Особенности иммунопатогенеза болезни, вызываемой вирусом Эбола, изученные с использованием метода проточной цитометрии
- Авторы: Борисевич Г.В.1, Овчинников А.В.1, Кириллова С.Л.1, Туравинина А.С.1
-
Учреждения:
- ФГБУ «48-й Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
- Выпуск: Том 102, № 6 (2025)
- Страницы: 659-674
- Раздел: ОБЗОРЫ
- URL: https://ogarev-online.ru/0372-9311/article/view/381672
- DOI: https://doi.org/10.36233/0372-9311-680
- EDN: https://elibrary.ru/DVWQIS
- ID: 381672
Цитировать
Аннотация
Вирус Эбола (ВЭ) представляет постоянную угрозу для общественного здравоохранения с момента своего первого выявления в 1976 г. Проточная цитометрия (ПЦ) является одним из ведущих методов изучения болезни, вызываемой ВЭ.
Цель обзора — рассмотреть особенности иммунопатогенеза болезни, вызываемой ВЭ, изучение которых стало возможным благодаря использованию метода ПЦ.
При применении ПЦ и методов, технологической платформой для которых стала ПЦ (Luminex xMAP, CyTOF), выявлены факты иммунопатогенеза болезни, вызываемой ВЭ: ведущая роль цитотоксических лимфоцитов в защите от инфекции; дендритные клетки являются ранней мишенью ВЭ; элиминация NK-клеток на ранней стадии заболевания может быть причиной неспособности организма хозяина обеспечить устойчивый иммунный ответ; «уклонение» вируса от иммунного ответа. Летальный исход при болезни, вызываемой ВЭ, связан с аберрантным врождённым иммунным ответом и подавлением адаптивного иммунитета. Для реакции иммунитета при этом характерен «цитокиновый шторм». Иммуносупрессия при болезни, вызываемой ВЭ, проявляется низким уровнем циркулирующих цитокинов и потерей периферических Т-лимфоцитов. Ключевыми моментами для исхода инфекции являются время и кинетика репликации вируса и иммунного ответа. У выздоровевших после перенесённой болезни происходит активация Т-клеток, их пролиферация и формирование специфической противовирусной цитотоксичности, клеточного и гуморального иммунитета и иммунологической памяти. Установлено, что эффективным критерием оценки антиген-специфичного Т-клеточного иммунного ответа, формирующегося при введении вакцин против ВЭ, является доля полифункциональных Т-лимфоцитов. Рецептор фосфатидилсерина TIM-1 играет центральную роль в проникновении вируса в организм, его распространении и развитии «цитокинового шторма». Ингибирование межклеточной передачи ВЭ зависит от белка хозяина BST2/тетерина/CD317. Метод проточной вирометрии позволяет обнаруживать повреждённые при производстве вакцины против ВЭ вирусные частицы. Освещены вопросы пробоподготовки для ПЦ образцов, содержащих ВЭ.
Используя возможности ПЦ, ещё предстоит изучить врождённые и адаптивные реакции иммунной системы, имеющие отношение к патогенезу заболевания, вызываемого ВЭ, на уровне целого организма, клеток и молекул.
Ключевые слова
Об авторах
Галина Валентиновна Борисевич
ФГБУ «48-й Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Автор, ответственный за переписку.
Email: 48cnii@mil.ru
ORCID iD: 0000-0002-0843-9427
канд. биол. наук, с. н. с.
Россия, Сергиев ПосадАлександр Викторович Овчинников
ФГБУ «48-й Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Email: 48cnii@mil.ru
ORCID iD: 0000-0003-2309-3572
канд. техн. наук, с. н. с.
Россия, Сергиев ПосадСветлана Леонидовна Кириллова
ФГБУ «48-й Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Email: 48cnii@mil.ru
ORCID iD: 0000-0003-1245-9225
д-р биол. наук, в. н. с.
