Иммунный ответ на ДНК- и мРНК-вакцины, кодирующие искусственные иммуногены вируса гриппа

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Постоянный антигенный дрейф циркулирующих вирусов гриппа приводит к тому, что сезонные вакцины против гриппа становятся неэффективными и возникает необходимость ежегодного перевыпуска таких вакцин. В связи с этим разработка универсальной гриппозной вакцины приобретает особую актуальность. Перспективным направлением исследований в данной области является создание иммуногенов, состоящих из консервативных фрагментов белков различных штаммов вируса гриппа.

Целью данной работы была оценка иммуногенности ДНК-вакцин и мРНК-вакцин, кодирующих искусственные антигены, состоящие из консервативных фрагментов ствола гемагглютинина и консервативного белка М2. Ранее нами были получены ДНК-вакцинные конструкции, кодирующие искусственные иммуногены AgH1, AgH3 и AgM2, которые содержат консервативные фрагменты стебля гемагглютинина двух подтипов гриппа A – H1N1 и H3N2 и консервативный белок M2. Эти ДНК-вакцины послужили матрицей для синтеза мРНК-вакцин.

Для оценки иммуногенности полученных ДНК- и мРНК-вакцин проводили иммунизацию мышей линии BALB/c путем внутримышечного введения соответствующих препаратов. Оценку гуморального иммунного ответа проводили с помощью ИФА, с использованием в качестве антигенов вирусы гриппа A/Aichi/2/68(H3N2), A/California/07/2009 и вакцину УЛЬТРИКС, содержащую очищенные белки вируса гриппа H1N1 и H3N2. Оценку Т-клеточного иммунного ответа проводили с использованием двух методов: метод внутриклеточного окрашивания цитокинов (ICS) и ELISpot. ICS проводили по определению CD8+ и CD4+Т-лимфоцитов, продуцирующих IFNγ. ELISpot проводили с использованием набора mouse IFNγ ELISpot BD. Для стимуляции клеток использовали смесь пептидов, входящих в состав целевых антигенов. Полученные результаты показали, что спроектированные ДНК-вакцинные конструкции вызывали у иммунизированных животных вирус-специфический гуморальный и клеточный ответы. Внутримышечное введение животным голых мРНК-вакцинных конструкций индуцировало слабый гуморальный иммунный ответ, что свидетельствует о необходимости проведения дальнейших работ по улучшению способов доставки.

Об авторах

Е. В. Старостина

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора

Автор, ответственный за переписку.
Email: starostina_ev@vector.nsc.ru

к.б.н., научный сотрудник отдела биоинженерии

Россия, Кольцово, Новосибирская обл.

С. В. Шарабрин

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора

Email: starostina_ev@vector.nsc.ru

младший научный сотрудник отдела биоинженерии

Россия, Кольцово, Новосибирская обл.

А. П. Рудометов

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора

Email: starostina_ev@vector.nsc.ru

к.б.н., старший научный сотрудник отдела биоинженерии

Россия, Кольцово, Новосибирская обл.

В. Р. Литвинова

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора

Email: starostina_ev@vector.nsc.ru

стажер-исследователь, отдел биоинженерии

Россия, Кольцово, Новосибирская обл.

М. Б. Боргоякова

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора

Email: starostina_ev@vector.nsc.ru

младший научный сотрудник отдела биоинженерии

Россия, Кольцово, Новосибирская обл.

С. И. Бажан

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора

Email: starostina_ev@vector.nsc.ru

д.б.н., заведующий теоретическим отделом, отдел биоинженерии

Россия, Кольцово, Новосибирская обл.

А. А. Ильичев

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора

Email: starostina_ev@vector.nsc.ru

д.б.н., профессор, заведующий отделом биоинженерии

Россия, Кольцово, Новосибирская обл.

Л. И. Карпенко

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора

Email: starostina_ev@vector.nsc.ru

д.б.н., доцент, ведущий научный сотрудник отдела биоинженерии

Россия, Кольцово, Новосибирская обл.

