The Role of Phospholipase C in Modulating the Electrical Activity of Atrial Cardiomyocytes in Growing Rats upon Stimulation of α1-Adrenergic Receptors

Capa

Citar

Texto integral

Resumo

Most existing research focuses on the mechanisms regulating membrane electrogenesis through β-adrenergic receptors, while the electrophysiological effects of α1-adrenergic receptors (α1-ARs) remain poorly understood. The involvement of phospholipase C (PLC) in these effects is unclear, and the study of the non-selective agonist of α1-AR subtypes, methoxamine, in the presence of the PLC inhibitor (U-73122) may clarify the importance of PLC in modulating the electrical activity of cardiomyocytes in rats of different ages. The study was conducted on 7-, 21-, and 100-day-old white rats using microelectrode techniques. Urethane was used for anesthesia, after which the heart was isolated, and a preparation of atrial myocardium with a preserved sinoatrial node and spontaneous activity was prepared. The electrical activity of cardiomyocytes was then recorded. To assess the effects, the α1-AR agonist methoxamine and the phospholipase C inhibitor U-73122 were applied. Stimulation of α1-ARs with methoxamine in working cardiomyocytes of the right atrium of rats of different ages led to an increase in the frequency of action potential generation. Methoxamine at a concentration of 10–8 M increased the action potential duration in 7-day-old rats, whereas it decreased in 21- and 100-day-old rats. U-73122 completely blocked the effect of methoxamine in all age groups, indicating the important role of phospholipase C in these processes. The results demonstrate that age influences the response of cardiomyocytes to α1-AR stimulation, and phospholipase C is a key element in the mechanisms underlying these effects.

Texto integral

ВВЕДЕНИЕ

Адренергические рецепторы впервые были представлены Ahlquist в 1948 г. [1] как различные типы рецепторов, которые активируются одними и теми же катехоламинами, но проявляют противоположные фенотипы в организме. Он определил их как подтипы α и β. Антагонисты α-рецепторов празозин и йохимбин были использованы для дальнейшей подклассификации этих рецепторов как α-1 и α-2 [2]. α1-Адренорецепторы (α1-AP) опосредуют многие важные функции во многих системах органов, включая сердечно-сосудистую, мочеполовую и центральную нервную систему. В сердечно-сосудистой системе все три подтипа α1-AP были обнаружены в кровеносных сосудах, и их активация в различной степени способствует вазоконстрикции [3]. Физиологическая активность сосудистых α1-АР имеет первостепенное значение для системной сердечно-сосудистой регуляции [4].

α1-АР представляют собой семь GPCR трансмембранного домена, участвующих в многочисленных физиологических функциях, контролируемых эндогенными катехоламинами, норадреналином и адреналином, на которые нацелены лекарственные средства, полезные в терапии. Три отдельных гена, продукты которых названы a1A‐AP, a1B‐AP и a1D‐AP, кодируют эти рецепторы. Несмотря на то, что существование множества α1-AP признано уже 30 лет, их специфические функции все еще в значительной степени неизвестны [5].

При активации агонистами, такими как норадреналин, α1-AP активируют несколько внутриклеточных сигнальных путей, опосредованных G-белками. Активация фосфолипазы C (PLC) гидролизует фосфатидилинозитол 4,5-бисфосфат (PIP2) для получения инозитол 1,4,5-трисфосфата (IP3) и диацилглицерола (DAG), который является путем PLC-IP3 [6]. В сердце присутствует несколько изоформ PLC из семейств β, γ, δ и ε. Активация PLC происходит через гептаспиральные рецепторы, связанные с G-белком (PLCβ), рецепторные тирозинкиназы (PLCγ), PIP2 и Ca2+ (PLCδ) или Ras (PLCε). Наибольший интерес для нас представляет PLCβ, так как его активация происходит через рецепторы, связанные с G-белками [7].

Активация PLC приводит к образованию двух продуктов – IP3 и DAG, которые играют важную роль в качестве вторичных мессенджеров в клетке. IP3, будучи гидрофильным соединением, перемещается из сарколеммы в цитоплазму.