Россия, Сергиев ПосадАнна Сергеевна Туравинина
ФГБУ «48-й Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Email: 48cnii@mil.ru
ORCID iD: 0009-0000-5662-6799
лаборант-исследователь
Россия, Сергиев ПосадСписок литературы
- Shapiro H.M. Practical Flow Cytometry, 4th Edition. 2003.
- Adan A., Alizada G., Kiraz Y., et al. Flow cytometry: basic principles and applications. Crit. Rev. Biotechnol. 2017;37(2): 163–76. DOI: https://doi.org/10.3109/07388551.2015.1128876
- Geisbert T.W., Hensley L.E., Larsen T., et al. Pathogenesis of Ebola hemorrhagic fever in cynomolgus macaques evidence that dendritic cells are early and sustained targets of infection. Amer. J. Pathol. 2003;163(6):2347–70. DOI: https://doi.org/10.1016/S0002-9440(10)63591-2
- Reed D.S., Hensley L.E., Geisbert J.B., et al. Depletion of peripheral blood T lymphocytes and NK cells during the course of Ebola hemorrhagic fever in cynomolgus macaques. Viral Immunol. 2004;17(3):390–400. DOI: https://doi.org/10.1089/vim.2004.17.390
- Banchereau J., Briere F., Caux C., et al. Immunobiology of dendritic cells. Annu. Rev. Immunol. 2000;18:767–811. DOI: 10837075' target='_blank'>https://doi.org/10.1146/annurev.immunol.18.1.767.PMID: 10837075
- Sullivan N.J., Hensley L., Asiedu C., et al. CD8+ cellular immunity mediates rAd5 vaccine protection against Ebola virus infection of nonhuman primates. Nat. Med. 2011;17(9):1128–31. DOI: https://doi.org/10.1038/nm.2447
- Stanley D.A., Honko A.N., Asiedu C., et al. Chimpanzee adenovirus vaccine generates acute and durable protective immunity against ebolavirus challenge. Nat. Med. 2014; 20(10):1126–9. DOI: https://doi.org/10.1038/nm.3702
- Thom R., Tipton T., Strecker T., et al. Longitudinal antibody and T cell responses in Ebola virus disease survivors and contacts: an observational cohort study. Lancet Infect. Dis. 2021;21(4): 507–16. DOI: https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30736-2
- Ewer K., Rampling T., Venkatraman N., et al. A monovalent chimpanzee adenovirus Ebola vaccine boosted with MVA. N. Engl. J. Med. 2016;374(17):1635–46. DOI: https://doi.org/10.1056/NEJMoa1411627
- Raabe V., Lai L., Morales J., et al. Cellular and humoral immunity to Ebola Zaire glycoprotein and viral vector proteins following immunization with recombinant vesicular stomatitis virus-based Ebola vaccine (rVSVΔG-ZEBOV-GP). Vaccine. 2023;41(8):1513–23. DOI: https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2023.01.059
- Downs I., Johnson J.C., Rossi F., et al. Natural history of aerosol-induced Ebola virus disease in rhesus macaques. Viruses. 2021;13(11):2297. DOI: https://doi.org/10.3390/v13112297
- Twenhafel N.A., Mattix M.E., Johnson J.C., et al. Pathology of experimental aerosol Zaire ebolavirus infection in rhesus macaques. Vet. Pathol. 2013;50(3):514–29. DOI: https://doi.org/10.1177/0300985812469636
- Борисевич Г.В., Кириллова С.Л., Шатохина И.В. и др. Оценка клеточного иммунитета макаков резусов методом проточной цитометрии после экспериментального инфицирования вирусом Эбола (Filoviridae; Ebolavirus: Zaire ebolavirus). Вопросы вирусологии. 2021;66(4):289–98. Borisevich G.V., Kirillova S.L., Shatokhina I.V., et al. Flow cytometry evaluation of the rhesus monkey cellular immunity following the Zaire ebolavirus (Filoviridae; Ebolavirus: Zaire ebolavirus) experimental infection. Problems of Virology. 2021;66(4): 289–98. DOI: https://doi.org/10.36233/0507-4088-64 EDN: https://elibrary.ru/kzzglw
