Комплексообразование L-гистидина с изомерами пиридинкарбоновой кислоты в водном буферном растворе при 298.15 К: калориметрическое изучение

Полный текст

ВВЕДЕНИЕ

В последние годы внимание исследователей привлекают взаимодействия между модельными соединениями белков и фармакологически активными веществами, которые лежат в основе процессов их переноса в организме человека, а также важны при разработке новых биотехнологий по производству инновационных лекарственных форм. В исследованиях, посвященных подобным взаимодействиям, чаще всего фиксируется изменение различных физико-химических свойств (вязкости, плотности, скорости ультразвука, др.) растворов, содержащих в основном алифатические аминокислоты при добавлении лекарственных средств, без рассмотрения возможности образования межмолекулярных комплексов [1–3]. Ощущается недостаток исследований по термодинамике взаимодействия аминокислот, содержащих полярные или заряженные боковые цепи, с биологически активными соединениями (лигандами) в условиях жидких сред с физиологическими значениями рН.

L-Гистидин, His (или 2-амино-3-(4-имидазолил)пропионовая кислота) – одна из 20 наиболее распространенных природных аминокислот в живых организмах. В отличие от алифатических аминокислот, не имеющих полярных боковых групп, молекула His содержит имидазольное кольцо в боковой цепи, которое потенциально способно взаимодействовать с лигандом, наряду с концевыми α-амино- и α-карбоксильной группами. Гистидин играет жизненно важную роль в профилактике различных заболеваний, таких как астма, цирроз печени, хронические заболевания почек, сердечно-сосудистые заболевания [4, 5]. Структура и химический состав гистидина служат основой для многих активных центров ферментов, ионных каналов и металлопротеинов [5].

Три изомерные молекулы пиколиновой (пиридин-2-карбоновой) кислоты, никотиновой (пиридин-3-карбоновой) кислоты и изоникотиновой (пиридин-4-карбоновой) кислоты представляют собой производные пиридина и имеют фармакологическое значение благодаря своим химическим и биологическим свойствам. Пиридинкарбоновые кислоты (PyCOOH) и их производные широко применяются в качестве витаминов группы В, химиотерапевтических средств для улучшения обмена веществ, антигиперлипидемических агентов для снижения уровня холестерина, противотуберкулезных препаратов и т. д. [6–8]. Имеющиеся в литературе результаты исследований взаимодействия производных пиридина с различными металлами и органическими соединениями [9–12] показали, что реакционная способность карбоксильной группы зависит от ее расположения в пиридиновом кольце. Ранее [13–15] нами изучена термодинамика взаимодействия изомеров пиридинмонокарбоновой кислоты с такими аминокислотами, как L-аспарагиновая кислота (Asp) и L-аспарагин (Asn) в водных растворах, и L-лизин (Lys) в буферном растворе, которые содержат в алкильной боковой цепи полярные группы кислотного, нейтрального и оснóвного характера, соответственно. Настоящая работа направлена на дальнейшее изучение факторов, определяющих образование комплексов между изомерами PyCOOH и гетероциклической аминокислотой L-гистидином в водном буферном растворе. Структуры исследуемых соединений приведены на рис. 1.

Рис. 1. Структура исследуемых соединений.

Метод калориметрии растворения использован для исследования взаимодействия реагентов при Т=298.15 К в фосфатном буфере, рН 7.4. В этих условиях наблюдается диссоциация α-COOH-группы и протонирование α-NH₂-группы молекулы L-гистидина, а имидазольное кольцо в его боковой цепи депротонировано [16], и, следовательно, His существует преимущественно в цвиттерионной форме (HL^±), при этом вероятность наличия катионной формы (H₂L⁺) составляет менее 5%. Как было показано ранее [14, 17], никотиновая (NA), пиколиновая (PA) и изоникотиновая (INA) кислоты в буферном растворе с рН 7.4 принимают форму анионов (L^–). Роль имидазольной группы в боковой цепи His будет проанализирована путем сравнения полученных результатов с данными по комплексообразованию Lys с теми же изомерами PyCOOH в буферном растворе [15]. Будет также рассмотрено изменение способности His к взаимодействию с PyCOOH при расположении карбоксильной группы в 2-, 3-, 4-положениях в пиридиновом кольце. Будут определены термодинамические характеристики комплексообразования (lgK_c, Δ_cG^o, Δ_cH^o, Δ_cS^o), которые позволят обсудить движущие силы, участвующие во взаимодействии His с исследуемыми молекулами пиридин-монокарбоновых кислот в буферном растворе.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

