Биологическая характеристика и пермиссивность к вирусам штамма диплоидных клеток почки летучей мыши нетопыря Натузиуса (Pipistrellus nathusii Keyserling & Blasius, 1839; (Chiroptera: Microchiroptera: Vespertilionidae)

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Введение. Летучие мыши (Microchiroptera) являются эпидемиологически важным естественным резервуаром вирусов различных таксономических групп, включая возбудителей особо опасных болезней человека и животных. Учитывая актуальность арбовирусных инфекций, представляется целесообразным проведение исследований по изучению спектра чувствительности клеток из тканей летучих мышей, обитающих и мигрирующих на территории Российской Федерации, к вирусам векторных инфекций сельскохозяйственных животных.

Цель исследования - получение диплоидного штамма клеток почечной ткани летучей мыши (ПЛМ) вида нетопырь лесной, или нетопырь Натузиуса (Pipistrellus nathusii), изучение его биологических характеристик, а также оценка пермиссивности полученной клеточной культуры к вирусам блютанга, лихорадки долины Рифт (ЛДР), заразного узелкового дерматита (ЗУД) крупного рогатого скота (КРС), миксомы кроликов (Myxomatosis cuniculi), фибромы Шоупа, африканской чумы лошадей (АЧЛ) и африканской чумы свиней (АЧС).

Материал и методы. Донорами органов служили 2 особи клинически здоровых самцов летучей мыши Р. nathusii. Для получения диплоидного штамма культуры клеток почки этого вида и изучения свойств полученной клеточной культуры градации от 6-го и выше пассажных уровней использовали традиционные цитологические, вирусологические и молекулярные методы. Определяли пермиссивность данного штамма к вирусам блютанга, ЛДР, ЗУД, миксомы кроликов, фибромы Шоупа, АЧЛ и АЧС.

Результаты. Формирование конфлюэнтного монослоя наблюдали через 72 ч, при этом индекс пролиферации (ИП) был равен 2,7-3,3. Клеточный монослой сохранялся без смены среды в течение 45 сут (срок наблюдения). Показана стабильность кариотипа в условиях непрерывного субкультивирования на уровне 36-го пассажа. Культура клеток получила наименование «Штамм диплоидных клеток почки летучей мыши Pipistrellus nathusii (Diploid cell line Pipistrellus nathusii kidney)»; установлена её пермиссивность к вирусам блютанга, ЛДР, ЗУД и миксомы кроликов.

Обсуждение. Чувствительность полученного клеточного материала к вирусам блютанга и ЛДР согласуется с данными об идентификации реовируса и возбудителя ЛДР у египетских фруктовых летучих мышей (Rousettus aegyptiacus), а пермиссивность данного штамма к возбудителям ЗУД и миксомы кроликов - с результатами обнаружения поксвирусов у вида поздний кожан (Eptesicus fuscus).

Выводы. Получен и паспортизирован штамм диплоидных клеток ПЛМ P nathusii. Установленная пермиссивность к вирусам блютанга, ЛДР, ЗУД и миксомы кроликов позволяет использовать его для выделения и изучения этих патологических агентов. Репродукция возбудителей в клетках данного штамма из тканей ПЛМ вида P nathusii, обитающего и мигрирующего на территории европейской части Российской Федерации, указывает на его потенциальную роль в эпидемиологии значимых инфекций, особенно трансмиссивных.

Об авторах

О. С. Поволяева

ФГБНУ Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии Минобрнауки России

Email: 2741188@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5635-6677

Поволяева Ольга Сергеевна - аспирант, микробиолог.

601125, Владимирская область, пос. Вольгинский Россия

С. Г. Юрков

ФГБНУ Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии Минобрнауки России

Автор, ответственный за переписку.
Email: patronn13@rambler.ru
ORCID iD: 0000-0002-6801-9424

Юрков Сергей Григорьевич - доктор биологических наук, профессор, главный научный сотрудник.

601125, Владимирская область, пос. Вольгинский

Россия

О. Г. Лаптева

ФГБНУ Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии Минобрнауки России

Email: oksana-lapteva@rambler.ru
ORCID iD: 0000-0002-4435-8368

Лаптева Оксана Георгиевна - кандидат вет. наук, старший научный сотрудник.

601125, Владимирская область, пос. Вольгинский

Россия

О. Л. Колбасова

ФГБНУ Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии Минобрнауки России

Email: olgakolbasova@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-5153-0982

Колбасова Ольга Львовна - кандидат биологических наук, доцент, ведущий научный сотрудник.