- Sanchez A., Lukwiya M., Bausch D., et al. Analysis of human peripheral blood samples from fatal and nonfatal cases of Ebola (Sudan) hemorrhagic fever: cellular responses, virus load, and nitric oxide levels. J. Virol. 2004;78(19):10370–7. DOI: https://doi.org/JVI.78.19.10370–10377.2004
- Gupta M., Spiropoulou C., Rollin P.E. Ebola virus infection of human PBMCs causes massive death of macrophages, CD4 and CD8 T cell sub-populations in vitro. Virol. 2007;364(1):45–54. DOI: https://doi.org/10.1016/j.virol.2007.02.017
- Ma Y.J., Dissen G.A., Rage F., Ojeda S.R. RNase protection assay. Methods. 1996;10(3):273–8. DOI: https://doi.org/10.1006/meth.1996.0102
- Wauquier N., Becquart P., Padilla C., et al. Human fatal Zaire Ebola virus infection is associated with an aberrant innate immunity and with massive lymphocyte apoptosis. PLoS Negl. Trop. Dis. 2010;4(10):e837. DOI: https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0000837
- McElroy A.K., Akondy R.S., Davis C.W., Ellebedy A.H. Human Ebola virus infection results in substantial immune activation. Proc. Natl Acad. Sci. 2015;112(15):4719–24. DOI: https://doi.org/10.1073/pnas.1502619112
- Fink K. Origin and function of circulating plasmablasts during acute viral infections. Front. Immunol. 2012;3:78. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2012.00078
- Miller J.D., van der Most R.G., Akondy R.S., et al. Human effector and memory CD8+ T cell responses to smallpox and yellow fever vaccines. Immunity. 2008;28(5):710–22. DOI: https://doi.org/10.1016/j.immuni.2008.02.020
- Agrati C., Castilletti C., Casetti R., et al. Longitudinal characterization of dysfunctional T cell-activation during human acute Ebola infection. Cell Death Dis. 2016;7(3):e2164. DOI: https://doi.org/10.1038/cddis.2016.55
- Petrosillo N., Nicastri E., Lanini S., et al. Ebola virus disease complicated with viral interstitial pneumonia: a case report. BMC Infect. Dis. 2015;15:432. DOI: https://doi.org/10.1186/s12879-015-1169-4
- Di Caro A., Puro V., Fusco F.M., et al. The added value of long-lasting preparedness for the management of a patient with Ebola. Eur. J. Intern. Med. 2015;26(6):451–2. DOI: https://doi.org/10.1016/j.ejim.2015.03.005
- Cianfanelli V., De Zio D., Di Bartolomeo S., et al. Ambra1 at a glance. J. Cell. Sci. 2015;128(11):2003–8. DOI: https://doi.org/10.1242/jcs.168153
- Кудрявцев И.В. Т-клетки памяти: основные популяции и стадии дифференцировки. Российский иммунологический журнал. 2014;8(4):947–64. Kudryavtsev I.V. Memory T-cell: major populations and stages of differentiation. Russian Journal of Immunology. 2014;8(4):947–64. EDN: https://elibrary.ru/teyxhr
- Lyon G.M., Mehta A.K., Varkey J.B., et al. Emory Serious Communicable Diseases Unit. Clinical care of two patients with Ebola virus disease in the United States. N. Engl. J. Med. 2014;371(25):2402–9. DOI: https://doi.org/10.1056/NEJMoa1409838
- Mandla J.N., Feinberg M.B. Robust and sustained immune activation in human Ebola virus infection. Proc. Natl Acad. Sci. 2015;112(15):4519. DOI: https://doi.org/10.1073/pnas.1503864112
- Dahlke C., Lunemann S., Kasonta R., et al. Comprehensive characterization of cellular immune responses following Ebola virus infection. J. Infect. Dis. 2017;215(2):287–92. DOI: https://doi.org/10.1093/infdis/jiw508