В работе использовали L-гистидин (Sigma-Aldrich, Japan, CAS63-91-2, >0.99), никотиновую кислоту (Sigma-Aldrich, Germany, CAS59-67-6, ≥0.98), пиколиновую кислоту (Aldrich, CAS98-98-6, ≥0.99) и изоникотиновую кислоту (Aldrich, CAS55-22-1, 0.99). Аминокислоту и изомеры пиридинкарбоновой кислоты сушили при 356 К в вакуумном шкафу в течение 48 ч непосредственно перед использованием. Исследования проводили в водном буферном растворе при рН 7.4, что приближает среду к условиям реальных биологических систем. Значения рН растворов фиксировали цифровым рН-метром Mettler Toledo, модель Five-Easy. Все растворы приготовлены весовым методом, используя весы Sartorius-ME215S (с точностью взвешивания 1×10^–5 г). Погрешность приготовления растворов нужной концентрации не превышала ±2×10^–4 моль кг^–1.

Энтальпии растворения кристаллического L-гистидина (фиксированная навеска) в буферных растворах, содержащих разную концентрацию пиридинкарбоновой кислоты, измерены на калориметре с изотермической оболочкой и емкостью реакционного стакана 60 см³ при температуре 298.15±0.01 К. Схема экспериментальной установки и описание термометрической процедуры приведены в [18, 19]. Данные калибровки калориметра и расчет погрешности измерений представлены в дополнительных материалах к статье [20]. Относительная стандартная погрешность в измерениях энтальпий растворения составляла не более 0.7%.

Калориметр был протестирован путем измерения энтальпии растворения хлористого калия (KCl) (Sigma-Aldrich, CAS7447-40-7, степень чистоты 99.5 мас. %) в H₂O при Т=298.15 К, рекомендованного в качестве стандарта в работах [21–23]. Наши значения (Δ_solH^o = 17.23±0.07 кДж моль^–1) при бесконечном разбавлении находятся в хорошем согласии с рекомендованными литературными данными (Δ_solH^o = 17.25±0.04 кДж моль^–1 [23] и (17.22±0,04) кДж моль^–1 [21, 22]). Кроме того, сравнение полученных нами ранее значений энтальпий растворения некоторых аминокислот в воде с данными других авторов показало, что наши значения Δ_solH^o =14.25±0.06 кДж моль^–1 для глицина [24], Δ_solH^o = –3.22±0.02 кДж моль^–1 для L-пролина [20] и Δ_solH^o =14.30±0.08 кДж моль^–1 для L-гистидина [25] при бесконечном разбавлении в воде согласуются с литературными значениями (14.23±0.02 кДж моль^–1) [26], (–3.25±0.03 кДж моль^–1) [27] и (14.32±0.06 кДж моль^–1) [27] соответственно, что дополнительно подтверждает достоверность результатов, полученных нами на данном калориметре.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Экспериментальные значения энтальпии растворения гистидина в буферных растворах, содержащих изоникотиновую и пиколиновую кислоты переменной концентрации, представлены в табл. 1; там же для сравнения приведены данные для никотиновой кислоты, полученные нами ранее [25]. Как видно из табл. 1, эндотермичность процесса растворения аминокислоты уменьшается с ростом концентрации пиридинмонокарбоновой кислоты в буферном растворе.

Таблица 1. Энтальпии растворения L-гистидина (His) в водных буферных растворах пиридинкарбоновых кислот (NA, INA, PA) при 298.15 К

^а m_His=0.0064 моль кг^–1.