Активированный IP3-рецептор на клеточном уровне способствует преобразованию электромеханического сопряжения посредством сенситизации рианодиновых рецепторов. В экспериментах на предсердных и желудочковых кардиомиоцитах было установлено, что активация IP3-R способствует положительному инотропному эффекту. Это происходит за счет локального высвобождения Ca2+ через IP3 в непосредственной близости от рианодиновых рецепторов, способствуя кальций-зависимому высвобождению кальция. Активация IP3-рецепторов может также иметь значение в развитии Ca2+ опосредованной аритмии [8, 9]. Повышенные уровни IP3-R наблюдались не только у лабораторных крыс, но и у людей с аналогичными заболеваниями сердца [10]. Активация IP3-R, расположенного непосредственно на ядерной мембране, может вызывать локальное увеличение ядерной концентрации Ca2+ [11], а также изменение активности различных факторов транскрипции и регуляции метаболических путей [12].

Основная функция DAG, образующегося при гидролизе PIP2, – активация протеинкиназы С (PKC). В кардиомиоцитах новорожденных крыс обнаружено 6 изоформ PKC [13]. У взрослых крыс в миокарде остаются только 3 изоформы, а остальные изоформы PKC исчезают с возрастом [14]. Различные изоформы PKC имеют множество мишеней в миокарде. PKC также считается важным регулятором работы каналов тока IKs. IKs снижается в миоцитах мышей и крыс в ответ на активацию PKC. Другие калиевые токи, присутствующие в кардиомиоцитах, также находятся под влиянием PKC. Действие обменника Na/Ca усиливается при его фосфорилировании протеинкиназами. Кроме того, PKC действует на киназы β-адренергических рецепторов, мускариновые рецепторы, транскрипционные факторы и гены, а также на многие другие мишени [15, 16].

U-73122 представляет собой высокоселективный ингибитор PLC, обладающий хорошей проницаемостью через клеточную мембрану благодаря своим липофильным свойствам. U-73122 ингибировал гидролиз PI и синтез IP3 в разрушенных клеточных системах и уменьшал вызванное агонистами повышение уровня цитоплазматической концентрации Ca2+ ([Ca2+]цито) в интактных клетках, таких как нейтрофилы, клетки нейробластомы, ацинарные клетки и тромбоциты. Таким образом, U-73122 получил общее признание как специфический ингибитор фосфоинозитид-специфической фосфолипазы С (PI-PLC), а ингибирование повышения [Ca2+]цито в интактных клетках с помощью U-73122 было интерпретировано как свидетельство вклада PI-PLC в ответ, включая гладкие мышцы [17].

Недавние исследования на крысах показали, что стимуляция α1-АР неселективным агонистом подтипов α1-АР метоксамином снижает скорость сокращения изолированного сердца взрослой крысы. Выраженность эффекта зависит от концентрации агониста. Внутривенное введение метоксамина также приводит к сердечной брадикардии во всем организме [18]. У новорожденных крыс стимуляция α1-АР, независимо от концентрации метоксамина, приводила к отрицательной инотропной реакции миокарда предсердий и желудочков [19]. Активация α1-АР метоксамином также влияет на параметры электрической активности рабочих кардиомиоцитов крыс с сохраненными синусовыми узлами. У 7-дневных крыс агонист α1-АР метоксамин увеличивал длительность фазы реполяризации потенциала действия как в навязанном, так и в собственном ритме [20]. Однако метоксамин оказывал двоякое влияние на длительность реполяризации рабочих кардиомиоцитов у 20-недельных крыс. При навязанном ритме метоксамин увеличивал длительность фазы реполяризации потенциала действия, при собственном ритме – уменьшал. [21]. В отличие от взрослой крысы, адренергическая регуляция в сердце новорожденной крысы имеет незрелую симпатическую иннервацию. 21-дневный возраст характеризуется началом формирования адренергической иннервации сердца крыс и самой большой частотой сердечных сокращений. В связи с вышесказанным, особый интерес представляют исследования на животных разного возраста [22].

Целью нашего исследования было выявить участие PLC в реализации эффектов, вызванных избирательной стимуляцией α1-АР на электрическую активность кардиомиоцитов у крыс разного возраста.