- Kreuels B., Wichmann D., Emmerich P., et al. A case of severe Ebola virus infection complicated by gram-negative septicemia. N. Engl. J. Med. 2014;371(25):2394–401. DOI: https://doi.org/10.1056/NEJMoa1411677
- La Vergne S.M., Sakabe S., Kanneh L., et al. Ebola-Specific CD8+ and CD4+ T-cell responses in Sierra Leonean Ebola virus survivors with or without post-Ebola sequelae. J. Infect. Dis. 2020;222(9):1488–97. DOI: https://doi.org/10.1093/infdis/jiaa268
- Whitt M. Generation of VSV pseudotypes and using recombinant G-VSV for studies on virus entry, identification of entry inhibitors, and immune responses to vaccines. J. Virol. Methods. 2010;169:65–74. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2010.08.006
- Sakabe S., Sullivan B.M., Hartnett J.N., et al. Analysis of CD8+ T cell response during the 2013-2016 Ebola epidemic in West Africa. Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2018;115(32):E7578–86. DOI: https://doi.org/10.1073/pnas.1806200115
- Rowe A.K., Bertolli J., Khan A.S., et al. Clinical, virologic, and immunologic follow-up of convalescent Ebola hemorrhagic fever patients and their household contacts, Kikwit, Democratic Republic of the Congo. Commission de Lutte contre les Epidémies à Kikwit. J. Infect. Dis. 1999;179(Suppl. 1):28–35. DOI: http://doi.org/10.1086/514318
- Uyeki T.M., Erickson B.R., Brown S., et al. Ebola virus persistence in semen of male survivors. Clin. Infect. Dis. 2016;62(12):1552–5. DOI: https://doi.org/10.1093/cid/ciw202
- MacIntyre C., Chughtai A. Recurrence and reinfection — a new paradigm for the management of Ebola virus disease. Int. J. Infect. Dis. 2016;43:58–61. DOI: https://doi.org/10.1016/j.ijid.2015.12.011
- Bolton D.L., Roederer M. Flow cytometry and the future of vaccine development. Expert. Rev. Vaccines. 2009;8(6):779–89. DOI: https://doi.org/10.1586/erv.09.41
- Milligan I.D., Gibani M.M., Sewell R., et al. Safety and immunogenicity of novel adenovirus type 26- and modified vaccinia Ankara-vectored Ebola vaccines: a randomized clinical trial. JAMA. 2016;315(15):1610–23. DOI: https://doi.org/10.1001/jama.2016.4218
- Pollard A.J., Launay O., Lelievre J.D., et al. Safety and immunogenicity of a two-dose heterologous Ad26.ZEBOV and MVA-BN-Filo Ebola vaccine regimen in adults in Europe (EBOVAC2): a randomised, observer-blind, participant-blind, placebo-controlled, phase 2 trial. Lancet Infect. Dis. 2021;21(4):493–506. DOI: https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30476-X
- Zhu F.C., Hou L.H., Li J.X., et al. Safety and immunogenicity of a novel recombinant adenovirus type-5 vector-based Ebola vaccine in healthy adults in China: preliminary report of a randomized, double-blind, placebo-controlled, phase I trial. Lancet. 2015;385(9984):2272–9. DOI: https://doi.org/10.1016/s0140-6736(15)60553-0
- Venkatraman N., Ndiaye B.P., Bowyer G., et al. Safety and immunogenicity of a heterologous prime-boost Ebola virus vaccine regimen in healthy adults in the United Kingdom and Senegal. J. Infect. Dis. 2019;219(8):1187–97. DOI: https://doi.org/10.1093/infdis/jiy639
- Kibuuka H., Berkowitz N.M., Millard M., et al. Safety and immunogenicity of Ebola virus and Marburg virus glycoprotein DNA vaccines assessed separately and concomitantly in healthy Ugandan adults: A phase 1b, randomised, double-blind, placebo-controlled clinical trial. Lancet. 2015;385(9977):1545–54. DOI: https://doi.org/10.1016/S0140-6736(14)62385-0