На основании экспериментальных значений энтальпии растворения His в буфере, Δ_solH_m(s), и в буферном растворе с добавками лиганда, ∆_solH_m(s+L), (где L – PyCOOH) определены энтальпии переноса, ∆_trH, аминокислоты из буфера в буферный раствор лиганда по соотношению:

${\Delta }_{\text{tr}}H={\Delta }_{\text{sol}}{H}_{\text{m}}\left(\text{s}+\text{L}\right)-{\Delta }_{\text{sol}}{H}_{\text{m}}\left(\text{s}\right).$ (1)

Полученное значение разности энтальпий (∆_trH) можно рассматривать как энтальпию, пропорциональную энтальпии комплексообразования His с изомерами PyCOOH. Об образовании комплекса His с NA, PA, INA можно судить по зависимости значений ∆_trH от концентрации пиридинкарбоновой кислоты (PA, INA). Как видно из рис. 2, концентрационные зависимости энтальпий переноса ∆_trH=f(m_L) носят нелинейный характер. Для сравнения на рис. 2 также представлены результаты, полученные для системы (His + NA + буфер) в предыдущей работе [25]. Для исследованных систем энтальпии переноса снижаются с увеличением концентрации пиридинкарбоновой кислоты до достижения практически постоянных значений. Такое поведение возникает в результате связывания лигандов (NA, PA, INA) гистидином и позволяет предположить существование в исследуемых системах взаимодействий, приводящих к образованию комплекса.

Рис. 2. Зависимости энтальпий переноса L-гистидина (His) из буфера в буферный раствор изомеров пиридинкарбоновой кислоты (1 – INA, 2 – NA, 3 – PA) от концентрации PyCOOH при Т = 298.15 К. Моляльность аминокислоты m_His=0.0064 моль кг^–1.

Полученные калориметрические данные (Δ_solH_m, ∆_trH) были обработаны с помощью компьютерной программы “HEAT” [28], в которой поиск неизвестных параметров (lgK_c, ∆H_c⁰) сводится к численной минимизации функционала F по искомым параметрам:

$F=\sum _{i=1}^n{w}_{\iota }{\left(\Delta H_i^{\exp }-\Delta H_i^{theor}\right)}^2,$ (2)

где ∆H_i – тепловой эффект i-й реакции, n – число опытов, w_i – весовые множители, которые рассчитываются как w_i=А/(δ∆H_i)² (где А – коэффициент, выбираемый из условия ∑w_i=n, т. е. сумма весов равна числу опытов; δ∆H_i – абсолютная погрешность измерения ∆H_i). Поскольку кислотно-основные равновесия, в которых участвуют реагенты в растворах, могут вносить определенный вклад в значения искомой величины (lgK_с и ∆_сH^o), то тепловые эффекты и константы равновесия реагентов [17, 29–33] дополнительно вводились в вычислительную программу при расчете термодинамических параметров комплексообразования.

Расчет равновесного состава для исследуемых систем с учетом различных стехиометрических схем взаимодействия показал наилучшее соответствие условию минимизации соотношения (2) в случае образования комплекса состава His/2L, где L = NA, INA, PA. Процесс комплексообразования между цвиттерионом His (HX^±) и анионной формой лиганда (A^–) можно представить схемой:

$\begin{array}{c}{\text{HX}}^{\pm }+2{\text{A}}^{-}={\text{HX}}^{\pm }\cdot 2{\text{A}}^{-}\\ K_{\text{c}}=[{\text{HX}}^{\pm }\cdot 2{\text{A}}^{-}]/\left[{\text{ HX}}^{\pm }\right]\cdot {\left[A^{-}\right]}^2.\end{array}$ (3)

Энергия Гиббса и энтропия комплексообразования вычислены с помощью термодинамических соотношений:

${\Delta }_{\text{c}}{G}^o=-RT\text{ln}{K}_{\text{c}},$ (4)

${\Delta }_{\text{c}}{G}^o={\Delta }_{\text{c}}{H}^o T{\Delta }_{\text{c}}{S}^o.$ (5)

В табл. 2 представлены термодинамические параметры (lgK_c, ∆_cG^o, ∆_cH^o, T∆_cS^o), которые получены при стандартных условиях (p = 1.01×10⁵ Па, T = 298.15 K) и относятся к процессу взаимодействия реагентов, взятых предполагаемо в стандартном состоянии, то есть обладающих свойствами как в бесконечно разбавленном растворе. Учитывая низкие моляльные концентрации использованных в экспериментах реагентов, а также их органическую природу, указанные термодинамические параметры можно рассматривать как соответствующие таковым для стандартного состояния. Данные в табл. 2 свидетельствуют о том, что в буферном растворе (рН 7.4) гетероциклическая аминокислота His образует с изомерами пиридинкарбоновой кислоты молекулярные комплексы состава 1:2, имеющие константы связывания средней силы.