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проводилось на 7-дневных (новорожденных) (n = 20), 21-дневных (n = 20) и 100-дневных (взрослых) (n = 17) белых крысах с использованием микроэлектродной техники. Эти возрастные группы были выбраны в соответствии с уровнем развития вегетативной регуляции сердца. Крысы содержались в клетках со свободным доступом к воде и пище. Для анестезии внутрибрюшинно вводили 25%-ный раствор уретана из расчета 1.2 г/кг массы тела животного. После инъекции уретана вскрывали грудную клетку, затем вырезали сердце и переносили его в чашку Петри. Был приготовлен препарат миокарда предсердий с сохраненным синусовым узлом и спонтанной активностью. Во время эксперимента препарат правого предсердия погружали в специальный резервуар, куда подавался термостатированный рабочий раствор Тироде (состав в ммоль/л: NaCl 133.47, KCl 4.69, NaH2PO4∙2H2O 1.35, NaHCO3 16.31, MgSO4∙7H2O 1.18, CaCl2∙2H2O 2.5, глюкоза 7.77), и насыщали газовой смесью, состоящей из 95% кислорода и 5% углекислого газа (37 ± 1 ºС). pH поддерживался на уровне 7.3–7.4. Внутриклеточный потенциал действия регистрировали с помощью усилителя (A-M Systems) стеклянными микроэлектродами с сопротивлением 25–60 MΩ и диаметром кончика < 1 мкм (BF120-60-10 “Sutter Instruments”), которые изготавливались в день эксперимента на горизонтальном пуллере Р-1000 (“Sutter Instruments”). После 35–40 мин ожидания адаптации препарата регистрировали контрольные сигналы, затем в рабочем растворе растворяли агонист α1-АР метоксамин в концентрации 10–8 М и применяли для регистрации [18]. Для оценки участия фосфоинозитольного каскада в реализации эффектов, вызванных избирательной стимуляцией α1-АР, были проведены эксперименты с применением ингибиторов PLС: U-73122 (10-5 М) [17]. Для изучения стимуляции α1-АР метоксамином на фоне блокады U-73122 на параметры электрической активности миокарда у крыс разного возраста мы регистрировали контрольные сигналы, затем в рабочем растворе растворяли блокатор PLС-U-73122 (Токрис) в концентрации 10–5 М, через 20 мин добавляли агонист α1-АР метоксамин (10–8 М) и проводили регистрацию. Используемые концентрации были основаны на предыдущих экспериментах. Сигналы регистрировали с помощью программы Elph 3.0. Регистрация мембранного потенциала, потенциала действия, длительности деполяризации, амплитуды потенциала действия и длительности потенциала действия (ДПД) определялась на уровне 20% (ДПД 20%), 50% (ДПД 50%) и 90% (ДПД 90%) фазы реполяризации. Нормальность распределения проверяли с использованием теста Шапиро–Уилка, статистическую значимость оценивали с помощью One Way ANOVA для сравнения двух групп. Когда нормальность распределения отсутствовала, тестировали все процедуры попарного множественного сравнения с использованием метода Холма–Сидака. Различия считали статистически значимыми при р < 0.05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Влияние стимуляции α1-АР метоксамином и метоксамином на фоне блокады U-73122 на параметры электрической активности рабочих кардиомиоцитов у 7-дневных крысят с сохраненными синусовыми узлами и спонтанной активностью

Метоксамин в концентрации 10–8 М у новорожденных крысят (n = 10, рис. 1, 2) увеличивал длительность потенциала действия при ДПД 20%, ДПД 50% и ДПД 90% с 6.9 ± 0.2 до 9.8 ± 0.4 мс, с 21.5 ± 0.7 до 30.12 ± 0.7 мс, с 67.4 ± 2.4 до 85.67 ± 1.4 мс, что составляет 43.5% (p < 0.01), 40% (p < 0.01) и 27% (p < 0.01) соответственно, тогда как длительность фазы деполяризации не изменялась (с 2 ± 0.06 до 1.9 ± 0.03 мс). Значения амплитуды потенциала действия (с 108.3 ± 2.2 до 110 ± 3.1 мВ) и мембранного потенциала (с –83.1 ± 0.07 до –83.2 ± 0.09 мВ) также не изменились. Метоксамин в концентрации 10–8 М увеличивал частоту спонтанной активности у 7-дневных крысят с 78.3 ± 2.6 до 111.3 ± 3.1 пиков/мин, что составляет 42% (p < 0.01).

 

Рис. 1. Оригинальные записи электрической активности, демонстрирующие изменения конфигурации ПД в рабочем миокарде правого предсердия 7-дневных крыс с сохраненным синусовым узлом и спонтанной активностью при стимуляции метоксамином (a) и на фоне блокады фосфолипазы C ингибитором U-73122 (b).