- Ковыршина А.В., Сизикова Т.Е., Лебедев В.Н. и др. Вакцины против болезни, вызванной вирусом Эбола: актуальные проблемы и перспективы. Вопросы вирусологии. 2023;68(5):372–84. Kovyrshina A.V., Sizikova T.E., Lebedev V.N., et al. Vaccines to prevent Ebola virus disease: current challenges and perspectives. Problems of Virology. 2023;68(5):372–84. DOI: https://doi.org/10.36233/0507-4088-193 EDN: https://elibrary.ru/euauhi
- Darrah P.A., Patel D.T., De Luca P.M., et al. Multifunctional TH1 cells define a correlate of vaccine-mediated protection against Leishmania major. Nat. Med. 2007;13(7):843–50. DOI: https://doi.org/10.1038/nm1592
- Lyons A.B. Analysing cell division in vivo and in vitro using flow cytometric measurement of CFSE dye dilution. J. Immunol. Methods. 2000;243(1-2):147–54. DOI: https://doi.org/10.1016/s0022-1759(00)00231-3
- Wallace P.K., Tario J.D., Fisher J.L., et al. Tracking antigen-driven responses by flow cytometry: monitoring proliferation by dye dilution. Cytometry A. 2008;73(11):1019–34. DOI: https://doi.org/10.1002/cyto.a.20619
- Dolzhikova I.V., Zubkova O.V., Tukhvatulin A.I., et al. Safety and immunogenicity of GamEvac-Combi, a heterologous VSV- and Ad5-vectored Ebola vaccine: An open phase I/II trial in healthy adults in Russia. Hum. Vaccines Immunother. 2017;13(3):613–20. DOI: https://doi.org/10.1080/21645515.2016.1238535
- Brunton B., Rogers K., Phillips E.K., et al. TIM-1 serves as a receptor for Ebola virus in vivo, enhancing viremia and pathogenesis. PLoS Negl. Trop. Dis. 2019;13(6):e0006983. DOI: https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0006983
- Moller-Tank S., Kondratowicz A.S., Davey R.A., et al. Role of the phosphatidylserine receptor TIM-1 in enveloped-virus entry. J. Virol. 2013;87:8327–41. DOI: https://doi.org/10.1128/JVI.01025-13
- Curtiss M., Colgan J. The role of the T-cell costimulatory molecule Tim-1 in the immune response. Immunol. Res. 2007;39:52–61. DOI: https://doi.org/10.1007/s12026-007-0063-6
- Degauque N., Mariat C., Kenny J., et al. Immunostimulatory Tim-1-specific antibody deprograms Tregs and prevents transplant tolerance in mice. J. Clin. Invest. 2008;118:735–41. DOI: https://doi.org/10.1172/JCI32562
- Kobayashi N., Karisola P., Peña-Cruz V., et al. TIM-1 and TIM-4 glycoproteins bind phosphatidylserine and mediate uptake of apoptotic cells. Immunity. 2007;27:927–40. DOI: https://doi.org/10.1016/j.immuni.2007.11.011
- Du P., Xiong R., Li X., Jiang J. Immune regulation and antitumor effect of TIM-1. J. Immunol. Res. 2016;2016:8605134. DOI: https://doi.org/10.1155/2016/8605134
- Younan P., Iampietro M., Nishida A., et al. Ebola virus binding to Tim-1 on T Lymphocytes induces a cytokine storm. mBio. 2017;8(5):e00845–17. DOI: https://doi.org/10.1128/mBio.00845-17
- Bray M., Davis K., Geisbert T., et al. A mouse model for evaluation of prophylaxis and therapy of Ebola hemorrhagic fever. J. Infect. Dis. 1998;178:651–61. DOI: https://doi.org/10.1086/515386
- Towner J.S., Paragas J., Dover J.E., et al. Generation of eGFP expressing recombinant Zaire Ebolavirus for analysis of early pathogenesis events and high-throughput antiviral drug screening. Virology. 2005;332:20–7. DOI: https://doi.org/10.1016/j.virol.2004.10.048
- Santos R.I., Ilinykh P.A., Pietzsch C.A., et al. Blocking of ebolavirus spread through intercellular connections by an MPER-specific antibody depends on BST2/tetherin. Cell Rep. 2023;42(10):113254. DOI: https://doi.org/10.1016/j.celrep.2023.113254