Таблица 2. Термодинамические характеристики комплексообразования L-гистидина (His) с пиколиновой (PA), никотиновой (NA) и изоникотиновой (INA) кислотами в водном буферном растворе, рН 7.4, Т = 298.15 К

*Данные взяты из [25].

Анализ полученных результатов показывает, что значения Δ_cG^o отрицательны для всех систем. Значения lgK_c образуемых комплексов His/2PyCOOH повышаются в ряду изомеров PA→NA→INA. Аналогичная последовательность наблюдается и для полученных значений TΔ_cS^o (тенденция к увеличению) и Δ_cG^o (тенденция к снижению). Более стабильный комплекс His/2INA образуется при нахождении карбоксильной группы (COO^–) в 4-положении в пиридиновом кольце, а ее смещение в 3- и 2- места приводит к понижению способности NA и PA изомеров образовывать комплексы с His. Следует отметить, что при растворении пиридинкарбоновых кислот в буфере (рН 7.4) образующиеся в процессе депротонирования анионы (PyCOO^–) при 2- и 4- расположении (COO^–) группы в пиридиновом кольце стабилизируются путем делокализации отрицательного заряда по сопряженной системе, включающей гетероатом (N), в отличие от 3-пиридинкарбоновой кислоты, в которой COO^– группа не сопряжена с гетероатомом [9]. Взаимодействие между His и изомерами NA, PA, INA происходит через перекрывание их гидратных сфер и сопровождается дегидратацией исходных веществ. Очевидно, что расположение отрицательно заряженной карбоксильной группы ближе к атому азота с неподеленной парой электронов приводит к изменению гидратных состояний, а также кислотных свойств указанных изомеров PyCOOH, что приводит к изменению реактивности веществ.

Значения энтальпии ∆_сH^o и энтропии Δ_cS^o включают вклады: от процессов образования комплексов между реагентами вследствие нековалентных взаимодействий, от дегидратации растворенных веществ при их взаимодействии, от гидратации образуемых комплексов и реорганизации растворителя. Преобладание тех или иных процессов обусловливают отрицательные или положительные значения энтальпии и энтропии комплексообразования [34, 35]. Молекулы исследуемых соединений His, NA, PA, INA содержат зарядные центры (COO^–/NH₃⁺, COO^–), гидрофильные (>C=O, >N, -NH) и гидрофобные группы. В образовании комплекса могут участвовать такие взаимодействия, как силы Ван-дер-Ваальса, водородные связи, электростатические и гидрофобные взаимодействия. В буферных растворах (pH 7.4) отрицательно заряженная карбоксильная группа COO^– в молекулах изомеров PyCOOH участвует в электростатических взаимодействиях с концевыми зарядными (COO^–, NH₃⁺) группами цвиттерионной формы His. Полярные группы основной цепи, а также два атома азота в имидазольном кольце боковой цепи гистидина и полярные (C=O, N_pyr) группы пиридинкарбоновых кислот могут участвовать в образовании водородных связей, а имеющиеся неполярные углеводородные группы в их молекулах – в гидрофобных и ван-дер-ваальсовых взаимодействиях. Кроме того, исследуемые реагенты His, NA, PA, INA содержат имидазольное и пиридиновые кольца, которые могут взаимодействовать посредством π-стэкинга. Полученные большие отрицательные значения Δ_cH^o и положительные значения Δ_cS^o свидетельствуют о том, что основной вклад в стабилизацию комплексов His/2PyCOOH в растворах с pH 7.4 вносят электростатические силы и водородные связи наряду с существующими гидрофобными и, возможно, стэкинг взаимодействиями [34].

Показано, что экзотермический эффект взаимодействия исследуемой аминокислоты с изомерами пиридинкарбоновой кислоты преобладает над эндотермическим эффектом их дегидратации. Выявлено влияние положения карбоксильной группы в пиридиновом кольце изомеров PyCOOH на значения Δ_cH^o. Наблюдается снижение экзотермичности процесса комплексообразования His с PyCOOH в последовательности: PA > INA > NA, симбатной уменьшению константы диссоциации K_а,1 СООН-группы (увеличению рK_а,1) указанных изомеров пиридинкарбоновой кислоты. По-видимому, это происходит за счет преобладания положительного вклада, обусловленного дегидратацией растворенных веществ и гидрофобными взаимодействиями [34].