 

Рис. 2. Эффект (в процентах) метоксамина и метоксамина + U-73122 на амплитудно-временные параметры у 7-дневных крыс с сохраненным синусовым узлом и спонтанной активностью (** p < 0.01).

 

Следующим этапом работы стало изучение стимуляции α1-АР метоксамином на фоне блокады U-73122 на параметры электрической активности миокарда у 7-дневных крысят (n = 10, рис. 1, 2) с сохраненным синусовым узлом и спонтанной активностью. U-73122 в отдельности не оказывал значимого воздействия на изучаемые электрофизиологические показатели. Применение метоксамина в концентрации 10–8 М на фоне U-73122 (10–5 М) у новорожденных крысят не изменяло мембранный потенциал, амплитуду потенциала действия, длительность фазы деполяризации и длительность потенциала действия при ДПД 20%, ДПД 50% и ДПД 90%. Метоксамин на фоне U-73122 не изменял частоту спонтанной активности 7-дневных крысят.

Влияние стимуляции α1-АР метоксамином и метоксамином на фоне блокады U-73122 на параметры электрической активности рабочих кардиомиоцитов у 21-дневных крыс с сохраненными синусовыми узлами и спонтанной активностью

Применение метоксамина в концентрации 10–8 М у 21-дневных животных (n = 10, рис. 3, 4) не изменяло мембранный потенциал (с –82.8 ± 0.25 до –83.4 ± 0.3 мВ) и амплитуду потенциала действия (с 103.3 ± 2.9 до 100.9 ± 2.6 мВ). Длительность потенциала действия при ДПД 20%, ДПД 50% и ДПД 90% уменьшилась с 6.4 ± 0.3 до 5.33 ± 0.25 мс, с 20.1 ± 0.7 до 17.5 ± 0.6 мс, с 65.4 ± 2.5 до 56.77 ± 2.6 мс, что составляет 16.5 (p < 0.01), 13 (p < 0.05) и 13.1% (p < 0.05) соответственно. Метоксамин в концентрации 10–8 М увеличивал частоту спонтанной активности у 21-дневных крыс с 125.7 ± 4.4 до 156.6 ± 7.5 пиков/мин, что составляет 24.5% (p < 0.05).

 

Рис. 3. Оригинальные записи электрической активности, демонстрирующие изменения конфигурации ПД в рабочем миокарде правого предсердия 21-дневных крыс с сохраненным синусовым узлом и спонтанной активностью при стимуляции метоксамином (a) и на фоне блокады фосфолипазы C ингибитором U-73122 (b).

 

Рис. 4. Эффект (в процентах) метоксамина и метоксамина + U-73122 на амплитудно-временные параметры у 21-дневных крыс с сохраненным синусовым узлом и спонтанной активностью (* p < 0.05, ** p < 0.01).

 

U-73122 в отдельности не оказывал значимого воздействия на изучаемые электрофизиологические показатели. Применение метоксамина в концентрации 10–8 М на фоне U-73122 (10–5 М) у 21-дневных крыс (n = 10, см. рис. 3, 4) не изменяло мембранный потенциал, амплитуду потенциала действия, длительность фазы деполяризации и длительность потенциала действия при ДПД 20%, ДПД 50% и ДПД 90%. Метоксамин на фоне U-73122 не изменял частоту спонтанной активности у 21-дневных крыс.

Влияние стимуляции α1-АР метоксамином и метоксамином на фоне блокады U-73122 на параметры электрической активности рабочих кардиомиоцитов у 100-дневных крыс с сохраненными синусовыми узлами и спонтанной активностью

Метоксамин в концентрации 10–8 М у 100-дневных крыс (n = 10, рис. 5, 6) уменьшал длительность потенциала действия при ДПД 20%, ДПД 50% и ДПД 90% с 7.3 ± 0.5 до 5.29 ± 0.78 мс, с 22.63 ± 1.9 до 17.4 ± 2.5 мс, с 71.5 ± 4.9 до 60.08 ± 6.05 мс, что составляет 27.5% (p < 0.01), 23.1% (p < 0.01) и 16% (p < 0.01) соответственно, тогда как длительность фазы деполяризации не изменялась (с 1.4 ± 0.05 до 1.4 ± 0.04 мс). Значения амплитуды потенциала действия (с 109.4 ± 2.7 до 104.7 ± 1.9 мВ) и мембранного потенциала (с –83.7 ± 0.2 до –83.3 ± 0.2 мВ) также не изменялись. Метоксамин в концентрации 10–8 М увеличивал частоту спонтанной активности у 100-дневных крыс с 164.7 ± 9.2 до 180.96 ± 9.8 пиков/мин, что составляет 9.9% (p < 0.01).