- Heler R., Samai P., Modell J.W., et al. Cas9 specifies functional viral targets during CRISPR-Cas adaptation. Nature. 2015;519(7542):199–202. DOI: https://doi.org/10.1038/nature14245
- Ilinykh P.A., Santos R.I., Gunn B.M., et al. Asymmetric antiviral effects of ebolavirus antibodies targeting glycoprotein stem and glycan cap. PLoS Pathog. 2018;14(8):e1007204. DOI: https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1007204
- Phillips D.M. The role of cell-to-cell transmission in HIV infection. AIDS. 1994;8(6):719–31. DOI: https://doi.org/10.1097/00002030-199406000-00001
- Mothes W., Sherer N.M., Jin J., Zhong P. Virus cell-to-cell transmission. J. Virol. 2010;84(17):8360–8. DOI: https://doi.org/10.1128/JVI.00443-10
- Jouvenet N., Windsor M., Rietdorf J., et al. African swine fever virus induces filopodialike projections at the plasma membrane. Cell Microbiol. 2006;8(11):1803–11. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1462-5822.2006.00750
- Miao C., Li M., Zheng Y.M., et al. Cell-cell contact promotes Ebola virus GP-mediated infection. Virology. 2016;488:202–15. DOI: https://doi.org/10.1016/j.virol.2015.11.019
- Yasuda J. Ebolavirus replication and tetherin/BST-2. Front. Microbiol. Sec. Virology. 2012;3:111. DOI: https://doi.org/10.3389/fmicb.2012.00111
- Neil S.J.D., Zang T., Bieniasz P.D. Tetherin inhibits retrovirus release and is antagonized by HIV-1 Vpu. Nature. 2008;451(7177):425–30. DOI: https://doi.org/10.1038/nature06553
- Kühl A., Banning C., Marzi A., et al. The Ebola virus glycoprotein and HIV-1 Vpu employ different strategies to counteract the antiviral factor tetherin. J. Infect. Dis. 2011; 204(Suppl. 3):850–60. DOI: https://doi.org/10.1093/infdis/jir378
- Elshal M.F., McCoy J.P. Multiplex bead array assays: performance evaluation and comparison of sensitivity to ELISA. Method. 2006;38(4):317–23. DOI: https://doi.org/10.1016/j.ymeth.2005.11.010
- Bernhard O.K., Mathias R.A., Barnes T.W., Simpson R.J. A fluorescent microsphere-based method for assay of multiple analytes in plasma. Methods Mol. Biol. 2011;728:195–206. DOI: https://doi.org/10.1007/978-1-61779-068-3_12
- Ahsan H. Monoplex and multiplex immunoassays: approval, advancements, and alternatives. Comp. Clin. Path. 2022;31(2):333–45. DOI: https://doi.org/1010.1007/s00580-021-03302-4
- Ayouba A., Touré A., Butel C., et al. Development of a sensitive and specific serological assay based on luminex technology for detection of antibodies to Zaire Ebola virus. J. Clin. Microbiol. 2016;55(1):165–76. DOI: https://doi.org/10.1128/JCM.01979-16
- Sow M.S., Etard J.F., Baize S., et al. New evidence of long-lasting persistence of Ebola virus genetic material in semen of survivors. J. Infect. Dis. 2016;214(10):1475–6. DOI: https://doi.org/10.1093/infdis/jiw078
- PostEboGui. URL: https://postebogui.wordpress.com
- Surtees R., Stern D., Ahrens K., et al. Development of a multiplex microsphere immunoassay for the detection of antibodies against highly pathogenic viruses in human and animal serum samples. PLoS. Negl. Trop. Dis. 2020;14(10):e0008699. DOI: https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0008699
- Saijo M., Niikura M., Morikawa S., et al. Enzyme-linked immunosorbent assays for detection of antibodies to Ebola and Marburg viruses using recombinant nucleoproteins. J. Clin. Microbiol. 2001;39(1):1–7. DOI: https://doi.org/10.1128/JCM.39.1.1-7.2001