Список литературы

  1. Bazhan S.I., Antonets D.V., Starostina E.V., Ilyicheva T.N., Kaplina O.N., Marchenko V.Y., Durymanov A.G., Oreshkova S.F., Karpenko L.I. Immunogenicity and protective efficacy of influenza a DNA vaccines encoding artificial antigens based on conservative hemagglutinin stem region and M2 protein in mice. Vaccines (Basel), 2020, Vol. 9, no. 8 (3), pp. 448-465.
  2. Bazhan S.I., Antonets D.V., Starostina E.V., Ilyicheva T.N., Kaplina O.N., Marchenko V.Y., Volkova O.Y., Bakulina A.Y., Karpenko L.I. In silico design of influenza a virus artificial epitope-based T-cell antigens and the evaluation of their immunogenicity in mice. J. Biomol. Struct. Dyn., 2022, Vol. 40, no. 7, pp. 3196-3212.
  3. Ilyichev A.A., Orlova L.A., Sharabrin S.V., Karpenko L.I. mRNA technology as one of the promising platforms for the SARS-CoV-2 vaccine development. Vavilov Journal of Genetics and Breeding, 2020, Vol. 24, no. 7, pp. 802-807.
  4. Karpenko L.I., Rudometov A.P., Sharabrin S.V., Shcherbakov D.N., Borgoyakova M.B., Bazhan S.I., Volosnikova E.A., Rudometova N.B., Orlova L.A., Pyshnaya I.A., Zaitsev B.N., Volkova N.V., Azaev, M.S., Zaykovskaya A.V., Pyankov O.V., Ilyichev A.A. Delivery of mRNA vaccine against SARS-CoV-2 using a polyglucin:spermidine conjugate. Vaccines, 2021, Vol. 9, no. 2, 76. doi: 10.3390/vaccines9020076.
  5. Kumar A., Meldgaard T.S., Bertholet S. Novel platforms for the development of a universal influenza vaccine. Front. Immunol., 2018, Vol. 9, 600. doi: 10.3389/fimmu.2018.00600.
  6. Liu M.A. A comparison of plasmid DNA and mRNA as vaccine technologies. Vaccines, 2019, Vol. 7, no. 2, 37. doi: 10.3390/vaccines702 0037.
  7. Tsilibary E.P., Charonis S.A., Georgopoulos A.P. Vaccines for Influenza. Vaccines (Basel), 2021, Vol. 9, no. 1, 47. doi: 10.3390/vaccines9010047.
  8. Wang W.L., Li R.Q., Deng Y., Lu N., Chen H., Meng X., Wang W., Wang X.P., Yan K.X., Qi X.R., Zhang X., Xin W., Lu Z., Li X., Bian T., Gao Y., Tan W., Ruan L. Protective efficacy of the conserved NP, PB1, and M1 proteins as immunogens in DNA- and vaccinia virus-based universal influenza A virus vaccines in mice. Clin. Vaccine Immunol., 2015, Vol. 22, pp. 618-630.
  9. Wei C.J., Crank M.C., Shiver J., Graham B.S., Mascola J.R., Nabel G.J. Next-generation influenza vaccines: opportunities and challenges. Nat. Rev. Drug. Discov., 2020, Vol. 19, pp. 239-252.
  10. Wei C.J., Crank M.C., Shiver J. Next-generation influenza vaccines: opportunities and challenges. Nat. Rev. Drug. Discov., 2020, Vol. 19, no. 4, pp. 239-252.
  11. Zhang C., Maruggi G., Shan H., Li J. Advances in mRNA vaccines for infectious diseases. Front. Immunol., 2019, Vol. 10, 594. doi: 10.3389/fimmu.2019.00594.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рисунок 1. Оценка клеточного ответа у мышей, иммунизированных ДНК-вакцинными конструкциями, кодирующими антигены AgН1, AgН3 и М2

Скачать (296KB)

© Старостина Е.В., Шарабрин С.В., Рудометов А.П., Литвинова В.Р., Боргоякова М.Б., Бажан С.И., Ильичев А.А., Карпенко Л.И., 2022

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».