 

Рис. 5. Оригинальные записи электрической активности, демонстрирующие изменения конфигурации ПД в рабочем миокарде правого предсердия 100-дневных крыс с сохраненным синусовым узлом и спонтанной активностью при стимуляции метоксамином (a) и на фоне блокады фосфолипазы C ингибитором U-73122 (b).

 

Рис. 6. Эффект (в процентах) метоксамина и метоксамина + U-73122 на амплитудно-временные параметры у 100-дневных крыс с сохраненным синусовым узлом и спонтанной активностью (* p < 0.05, ** p < 0.01).

 

U-73122 в отдельности не оказывал значимого воздействия на изучаемые электрофизиологические показатели. Применение метоксамина в концентрации 10–8 М на фоне U-73122 (10-5 М) у 100-дневных крыс (n = 7, см. рис. 5, 6) не изменяло мембранный потенциал, амплитуду потенциала действия, длительность фазы деполяризации и длительность потенциала действия при ДПД 20%, ДПД 50% и ДПД 90%. Метоксамин на фоне U-73122 не изменял частоту спонтанной активности у 100-дневных крыс.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

В наших экспериментах мы наблюдали возрастные особенности влияния стимуляции α1-АР метоксамином на длительность реполяризации рабочих кардиомиоцитов и частоту генерации потенциала действия. Было показано, что агонист α1-АР влияет на длительность реполяризации на уровне ДПД 20%, ДПД 50% и ДПД 90% у крыс разного возраста. Однако изменений мембранного потенциала, амплитуды потенциала действия и длительности фазы деполяризации не наблюдалось. У новорожденных крыс метоксамин увеличивает продолжительность реполяризации, в то время как у 21- и 100-дневных крыс он вызывал ее уменьшение. Эти данные указывают на то, что передача сигналов α1-АР в миокарде предсердий модулируется с возрастом. Выявленные различия влияния стимуляции α1-АР метоксамином на длительность реполяризации рабочих кардиомиоцитов могут быть связаны с незрелой регуляцией симпатической иннервации в сердце новорожденных крыс, и это подтверждает важность адренергической регуляции во время развития [23, 24].

Изучение эффектов стимуляции α1-АР метоксамином проводилось как отдельно, так и на фоне специфического ингибитора PLС (U-73122). Исследование с блокадой PLC показало, что примененный ингибитор полностью блокирует действие метоксамина во всех возрастных группах (7, 21 и 100 дней). Это позволяет предположить, что PLС играет решающую роль в обеспечении возрастных эффектов метоксамина на электрическую активность предсердий.

Таким образом, в настоящей работе были установлены возрастные особенности противоположного влияния стимуляции α1-АР на длительность фазы реполяризации рабочих кардиомиоцитов предсердия и частоту генерации потенциала действия. Эти изменения происходят при активации PLC через передачу сигналов PKC в кардиомиоцитах правого предсердия крыс, что изменяется с возрастом. Активация PLС приводит к образованию двух продуктов – IP3 и DAG. Существует три типа рецепторов IP3, которые различаются по своей связывающей способности с IP3 и взаимодействию с ионами Ca2+. Исследования на различных животных показывают, что все три типа рецепторов могут присутствовать в сердце. Тем не менее существуют различия между видами в преобладании определенной изоформы. У большинства видов животных в предсердиях и желудочках доминирует второй тип рецептора IP3-R [25, 26]. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что плотность рецепторов IP3 в предсердиях примерно в 6 раз выше, чем в желудочках [8]. DAG активирует PKC, которая участвует в различных клеточных функциях, включая старение, фиброз и гипертрофию. Передача сигналов PKC в кардиомиоцитах крыс изменяется с возрастом. Хотя у новорожденных крыс присутствуют все шесть изоформ (альфа, бета1/2, дельта, эпсилон и дзета) [13], три изоформы (альфа, бета1/2) исчезают с возрастом. В миокарде взрослого человека остаются только дельта-, эпсилон- и дзета-изоформы [14]. Возможно, именно передача сигналов разными изоформами PKC может играть роль в развитии и созревании сердца, а потеря определенных изоформ с возрастом может способствовать возрастным изменениям электрической активности кардиомиоцитов. Ионные каналы являются мишенями для фосфорилирования PKC, что представляет собой регуляторный этап с важными последствиями для здоровья и болезней. Показано, что десять различных семейств мембранных белков, отвечающих за транспорт ионов, зависят от PIP2 для своей активности, и указано конкретное направление контроля активности этих белков со стороны PIP2. К ним относятся каналы транзитного рецепторного потенциала (TRP) (шесть семейств TRP: канонических (TRPC), TRP меластатиновых (TRPM), TRP ваниллоидных (TRPV), TRP анкириновых, TRP поликистозных (TRPP) и TRP муколипиновых); а также каналы внутреннего выпрямления калия (Kir), каналы KV, каналы двухпорового домена калия (K2P), кальций-активируемые калиевые каналы (KCa), потенциал-зависимые кальциевые каналы (CaV), хлоридные каналы, потенциал-зависимые натриевые каналы (NaV), кислоточувствительные ионные каналы (ASICs) и каналы коннексинов (Cx43) [16].

