Candidiasis. Nature of infection, mechanisms of aggression and protection, laboratory diagnosis, clinic and treatment. Moscow: Triada, 2001, 472 p. (In Russ.)]
  13. Шаповал О.Г., Шереметьева А.С., Дурнова Н.А., Мухамадиев Н.К., Раббимова Г.Т., Назирбеков М.Х. Антимикробная активность эфирных масел Thymus serpyllum L. и Thymus marschallianus Willd. в отношении Candida albicans // Химико-фармацевтический журнал. 2023. Т. 57, № 9. С. 26–31. [Shapoval O.G., Sheremetyeva A.S., Durnova N.A., Mukhamadiev N.Q., Rabbimova G.T., Nazirbekov M.K. Antimicrobial activity of essential oils of Thymus serpyllum L. and Thymus marschallianus Willd. against Candida albicans. Khimiko-farmatsevticheskii zhurnal = Chemical and Pharmaceutical Journal, 2023, vol. 57, no. 9, pp. 26–31. (In Russ.)] doi: 10.30906/0023-1134-2023-57-9-26-31
  14. Borman A.M., Szekely A., Linton C.J., Palmer M.D., Brown Ph., Johnson E.M. Epidemiology, antifungal susceptibility, and pathogenicity of Candida africana isolates from the United Kingdom. J. Clin. Microbiol., 2013, vol. 51, no. 3, pp. 967–972. doi: 10.1016/j.heliyon.2020.e03619
  15. Cannon R.D., Holmes A.R., Mason A.B., Monk B.C. Oral candida: clearance, colonization, or candidiasis? J. Dent. Res., 1995, vol. 74, no. 5, pp. 1152–1161. doi: 10.1177/00220345950740050301
  16. Cavalheiro M., Teixeira M.C. Candida biofilms: threats, challenges, and promising strategies. Front. Med. (Lausanne), 2018, vol. 5: 28. doi: 10.3389/fmed.2018. 00028
  17. Cortegiani A., Misseri G., Fasciana T., Giammanco A., Giarratano A., Chowdhary A. Epidemiology, clinical characteristics, resistance, and treatment of infections by Candida auris. J. Intensive Care, 2018, vol. 6: 69. doi: 10.1186/s40560-018-0342-4
  18. Gardes M., Bruns T.D. ITS primers with enhanced specificity for basidiomycetes – application to the identification of mycorrhizae and rusts. Molecular Ecology, 2008, vol. 2, no. 2, pp. 113–118. doi: 10.1111/j.1365-294x.1993.tb00005.x
  19. Gow N.A.R., Yadav B. Microbe Profile: Candida albicans: a shape-changing, opportunistic pathogenic fungus of humans. Microbiology, 2017, vol. 163, no. 8, pp. 1145–1147. doi: 10.1099/mic.0.000499
  20. Jindal N., Arora S., Dhuria N., Arora D. Cyberlindnera (Pichia) fabianii infection in a neutropenic child: importance of molecular identification. J. Med. Microbiol. Case Reports, 2015, vol. 2, no. 4, pp. 1–3. doi: 10.1099/jmmcr.0.000033
  21. Lukić-Grlić A., Mlinarić-Missoni E., Škarić I., Važić-Babić V., Svetec I.-K. Candida utilis candidaemia in neonatal patients. J. Med. Microbiol., 2011, vol. 60, no. 6, pp. 838–841. doi: 10.1099/jmm.0.023408-0
  22. Mayer F.L., Wilson D., Hube B. Candida albicans pathogenicity mechanisms. Virulence, 2013, vol. 4, no. 2, pp. 119–128. doi: 10.4161/viru.22913
  23. Ostrosky-Zeichner L., Al-Obaidi M. Invasive fungal infections in the intensive care unit. Infect. Dis. Clin. North Am., 2017, vol. 31, no. 3, pp. 475–487. doi: 10.1016/j.idc. 2017.05.005
  24. Sahal G., Bilkay I.S. Distribution of clinical isolates of Candida spp. and antifungal susceptibility of high biofilm-forming Candida isolates. Rev. Soc. Bras. Med. Trop., 2018, vol. 51, no. 5, pp. 644–650. doi: 10.1590/0037-8682-0136-2018
  25. Welsh R.M., Bentz M.L., Shams A., Houston H., Lyons A., Rose L.J., Livintseva A.P. Survival, persistence, and isolation of the emerging multidrug-resistant pathogenic yeast Candida auris on a plastic health care surface. J. Clin. Microbiol., 2017, vol. 55, no. 10, pp. 2996–3005. doi: 10.1128/JCM.00921-17
  26. Sherwood J., Gow N.A., Gooday G.W., Gregory D.W., Marshall D. Contact sensing in Candida albicans: a possible aid to epithelial penetration. J. Med. Vet. Mycol., 1992, vol. 30, no. 6, pp. 461–469. doi: 10.1080/02681219280000621
  27. Shih M.H., Sheu M.M., Chen H.Y., Lin S.R. Fungal keratitis caused by Candida utilis – case report. Kaohsiung J. Med. Sci., 1999, vol. 15, no. 3, pp. 171–174.
  28. Sreelekshmi T.S., Ninan M.M., Premanand A., Chacko A., Sahni R.D., Michael J.S. Candida utilis: a rare cause of septicemia in children. Access Microbiology, 2021, vol. 3, no. 10: 000281. doi: 10.1099/acmi.0.000281
  29. Treguier P., David M., Gargala G., Camus V., Stamatoullas A., Menard A.-L., Lenain P., Contentin N., Lemasle E., Lanic H., Tilly H., Jardin F., Lepretre S. Cyberlindnera jadinii (teleomorph Candida utilis) candidaemia in a patient with aplastic anaemia: a case report. JMM Case Rep., 2018, vol. 5, no. 8: e005160. doi: 10.1099/jmmcr.0.00516

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рисунок 1. Морфология клеток (А, ×2500) и колоний (Б) штаммов дрожжей Y-1370, Y-1395, Y-583 (типовой штамм Candida albicans)

Скачать (689KB)
Метаданные
3. Рисунок 2. Филогенетический анализ ITS-последовательности штамма Y-1370. Выравнивание последовательностей произведено алгоритмом ClustalW, филогенетическое дерево построено методом наибольшего правдоподобия, количество реплик 1000. Анализируемая последовательность отмечена черным квадратом

Скачать (450KB)
Метаданные
4. Рисунок 3. Филогенетический анализ ITS-последовательности для штамма Y-1395. Выравнивание последовательностей произведено алгоритмом ClustalW, филогенетическое дерево построено методом наибольшего правдоподобия, количество реплик 1000. Анализируемая последовательность отмечена черным кружком

Скачать (400KB)
Метаданные
5. Рисунок 4. Нуклеотидная последовательность ITS-фрагмента штамма дрожжей Y-1370

Скачать (547KB)
Метаданные
6. Рисунок 5. Нуклеотидная последовательность ITS-фрагмента штамма дрожжей Y-1395

Скачать (383KB)
Метаданные
7. Рисунок 6. Образование биопленки и гифальных проростков у дрожжеподобных клеток кандид при культивировании на кукурузном агаре; ×2500

Скачать (1MB)
Метаданные
8. Рисунок 7. Определение чувствительности штаммов исследуемых грибов к антисептикам

Скачать (353KB)
Метаданные

© Андреева И.С., Морозова В.В., Кабанов А.С., 2024

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».