Разработка и валидация методик спектрофотометрического определения проспидия хлорида по показателям «подлинность» и «количественное определение»

Введение. Актуальность представленного исследования обусловлена необходимостью внедрения в практику контроля качества проспидия хлорида метода анализа, который характеризуется высокой чувствительностью, точностью, экспрессностью и доступностью.

Цель исследования – разработка и валидация методики УФ-спектрофотометрического анализа проспидия хлорида – противоопухолевого лекарственного средства группы диспиропиперазина.

Материал и методы. Объектом исследования выступила лекарственная субстанция – порошок Проспидин (проспидия хлорид, серия 271222, срок годности до 12.2027 г., производства «УНИТЕХПРОМ БГУ»). Растворы с рабочим диапазоном концентрации от 0,05 до 0,2 моль/л для спектрофотометрического анализа приготовлены с использованием воды очищенной. Спектры поглощения c определением аналитической длины волны (λ_max, нм) и величины коэффициента молярной экстинкции (ε, л·моль^-1·см^-1) в интервале от 200 до 400 нм получены и проанализированы на оборудовании Agilent Cary 60. Валидационные параметры определены в соответствие с регламентом ОФС.1.1.0012 «Валидация аналитических методик».

Результаты. Выполнена валидационная оценка разработанных аналитических методик для определения подлинности и содержания действующего вещества методом УФ-спектрофотометрии, которая включала в себя испытания на специфичность (в присутствии NaCl 0,9% раствора), аналитическую область 0,05–0,2 моль/л, линейность (r=0,9997), правильность, прецизионность
в вариантах повторяемости 3,89±0,24 (±SD) и внутрилабораторной воспроизводимости (ε=2,1%), а также устойчивость.

Выводы. Анализ электронных спектров водных растворов проспидия хлорида продемонстрировал наличие R-полосы поглощения с характерной длиной волны в дальней УФ-области при λ_max=282±0,4 нм, а также λ_min=255±0,4 нм. Установлено, что поглощение при λ_max в диапазоне концентраций от 0,05 до 0,2 моль/л раствора проспидия хлорида, содержащего гетероатомы азота с неподеленными электронными парами, обусловлено реализацией так называемого формально запрещенного n→σ* электронного перехода с участием молекулярных орбиталей. Характерный вид электронного спектра с λ_max и λ_min, соответствие закону Бугера–Ламберта–Бера в заданном интервале концентраций, рассчитанное значение молярного коэффициента экстинкции ε (л·моль^-1·см^-1) позволяют использовать описанные выше спектральные характеристики для определения подлинности и содержания действующего вещества в контроле качества проспидия хлорида.