Активация PLC и образование IP3 и DAG важны для регуляции клеточных функций через PKC. Изменения в сигнализации PKC с возрастом, включая потерю изоформ, влияют на развитие сердца и его функции.

Результаты указывают на возможную связь между передачей сигналов PLС и наблюдаемыми возрастными эффектами метоксамина на электрическую активность предсердий, хотя эта связь не является однозначной.

Будущие исследования помогут изучить конкретные сигнальные пути, активируемые PLC, которые включаются при стимуляции α1-АР и влияют на продолжительность потенциала действия в разных возрастных группах.

ВКЛАДЫ АВТОРОВ

Идея работы и планирование эксперимента (Н.М., Н.И.З., Т.Л.З.), сбор данных (Н.М.), обработка данных (Н.М.), написание и редактирование манускрипта (Н.М., Н.И.З., Т.Л.З., A.Л.З.).

ФИНАНСИРОВАНИЕ РАБОТЫ

Настоящая работа финансировалась за счет средств бюджета Института фундаментальной медицины и биологии Казанского (Приволжского) федерального университета. Никаких дополнительных грантов на проведение или руководство данным конкретным исследованием получено не было.

СОБЛЮДЕНИЕ ЭТИЧЕСКИХ СТАНДАРТОВ

Эксперименты с животными проводились в соответствии с международными рекомендациями по проведению биомедицинских исследований с лабораторными животными и были одобрены Этическим комитетом Казанского федерального университета, протокол № 39 от 22.12.2022 г.

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

Авторы данной работы заявляют, что у них нет конфликта интересов.