601125, Владимирская область, пос. Вольгинский

Россия

А. А. Чадаева

ФГБНУ Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии Минобрнауки России

Email: a_doct_or@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-9615-9758

Чадаева Анна Александровна – микробиолог.

601125, Владимирская область, пос. Вольгинский

Россия

А. Ю. Кольцов

ФГБНУ Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии Минобрнауки России

Email: kolcov.andrew@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-3294-6602

Кольцов Андрей Юрьевич - кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник.

601125, Владимирская область, пос. Вольгинский

Россия

И. П. Синдрякова

ФГБНУ Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии Минобрнауки России

Email: sindryakova.irina@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-5947-9402

Синдрякова Ирина Петровна - кандидат биологических наук, заведующий сектором лаборатории диагностики и мониторинга.

601125, Владимирская область, пос. Вольгинский

Россия

М. Е. Власов

ФГБНУ Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии Минобрнауки России

Email: VlasovMikhail1993@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-8324-3256

Власов Михаил Евгеньевич - заместитель руководителя группы.

601125, Владимирская область, пос. Вольгинский

Россия

С. П. Живодёров

ФГБНУ Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии Минобрнауки России

Email: zhivoderov-serg@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-4919-3080

Живодёров Сергей Петрович - кандидат вет. наук, заведующий научно-экспериментальным отделом.

601125, Владимирская область, пос. Вольгинский

Россия

А. В. Луницин

ФГБНУ Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии Минобрнауки России

Email: lunicyn@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5043-446X

Луницин Андрей Владимирович - старший научный сотрудник, заместитель директора по производству и качеству.

