Разработка и валидация методики определения спектральных характеристик 5-метил-N-фенил-7-(4-фторфенил)-4,7-дигидротетразоло[1,5-a]пиримидин-6-карбоксамида

Введение. Нормативная документация является важным инструментом для обеспечения безопасности и эффективности новых лекарственных средств. Фармацевтические статьи должны содержать валидированные методики определения показателей подлинности (идентификации). Процедура валидирования позволяет в процессе разработки новых методик своевременно выявить их недостатки и на ранних стадиях улучшить её.

Цель исследования – разработка и валидирование методики определения нового биологически активного соединения 5-метил-N-фенил-7-(4-фторфенил)-4,7-дигидротетразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбоксамида методом спектрофотометрии в УФ-области.

Материал и методы. В эксперименте использованы образцы и растворители: субстанция 5-метил-N-фенил-7-(4-фторфенил)-4,7-дигидротетразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбоксамид (бесцветный кристаллический порошок); растворитель ДМФА. Анализ проводили с помощью спектрофотометра UV-1800 (Shimadzu, Япония).

Результаты. Для оценки специфичности получали спектр поглощения субстанции в выбранном диапазоне в УФ-области. В спектре наблюдается максимум поглощения при 285 нм. Определен удельный показатель поглощения, равный 270. Линейность методики устанавливали на основании исследования зависимости оптической плотности от содержания на пяти уровнях концентрации от 80 до 120%. Критерий приемлемости – коэффициент корреляции, равен 0,9954. Валидируемая методика признается правильной, если значения, принимаемые за истинные, лежат внутри доверительных интервалов соответствующих средних результатов анализов. Определение проводили на трех уровнях концентрации (80, 100, 120%) путём определения содержания анализируемого соединения в модельных растворах. Критерий приемлемости – средний процент открываемости, его средняя величина находится в пределах от 97,5 до 102,0%. Повторяемость аналитической методики оценивали по шести независимым результатам, полученным в одинаковых регламентированных условиях в одной лаборатории. Вычисленное значение коэффициента вариации составляет 1,5%, относительная ошибка определения равна 0,54% при доверительной вероятности p=95%, что свидетельствует о прецизионности методики в условиях повторяемости.

Выводы. Установлена величина удельного показателя поглощения нового биологически активного соединения, которая может быть использована при установлении подлинности (идентификации) и определении количественного содержания в процессе разработки фармакопейной статьи. Осуществлена валидационная оценка разработанной методики.