×

Sobre autores

N. Mansour

Kazan (Volga Region) Federal University

Autor responsável pela correspondência
Email: nourm94@mail.ru
Rússia, Kazan

A. Zefirov

Kazan State Medical University

Email: nourm94@mail.ru
Rússia, Kazan

N. Ziyatdinova

Kazan (Volga Region) Federal University

Email: nourm94@mail.ru
Rússia, Kazan

T. Zefirov

Kazan (Volga Region) Federal University

Email: nourm94@mail.ru
Rússia, Kazan

Bibliografia

  1. Ahlquist RP (1948) A study of the adrenotropic receptors. Am J Physiol 153: 586–600. https://doi.org/10.1152/AJPLEGACY.1948.153.3.586
  2. Van Meel JC, de Jonge A, Timmermans PB, van Zwieten PA (1981) Selectivity of some alpha adrenoceptor agonists for peripheral alpha-1 and alpha-2 adrenoceptors in the normotensive rat. J Pharmacol Exp Therap 219: 760–767. https://jpet.aspetjournals.org/content/219/3/760.long
  3. McGrath JC (2015) Localization of α-adrenoceptors: JR Vane Medal Lecture. Br J Pharmacol 172: 1179–1194. https://doi.org/10.1111/BPH.13008/SUPPINFO
  4. Zhang J, Simpson PC, Jensen BC (2021) Cardiac a1A-adrenergic receptors: Emerging protective roles in cardiovascular diseases. Am J Physiol Heart Circ Physiol 320: H725–H733. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00621.2020
  5. Akinaga J, García-Sáinz JA, Pupo SA (2019) Updates in the function and regulation of α1-adrenoceptors. Br J Pharmacol 176: 2343–2357. https://doi.org/10.1111/BPH.14617
  6. O’Connell TD, Jensen BC, Baker AJ, Simpson PC (2014) Cardiac Alpha1-Adrenergic Receptors: Novel Aspects of Expression, Signaling Mechanisms, Physiologic Function, and Clinical Importance. Pharmacol Rev 66: 308–333. https://doi.org/10.1124/PR.112.007203
  7. Kockskämper J, Zima A V., Roderick HL, Pieske B, Blatter LA, Bootman MD (2008) Emerging roles of inositol 1,4,5-trisphosphate signaling in cardiac myocytes. J Mol Cell Cardiol 45: 128–147. https://doi.org/10.1016/j.yjmcc.2008.05.014
  8. Lipp P, Laine M, Tovey SC, Burrell KM, Berridge MJ, Li W, Bootman MD (2000) Functional InsP3 receptors that may modulate excitation-contraction coupling in the heart. Current Biol 10: 939–942. https://doi.org/10.1016/S0960-9822(00)00624-2
  9. Domeier TL, Zima A V., Maxwell JT, Huke S, Mignery GA, Blatter LA (2008) IP3 receptor-dependent Ca2+ release modulates excitation-contraction coupling in rabbit ventricular myocytes. Am J Physiol Heart Circ Physiol 294: 596–604. https://doi.org/10.1152/ajpheart.01155.2007
  10. Harzheim D, Movassagh M, Foo RSY, Ritter O, Tashfeen A, Conway SJ, Bootman MD, Roderick HL (2009) Increased InsP3Rs in the junctional sarcoplasmic reticulum augment Ca 2+ transients and arrhythmias associated with cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A 106: 11406–11411.https://doi.org/10.1073/PNAS.0905485106
  11. Ibarra C, Vicencio JM, Estrada M, Lin Y, Rocco P, Rebellato P, Munoz JP, Garcia-Prieto J, Quest AFG, Chiong M, Davidson SM, Bulatovic I, Grinnemo KH, Larsson O, Szabadkai G, Uhlén P, Jaimovich E, Lavandero S (2013) Local control of nuclear calcium signaling in cardiac myocytes by perinuclear microdomains of sarcolemmal insulin-like growth factor 1 receptors. Circ Res 112: 236–245. https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.112.273839
  12. Gomez AM, Ruiz-Hurtado G, Benitah J-P, Dominguez-Rodriguez A (2013) Ca2+ Fluxes Involvement in Gene Expression During Cardiac Hypertrophy. Curr Vasc Pharmacol 11: 497–506. https://doi.org/10.2174/1570161111311040013
  13. Disatnik MH, Buraggi G, Mochly-Rosen D (1994) Localization of Protein Kinase C Isozymes in Cardiac Myocytes. Exp Cell Res 210: 287–297. https://doi.org/10.1006/EXCR.1994.1041
  14. Pucéat M, Hilal-Dandano R, Strulovicin B, Brunton LL, Brown JH (1994) Differential regulation of protein kinase C isoforms in isolated neonatal and adult rat cardiomyocytes. J Biol Chem 269: 16938–16944. https://doi.org/10.1016/S0021-9258(19)89480-2
  15. Steinberg SF (2012) Cardiac actions of protein kinase C isoforms. Physiology 27: 130–139. https://doi.org/10.1152/PHYSIOL.00009.2012
  16. Gada KD, Logothetis DE (2022) PKC regulation of ion channels: The involvement of PIP2. J Biol Chem 298: 102035. https://doi.org/10.1016/J.JBC.2022.102035
  17. MacMillan D, McCarron JG (2010) The phospholipase C inhibitor U-73122 inhibits Ca2+ release from the intracellular sarcoplasmic reticulum Ca2+ store by inhibiting Ca2+ pumps in smooth muscle. Br J Pharmacol 160: 1295–1301. https://doi.org/10.1111/J.1476-5381.2010.00771.X
  18. Zefirov TL, Khabibrakhmanov II, Ziyatdinova NI, Zefirov AL (2016) Peculiar Aspects in Influence of α1-Adrenoceptor Stimulation on Isolated Rat Heart. Bull Exp Biol Med 162: 4–6. https://doi.org/10.1007/S10517-016-3530-Z
  19. Khabibrakhmanov II, Kuptsova AM, Ziyatdinova NI, Mansur N, Zefirov TL (2020) Alpha(1)-Adrenoceptors Activation Decreases Myocardial Contractility in Newborn Rats. J Exp Biol Agricult Sci 322–326. https://doi.org/10.18006/2020.8(Spl-2-AABAS).S322.S326
  20. Mansour N, Ziyatdinova NI, Zefirov TL (2023) Methoxamine Plays a Role in the Regulation of the Electrical Activity of Newborn Rats. Opera Med Physiol 10: 59–64. https://doi.org/10.24412/2500-2295-2023-2-59-64
  21. Mansour N, Ziyatdinova NI, Gallieva AM, Shakirov RR, Zefirov TL (2023) Effect of α1 Adrenoreceptors Stimulation on Electrical Activity of Rat Atria. Biophysics (Russ Feder) 68: 607–611. https://doi.org/10.1134/S0006350923040115
  22. Robinson RB (1996) Autonomic receptor-effector coupling during post-natal development. Cardiovas Res 31: 68 –76.
  23. Ferron L, Capuano V, Deroubaix E, Coulombe A, Renaud JF (2002) Functional and molecular characterization of a T-type Ca2 + channel during fetal and postnatal rat heart development. J Mol Cell Cardiol 34: 533–546. https://doi.org/10.1006/jmcc.2002.1535
  24. Protas L, Barbuti A, Qu J, Rybin VO, Palmiter RD, Steinberg SF, Robinson RB (2003) Neuropeptide Y Is an Essential In Vivo Developmental Regulator of Cardiac ICa,L. Circ Res 93: 972–979. https://doi.org/10.1161/01.RES.0000099244.01926.56
  25. Li X, Zima A V., Sheikh F, Blatter LA, Chen J (2005) Endothelin-1-induced arrhythmogenic Ca2+ signaling is abolished in atrial myocytes of inositol-1,4,5-trisphosphate(IP3)-receptor type 2-deficient mice. Circ Res 96: 1274–1281. https://doi.org/10.1161/01.RES.0000172556.05576.4c
  26. Bare DJ, Kettlun CS, Liang M, Bers DM, Mignery GA (2005) Cardiac type 2 inositol 1,4,5-trisphosphate receptor: Interaction and modulation by calcium/calmodulin-dependent protein kinase II. J Biol Chem 280: 15912–15920. https://doi.org/10.1074/jbc.M414212200