601125, Владимирская область, пос. Вольгинский

Россия

Список литературы

  1. IUCN SSC Bat Specialist Group. Available at: https://www.iucn.org/commissions/ssc-groups/mammals/specialist-groups-a-e/bat (accessed January 18, 2021).
  2. Baker M.L., Schountz T., Wang L.F. Antiviral immune responses of bats: a review. Zoonoses Public Health. 2013; 60(1): 104-16. https://doi.org/10.1111/j.1863-2378.2012.01528.x.
  3. Calisher C.H., Childs J.E., Field H.E., Holmes K.V, Schountz T. Bats: Important reservoir hosts of emerging viruses. Clin. Microbiol. Rev. 2006; 19(3): 531-45. https://doi.org/10.1128/CMR.00017-06.
  4. Wang L.F., Walker P.J., Poon L.L. Mass extinctions, biodiversity and mitochondrial function: are bats ‘special’ as reservoirs for emerging viruses? Curr. Opin. Virol. 2011; 1(6): 649-57. https://doi.org/10.1016/j.coviro.2011.10.013.
  5. Drexler J.F., Corman V.M., Wegner T., Tateno A.F., Zerbinati R.M., Gloza-Rausch F., et al. Amplification of emerging viruses in a bat colony. Emerg. Infect. Dis. 2011; 17(3): 449-56. https://doi.org/10.3201/eid1703.100526.
  6. Moratelli R., Calisher C.H. Bats and zoonotic viruses: can we confidently link bats with emerging deadly viruses? Mem. Inst. Oswaldo Cruz. 2015; 110(1): 1-22. https://doi.org/10.1590/0074-02760150048.
  7. Макаров В.В., Лозовой Д.А. Вирусы и рукокрылые. Эпидемиологические особенности восприимчивости. Пест-Менеджмент. 2017; (4): 13-22.
  8. Vazquez-Moron S., Juste J., Ibanez C., Berciano J.M., Echevarria J.E. Phylogeny of European Bat Lyssavirus 1 in Eptesicus isabellinus Bats, Spain. Emerg. Infect. Dis. 2011; 17(3): 520-3. https://doi.org/10.3201/eid1703.100894.
  9. Ceballos N.A., Moron S.V., Berciano J.M., Nicolas O., Lopez C.A., Juste J., et al. Novel lyssavirus in Bat, Spain. Emerg. Infect. Dis. 2013; 19(5): 793-5. https://doi.org/10.3201/eid1905.121071.
  10. Ge X.Y., Li J.L., Yang X.L., Chmura A.A., Zhu G., Epstein J.H., et al. Isolation and characterization of a bat SARS-like coronavi-rus that uses the ACE2 receptor. Nature. 2013; 503(7477): 535-8. https://doi.org/10.1038/nature12711.
  11. Janoska M., Vidovszky M., Molnar V., Liptovszky M., Harrach B., Benko M. Novel adenoviruses and herpesviruses detected in bats. Vet. J. 2011; 189(1): 118-21. https://doi.org/10.1016/j.tvjl.2010.06.020.
  12. Leroy E.M., Kumulungui B., Pourrut X., Rouquet P., Hassanin A., Yaba P., et al. Fruit bats as reservoirs of Ebola virus. Nature. 2005; 438(7068): 575-6. https://doi.org/10.1038/438575a.
  13. Kohl C., Lesnik R., Brinkmann A., Ebinger A., Radonic A., Nitsche A., et al. Isolation and characterization of three mammalian orthoreo-viruses from European bats. PLoS One. 2012; 7(8): e43106. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0043106.
  14. Chua K.B., Koh C.L., Hooi P.S., Wee K.F., Khong J.H., Chua B.H., et al. Isolation of Nipah virus from Malaysian Island flying-foxes. Microbes Infect. 2002; 4(2): 145-51. https://doi.org/10.1016/s1286-4579(01)01522-2.
  15. Halpin K., Young P.L., Field H.E., Mackenzie J.S. Isolation of Hen-dra virus from pteropid bats: a natural reservoir of Hendra virus. J. Gen. Virol.2000; 81(Pt. 8): 1927-32. https://doi.org/10.1099/0022-1317-81-8-1927.
  16. Albarino C.G., Foltzer M., Towne J.S., Rowe L.A., Campbell S., Jaramillo C.M., et al. Novel paramyxovirus associated with severe acute febrile disease, South Sudan and Uganda, 2012. Emerg. Infect. Dis. 2014; 20(2): 211-6. https://doi.org/10.3201/eid2002.131620.
  17. Waruhiu C., Ommeh S., Obanda V., Agwanda B., Gakuya F., Ge X.Y, et al. Molecular detection of viruses in Kenyan bats and discovery of novel astroviruses, caliciviruses and rotaviruses. Virol. Sin. 2017; 32(2): 101-14. https://doi.org/10.1007/s12250-016-3930-2.
  18. Zhang H., Todd S., Tachedjian M., Barr J.A., Luo M., Yu M., et al. A novel bat herpesvirus encodes homologues of major histocompatibility complex classes I and II, C-type lectin, and a unique family of immune-related genes. J. Virol. 2012; 86(15): 8014-30. https://doi.org/10.1128/jvi.00723-12.
  19. Graves D.C., Ferrer J.F. In vitro transmission and propagation of the bovine leukemia virus in monolayer cell cultures. Cancer Res. 1976; 36(11 Pt. 1): 4152-9.
  20. Sandekian V., Lim D., Prud’homme P., Lemay G. Transient high level mammalian reovirus replication in a bat epithelial cell line occurs without cytopathic effect. Virus Res. 2013; 173(2): 327-35. https://doi.org/10.1016/j.virusres.2013.01.010.
  21. Slater T., Eckerle I., Chang K. Bat lung epithelial cells show greater host species-specific innate resistance than MDCK cells to human and avian influenza viruses. Virol. J. 2018; 15(1): 68. https://doi.org/10.1186/s12985-018-0979-6.
