Разработка и валидация методики количественного определения молсидомина в различных тканях крыс с помощью ВЭЖХ-МС/МС

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Актуальность. Молсидомин – широко используемый в клинической практике вазоактивный лекарственный препарат из группы сиднониминов. Использование молсидомина в качестве препарата сравнения при проведении фармакокинетических исследований новых фармакологических средств группы сиднониминов требует разработки и внедрения точных и воспроизводимых методик количественного определения данного лекарственного средства в органах и тканях подопытных животных.

Цель исследования – разработка и валидация методики количественного определения молсидомина в различных тканях крыс с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС).

Материал и методы. Количественное определение молсидомина в плазме крови и гомогенатах тканей крыс проводили методом ВЭЖХ-МС/МС. В основе пробоподготовки биологического материала использовали метод осаждения белков метанолом. Хроматографическое разделение осуществляли водным раствором метанола на колонке Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 4.6x100 mm 2.7 Micron.

Результаты. Разработанная биоаналитическая методика валидирована по следующим показателям: селективность, матричный эффект, перенос пробы, линейность аналитического диапазона, нижний предел количественного определения, внутри- и межсерийная точность и прецизионность, фактор разбавления, стабильность определяемых веществ на этапах анализа.

Выводы. Разработана и валидирована методика количественного определения молсидомина в плазме крови и гомогенатах тканей крыс. Аналитический диапазон составил 5,0–1000,0 нг/мл для плазмы крови, гомогенатов печени, почек, головного мозга и селезенки; 1,0–1000,0 нг/мл для гомогенатов скелетных мышц и тканей сердца; 10,0–1000,0 нг/мл для гомогената жировой ткани, что позволяет использовать разработанную методику для проведения фармакокинетических исследований молсидомина.

Об авторах

Н. С. Попов

ФГБОУ ВО Тверской ГМУ Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: ns.popov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-1792-7414

к.фарм.н., зав. научно-исследовательской лабораторией, доцент кафедры фармакологии и клинической фармакологии

Россия, Тверь

В. Ю. Балабаньян

Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова

Email: ns.popov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5744-7060

д.фарм.н., доцент, вед. науч. сотрудник, лаборатория трансляционной медицины, факультет фундаментальной медицины

Россия, Москва

М. С. Баранов

Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН

Email: ns.popov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-9339-7603

к.х.н., ст. науч. сотрудник, группа химии гетероциклических соединений

Россия, Москва

Список литературы

  1. Horton A., Schiefer I.T. Pharmacokinetics and pharmacodynam-ics of nitric oxide mimetic agents. Nitric Oxide. 2019; 84: 69–78. DOI: org/10.1016/j.niox.2019.01.001.
  2. Paes de Barros M., Casares Araujo-Chaves J., Marlise Mendes Brito A., Lourenço Nantes-Cardoso I. Oxidative/nitrative me-chanism of molsidomine mitotoxicity assayed by the cytochro-me c reaction with SIN-1 in models of biological membranes. Chemical Research in Toxicology. 2020; 33(11): 2775–2784. DOI: org/10.1021/acs.chemrestox.0c00122.
  3. Чистик Т.В. Донаторы оксида азота в терапии пациентов с ишемической болезнью сердца: фокус на молсидомин. Артериальная гипертензия. 2018; 2 (58). DOI: org/10.22141/2224-1485.2.58.2018.131062.
  4. Косарев В.В., Бабанов С.А. Современные подходы к антиангинальной терапии при ишемической болезни сердца: в фокусе сиднонимины. Русский медицинский журнал. 2011; 14: 895–901.
  5. Hernández-Melesio M.A., Alcaraz-Zubeldia M., Jiménez-Capdeville M.E., Martínez-Lazcano J.C., Santoyo-Pérez M.E., Quevedo-Corona L., Pérez-Severiano F. Nitric oxide donor molsidomine promotes retrieval of object recognition memory in a model of cognitive deficit induced by 192 IgG-saporin. Be-havioural brain research. 2019; 366: 108–117. DOI: org/10.1016/j.bbr.2019.03.031.
  6. Никонов В.В., Киношенко Е.И., Курсов С.В. Нитраты в клинической практике. Медицина неотложных состояний. 2020; 16(4). DOI.org/10.22141/2224-0586.16.4.2020.207928.
  7. Messin R., Opolski G., Fenyvesi T., Carreer-Bruhwyler F., Du-bois C., Famaey J. P., Géczy J. Efficacy and safety of molsidomine once-a-day in patients with stable angina pectoris. International journal of cardiology. 2005; 98(1): 79–89. DOI: org/10.1016/j.ijcard.2004.01.007.
  8. Миронов А.Н. Руководство по экспертизе лекарственных средств. Т. II. М.: Гриф и К. 2013: 280.
  9. Food and Drug Administration. Available at: https://www. fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/ bioanalytical-method-validation-guidance-industry.
  10. European Medicines Agency. Available at: https://www.ema. europa.eu/en/bioanalytical-method-validation.
  11. Slatter J.G., Stalker D.J., Feenstra K.L., Welshman I.R., Bruss J.B., Sams J.P., Shobe E.M. Pharmacokinetics, metabolism, and excretion of linezolid following an oral dose of [14C] linezolid to healthy human subjects. Drug Metabolism and Disposition. 2001; 29(8): 1136–1145.
  12. Dutot C., Moreau J., Cordonnier P., Spreux-Varoquaux O., Klein C., Ostrowski J., Pays M. Determination of the active me-tabolite of molsidomine in human plasma by reversed-phase high-performance liquid chromatography. Journal of Chroma-tography B: Biomedical Sciences and Applications. 1990; 528: 435–446. DOI: org/10.1016/S0378-4347(00)82401-9.
  13. Richter L. H., Jacobs C. M., Mahfoud F., Kindermann I., Böhm M., Meyer M. R. Development and application of a LC-HRMS/MS method for analyzing antihypertensive drugs in oral fluid for monitoring drug adherence. Analytica chimica acta. 2019; 1070: 69–79. DOI:org/10.1016/j.aca.2019.04.026.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Структурные формулы молсидомина (A) и линезолида (B)

Скачать (2KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Масс-спектры ионов-предшественников и ионов-продуктов молсидомина и линезолида в режиме регистрации положительных ионов

Скачать (58KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Хроматограмма модельного образца интактной плазмы крыс с концентрацией молсидомина 500 нг/мл

Скачать (26KB)
Метаданные
5. Рис. 4. Хроматограмма образца интактной плазмы крови крыс

Скачать (34KB)
Метаданные
6. Рис. 5. График зависимости отношения площади пика молсидомина к площади пика линезолида от концентрации молсидомина в плазме крови крыс

Скачать (12KB)
Метаданные
7. Рис. 6. Хроматограмма образца плазмы крови крыс с концентрацией молсидомина на уровне НПКО

Скачать (30KB)
Метаданные

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».