Arquivos suplementares

Arquivos suplementares
Ação
1. JATS XML
Baixar
2. Fig. 1. Original recordings of electrical activity demonstrating changes in PD configuration in the working right atrial myocardium of 7-day-old rats with preserved sinus node and spontaneous activity during stimulation with methoxamine (a) and against a background of phospholipase C blockade by the inhibitor U-73122 (b).

Baixar (181KB)
Metadados
3. Fig. 2. Effect (percentage) of metoxamine and metoxamine + U-73122 on amplitude-time parameters in 7-day-old rats with preserved sinus node and spontaneous activity (** p < 0.01).

Baixar (131KB)
Metadados
4. Fig. 3. Original recordings of electrical activity demonstrating changes in PD configuration in the working right atrial myocardium of 21-day-old rats with preserved sinus node and spontaneous activity during stimulation with methoxamine (a) and against a background of phospholipase C blockade by the inhibitor U-73122 (b).

Baixar (188KB)
Metadados
5. Fig. 4. Effect (percentage) of metoxamine and metoxamine + U-73122 on amplitude-time parameters in 21-day-old rats with preserved sinus node and spontaneous activity (* p < 0.05, ** p < 0.01).

Baixar (130KB)
Metadados
6. Fig. 5. Original recordings of electrical activity demonstrating changes in PD configuration in the working right atrial myocardium of 100-day-old rats with preserved sinus node and spontaneous activity during stimulation with methoxamine (a) and against a background of phospholipase C blockade by the inhibitor U-73122 (b).

Baixar (184KB)
Metadados
7. Fig. 6. Effect (percentage) of metoxamine and metoxamine + U-73122 on amplitude-time parameters in 100-day-old rats with preserved sinus node and spontaneous activity (* p < 0.05, ** p < 0.01).

Baixar (130KB)
Metadados

Declaração de direitos autorais © Russian Academy of Sciences, 2024

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».