  22. Jordan I., Horn D., Oehmke S., Leendertz F.H., Sandig V. Cell lines from the Egyptian fruit bat are permissive for modified vaccinia Ankara. Virus Res. 2009; 145(1): 54-62. https://doi.org/10.1016/).virusres.2009.06.007.
  23. Crameri G., Todd S., Grimley S., McEachern J.A., Marsh G.A., Smith C., et al. Establishment, immortalisation and characterisation of pteropid bat cell lines. PLoS One. 2009; 4(12): e8266. https://doi. org/10.1371/journal.pone.0008266.
  24. Banerjee A., Misra V., Schountz T., Baker M.L. Tools to study pathogen-host interactions in bats. Virus Res. 2018; 248: 5-12. https://doi.org/10.1016.
  25. Biesold S.E., Ritz D., Gloza-Rausch F., Wollny R., Drexler J.F., Corman V.M., et al. Type I interferon reaction to viral infection in interferon-competent, immortalized cell lines from the African fruit bat Eidolon helvum. PLoS One. 2011; 6(11): e28131. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0028131.
  26. Zhou P., Chionh Y.T., Irac S.E., Ahn M., Jia Ng J.H., Fossum E., et al. Unlocking bat immunology: establishment of Pteropus alec-to bone marrow-derived dendritic cells and macrophages. Sci. Rep. 2016; 6: 38597. https://doi.org/10.1038/srep38597.
  27. Irving A.T., Rozario P., Kong P., Luko K., Gorman J.J., Hastie M.L., et al. Robust dengue virus infection in bat cells and limited innate immune responses coupled with positive serology from bats in In-doMalaya and Australasia. Cell. Mol. Life Sci. 2020; 77(8): 1607-22. https://doi.org/10.1007/s00018-019-03242-x.
  28. Жуков В.А., Шишкина Л.Н., Сафатов A.C., Сергеев A.A., Пьян-ков О.В., Петрищенко В.А. и др. Валидация модифицированного алгоритма прогнозирования восприимчивости хозяина к вирусам с учетом параметров восприимчивости первичных культур клеток-мишеней и факторов врожденного иммунитета. Вестник Российской академии медицинских наук. 2010; (5): 24-9.
  29. Ford C.E., Hamerton J.L. A colchicine, hypotonic citrate, squash sequence for mammalian chromosomes. Stain Technol. 1956; 31(6): 247-51. https://doi.org/10.3109/10520295609113814.
  30. Rothfels K.H., Siminovitch L. Air drying technique for flattening chromosomes in mammalian cells grown in vitro. Stain Technol. 1958; 33(2): 73-7. https://doi.org/10.3109/10520295809111827.
  31. Bowden T.R., Babiukb S.L., Parkynb G.R., Coppsb J.S., Boylea D.B. Capripoxvirus tissue tropism and shedding: A quantitative study inexperimentally infected sheep and goats. Virology. 2008; 371 (2) 380-393. https://doi.org/10.1016/j.virol.2007.10.002.
  32. AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals (Formerly AVMA Guidelines on Euthanasia): 2013 Edition. Available at: https://www.avma.org/KB/Policies/Pages/Euthanasia-Guidelines.aspx (accessed January 18, 2021).
  33. Воронцов Н.Н., Раджабли С.И., Волобуев В.Т. Сравнительная кариология летучих мышей семейства Vespertilionidae (Chiro-ptera). В кн.: Млекопитающие (эволюция, кариология, систематика, фаунистика). Новосибирск: Наука; 1969: 16-21.
  34. Baker R.J. Karyotypic trends in bats. In: Wimsatt W.A., ed. Biology of bats. Academic Press Inc.: New York; 1970, 65-97. https://doi.org/10.1016/b978-0-12-758001-2.50007-1.
  35. Park S.R., Won P.O. Chromosomes of Korean bats. J. Mammal. Soc. Jpn. 1978; (7): 199-203. https://doi.org/10.11238/jmammsocjapan1952.7.1999.
  36. Дзуев Р.И., Хашкулова М.А., Боготова И.Х. Особенности хромосомного набора и промеров тела средиземноморского нетопыря (Pipisrellus Kuhli) в условиях лесостепного пояса северного макросклона Центрального Кавказа. Современные проблемы науки и образования. 2016; (3): 390.
  37. Balkema-Buschmann A., Rissmann M., Kley N., Ulrich R., Eiden M., Groschup M.H. Productive propagation of Rift valley fever phlebovi-rus vaccine strain MP-12 in Rousettus aegyptiacus fruit bats. Viruses. 2018; 10(12): 681. https://doi.org/10.3390/v10120681.
  38. Fagre A.C., Lee J.S., Kityo R.M., Bergren N.A., Mossel E.C., Nakayiki T., et al. Discovery and characterization of Bukakata orbivirus (Reoviridae: Orbivirus), a novel virus from a Ugandan bat. Viruses. 2019; 11(3): 209. https://doi.org/10.3390/v11030209.
  39. Emerson Ginny L., Nordhausen R., Garner M.M., Huckabee J.R., Johnson S., Wohrle R.D., et al. Novel Poxvirus in big brown bats, Northwestern United States. Emerg InfectDis. 2013; 19(6): 1002-4. https://doi.org/10.3201/eid1906.121713.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Поволяева О.С., Юрков С.Г., Лаптева О.Г., Колбасова О.Л., Чадаева А.А., Кольцов А.Ю., Синдрякова И.П., Власов М.Е., Живодёров С.П., Луницин А.В., 2021

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».