Development and validation of HPLC-MS/MS method for molsidomine quantitation in various tissues of rats

Cover Page

Cite item

Full Text

Open Access Open Access
Restricted Access Access granted
Restricted Access Subscription Access

Abstract

Relevance. Molsidomine is a vasoactive drug from the group of sydnonymines widely used in clinical practice. The use of molsidomine as a comparison drug during pharmacokinetic studies of new pharmacological agents of the sidnonymine group requires the development and implementation of accurate and reproducible methods for the quantitative determination of this drug in the organs and tissues of experimental animals.

Purpose of the study. Development and validation of a method for quantitative determination of molsidomine in various rat tissues using HPLC-MS/MS.

Materials and methods. Quantitative determination of molsidomine in blood plasma and homogenates of rat tissues was carried out by high-performance liquid chromatography with mass spectrometric detection. Method of precipitation of proteins with methanol was applied as a sample preparation of biological material. An Agilent Infinity LabPoroshell 120 EC-C18 4.6x100 mm 2.7 Micron column was used for chromatographic separation using an aqueous solution of methanol.

Results. The developed bioanalytical method was validated according to the following parameters: selectivity, matrix effect, sample transfer, linearity of the analytical range, lower limit of quantitative determination (NPCO), intra- and inter-series accuracy and precision, dilution factor, stability of the studied substances at the stages of analysis.

Conclusion. A method of quantitative determination of molsidomine in blood plasma and homogenates of rat tissues has been developed and validated. The analytical range for blood plasma, liver, kidney, brain and spleen homogenates was 5.0–1000.0 ng/ml; for skeletal muscle and heart tissue homogenates was 1.0-1000.0 ng/ml; for adipose tissue homogenate was 10.0–1000.0 ng/ml. This study allows us to use the developed methodology for conducting the analytical part of pharmacokinetic studies of molsidomine.

About the authors

N. S. Popov

Tver State Medical University

Author for correspondence.
Email: ns.popov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-1792-7414

Ph.D. (Pharm.), Head of Research Laboratory, Associate Professor, Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology

Russian Federation, Tver

V. Yu. Balabanyan

M.V. Lomonosov Moscow State University

Email: ns.popov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5744-7060

Dr.Sc. (Pharm.), Associate Professor, Leading Research Scientist, Laboratory of Translational Medicine

Russian Federation, Moscow

N. S. Baranov

Shemyakin-Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry of the Russian Academy of Sciences

Email: ns.popov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-9339-7603

Ph.D. (Chem.)

Russian Federation, Moscow

References

  1. Horton A., Schiefer I.T. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of nitric oxide mimetic agents. Nitric Oxide. 2019; 84: 69–78. DOI: org/10.1016/j.niox.2019.01.001.
  2. Paes de Barros M., Casares Araujo-Chaves J., Marlise Mendes Brito A., Lourenço Nantes-Cardoso I. Oxidative/nitrative me-chanism of molsidomine mitotoxicity assayed by the cytochro-me c reaction with SIN-1 in models of biological membranes. Chemical Research in Toxicology. 2020; 33(11): 2775–2784. DOI: org/10.1021/acs.chemrestox.0c00122.
  3. Chistik T.V. Donatory oksida azota v terapii pacientov s ishemicheskoj bolezn'ju serdca: fokus na molsidomin. Arterial'naja gipertenzija. 2018; 2 (58). DOI:org/10.22141/2224-1485.2.58.2018.131062.
  4. Kosarev V.V., Babanov S.A. Sovremennye podhody k antianginal'noj terapii pri ishemicheskoj bolezni serdca: v fokuse sidnoniminy. Russkij medicinskij zhurnal. 2011; 14: 895–901.
  5. Hernández-Melesio M.A., Alcaraz-Zubeldia M., Jiménez-Capdeville M.E., Martínez-Lazcano J.C., Santoyo-Pérez M.E., Quevedo-Corona L., Pérez-Severiano F. Nitric oxide donor molsidomine promotes retrieval of object recognition memory in a model of cognitive deficit induced by 192 IgG-saporin. Behavioural brain research. 2019; 366: 108–117. DOI: org/10.1016/j.bbr.2019.03.031.
  6. Nikonov V.V., Kinoshenko E.I., Kursov S.V. Nitraty v klinicheskoj praktike. Medicina neotlozhnyh sostojanij. 2020; 16(4). DOI: org/10.22141/2224-0586.16.4.2020.207928.
  7. Messin R., Opolski G., Fenyvesi T., Carreer-Bruhwyler F., Dubois C., Famaey J. P., Géczy J. Efficacy and safety of molsidomine once-a-day in patients with stable an-gina pectoris. International journal of cardiology. 2005; 98(1): 79–89. DOI: org/10.1016/j.ijcard.2004.01.007.
  8. Mironov A.N. Rukovodstvo po jekspertize lekarstvennyh sredstv. T. II. M.: Grif i K. 2013: 280.
  9. Food and Drug Administration. Available at: https://www. fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/ bioanalytical-method-validation-guidance-industry.
  10. European Medicines Agency. Available at: https://www.ema. europa.eu/en/bioanalytical-method-validation.
  11. Slatter J.G., Stalker D.J., Feenstra K.L., Welshman I.R., Bruss J.B., Sams J.P., Shobe E.M. Pharmacokinetics, metabolism, and excretion of linezolid following an oral dose of [14C] linezolid to healthy human subjects. Drug Metabolism and Disposition. 2001; 29(8): 1136–1145.
  12. Dutot C., Moreau J., Cordonnier P., Spreux-Varoquaux O., Klein C., Ostrowski J., Pays M. Determination of the active metabolite of molsidomine in human plasma by reversed-phase high-performance liquid chromatography. Journal of Chroma-tography B: Biomedical Sciences and Applications. 1990; 528: 435–446. DOI: org/10.1016/S0378-4347(00)82401-9.
  13. Richter L. H., Jacobs C. M., Mahfoud F., Kindermann I., Böhm M., Meyer M. R. Development and application of a LC-HRMS/MS method for analyzing antihypertensive drugs in oral fluid for monitoring drug adherence. Analytica chimica acta. 2019; 1070: 69–79. DOI: org/10.1016/j.aca.2019.04.026.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download
2. Figure 1. Structural formulas of molsidomine (A) and linezolid (B)

Download (2KB)
Indexing metadata
3. Drawing. Fig. 2. Mass spectra of precursor ions and product ions of molsidomine and linezolid in the positive ion detection mode

Download (58KB)
Indexing metadata
4. Figure 3. Chromatogram of a model sample of intact rat plasma with a concentration of 500 ng/ml molsidomine

Download (26KB)
Indexing metadata
5. Figure 4. Chromatogram of intact rat blood plasma sample

Download (34KB)
Indexing metadata
6. Figure 5. Plot of the ratio of molsidomine peak area to linezolid peak area versus molsidomine concentration in rat blood plasma

Download (12KB)
Indexing metadata
7. Figure 6. Chromatogram of a blood plasma sample from rats with a concentration of molsidomine at the LLQL level

Download (30KB)
Indexing metadata

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».