- Yoshimatsu K., Arikawa J. Antigenic properties of N protein of hantavirus. Viruses. 2014;6(8):3097–109. DOI: https://doi.org/10.3390/v6083097
- Sas M.A., Comtet L., Donnet F., et al. A novel double-antigen sandwich ELISA for the species-independent detection of Crimean-Congo hemorrhagic fever virus-specific antibodies. Antiviral Res. 2018;151:24–6. DOI: https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2018.01.006
- Jansen van Vuren P., Potgieter A.C., Paweska J.T., van Dijk A.A. Preparation and evaluation of a recombinant Rift Valley fever virus N protein for the detection of IgG and IgM antibodies in humans and animals by indirect ELISA. J. Virol. Methods. 2007;140(1-2):106–14. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2006.11.005
- Vu H., Shulenin S., Grolla A., et al. Quantitative serology assays for determination of antibody responses to Ebola virus glycoprotein and matrix protein in nonhuman primates and humans. Antiviral Res. 2016;126:55–61. DOI: https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2015.11.012
- Tanner S.D., Baranov V.I., Ornatsky O.I., et al. An introduction to mass cytometry: fundamentals and applications. Cancer Immunol. Immunother. 2013;62(5):955–65. DOI: https://doi.org/10.1007/s00262-013-1416-8
- Leipold M.D., Newell E.W., Maecker H.T. Multiparameter phenotyping of human PBMCs using mass cytometry. Methods. Mol. Biol. 2015;1343:81–95. DOI: https://doi.org/10.1007/978-1-4939-2963-4_7
- McElroy A.K., Akondy R.S., Mcllwain D.R., et al. Immunologic timeline of Ebola virus disease and recovery in humans. JCI Insight. 2020;5(10):e137260. DOI: https://doi.org/10.1172/jci.insight.137260
- Liddell A.M., Davey R.T. Jr., Mehta A.K., et al. Characteristics and clinical management of a cluster of 3 patients with Ebola virus disease, including the first domestically acquired cases in the United States. Ann. Intern. Med. 2015;163(2):81–90. DOI: https://doi.org/10.7326/m15-0530
- Maltseva M., Langlois M.A. Flow virometry for characterizing the size, concentration, and surface antigens of viruses. Curr. Protoc. 2022;2(2):e368. DOI: https://doi.org/10.1002/cpz1.368
- Ricci G., Minsker K., Kapish A., et al. Flow virometry for process monitoring of live virus vaccines-lessons learned from ERVEBO. Sci. Rep. 2021;11(1):7432. DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-021-86688-z
- Lanier L.L. Warner Paraformaldehyde fixation of hematopoietic cells for quantitative flow cytometry (FACS) analysis. J. Immunol. Methods. 1981;47(1):25–30. DOI: https://doi.org/10.1016/0022-1759(81)90253-2
- Lifson J.D., Sasaki D.T., Engleman E.G. Utility of formaldehyde fixation for flow cytometry and inactivation of the AIDS associated retrovirus. J. Immunol. Methods. 1986;86(1):143–9. DOI: https://doi.org/10.1016/0022-1759(86)90278-4
- Lal B., Edison L.J., Chused T.M. Fixation and long-term storage of human lymphocytes for surface marker analysis by flow cytometry. Cytometry. 1988;9(3):213–9. DOI: https://doi.org/10.1002/cyto.990090305
- Agrati C., Volpi I., Martini F., et al. Rapid and biologically safe procedures for the evaluation of antigen-specific T сell response to microbial pathogens that may be used in the BSL-3 and BSL-4 environment. Appl. Biosafety. 2008;13(1):27–30. DOI: https://doi.org/10.1177/153567600801300105
- Bоyum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood. Clin. Lab. Invest. Suppl. 1968;97:77–89.
Дополнительные файлы