Энтальпийный вклад благоприятно влияет на образование комплексов His с пиридинмонокарбоновыми кислотами. Величина энтальпии Δ_cH^o определяется несколькими эффектами, среди которых разрыв водородных связей между молекулами воды при растворении реагента (реорганизация растворителя), дегидратация исходных молекул при взаимодействии и гидратация образуемого комплекса. Первые два эффекта дают эндотермические вклады, а третий – экзотермический вклад в величину Δ_cH^o. Необходимо отметить, что гидратное состояние растворенных веществ оказывает влияние на способность к связыванию аминокислоты с изомерами PyCOOH. Представляло интерес сравнить энтальпии сольватации изомеров PyCOOH в водном растворе (при отсутствии данных для буферного раствора). На основе использования имеющихся литературных данных по энтальпиям растворения (∆_solH_m^∞) никотиновой, пиколиновой и изоникотиновой кислот в водных растворах [36–38] и энтальпиям сублимации (∆_subH_m^o) [39] определены энтальпии их сольватации при 298.15 К по соотношению:

${\Delta }_{\text{solv}}{H_{\text{m}}}^{\infty }={\Delta }_{\text{sol}}{H_{\text{m}}}^{\infty }-{\Delta }_{\text{sub}}{H_{\text{m}}}^{\text{o}}.$ (6)

Полученные значения молярной энтальпии сольватации при бесконечном разбавлении (∆_solvH_m^∞) для PA, NA, INA в воде отрицательны (табл. 3) и становятся менее экзотермичными в ряду: INA > NA > PA. В той же последовательности уменьшается константа (lgK_c) образования комплексов His/2PyCOOH (табл. 2).

Таблица 3. Значения стандартной молярной энтальпии сублимации (∆_subH_m^o), молярной энтальпии растворения (∆_solH_m^∞) и молярной энтальпии сольватации (∆_solvH_m^∞) при бесконечном разбавлении в водном растворе пиколиновой (PA), никотиновой (NA) и изоникотиновой (INA) кислот при Т = 298.15 К

Очевидно, несмотря на то что на образование комплекса His с PA затраты на энергию дегидратации меньше, чем с двумя другими изомерами, и сам процесс является более энтальпийно выгодным, однако энтропийный вклад и конфигурационная упаковка комплекса являются, по-видимому, неблагоприятными факторами, которые приводят к наименьшей устойчивости His/2PA-комплекса. Более того, молекула пиколиновой кислоты имеет три наиболее стабильных конформера (один с внутримолекулярной водородной связью и два без водородной связи), никотиновая кислота может существовать в двух конформациях, различающихся ориентацией карбоксильной группы, и только один стабильный конформер описан для изоникотиновой кислоты [40]. По-видимому, все эти факторы определяют различную способность указанных выше изомеров PyCOOH к образованию комплексов с His.

Полученные положительные значения Δ_cS^o обычно расценивают как свидетельство наличия гидрофобных взаимодействий, существования различных конфигураций комплекса и дегидратации растворенных веществ в процессе комплексообразования [34, 41]. Как видно из табл. 2, значения TΔ_cS^o возрастают в ряду: PA < NA < INA. Следовательно, энтропия комплексообразования становится более положительной при “перемещении” карбоксильной группы из 2- (PА) в 3- (NА) и 4- (INA) положения относительно атома азота пиридинового кольца, что связано, вероятно, с ослаблением стерических препятствий и эффектом релаксации в объем молекул воды из гидратных оболочек реагентов. Полученные результаты свидетельствуют о повышении вклада энтропийного фактора в стабилизацию образуемых комплексов His/2PyCOOH в указанной последовательности.

Сравнение результатов по комплексообразованию L-гистидина и L-лизина [15] с изомерами PyCOOH показало, что устойчивость образующихся комплексов аминокислота/PyCOOH зависит от строения боковых радикалов молекул аминокислот и их ионного состояния в буферном растворе. Лизин (Lys), вследствие наличия ионогенной аминогруппы в боковой цепи, обладает более выраженными оснóвными свойствами, чем His, у которого имидазольная группа является также оснóвной благодаря резонансной делокализации заряда при протонировании в водных растворах. Отметим, что в буферном растворе, рН 7.4, Lys существует преимущественно в катионной форме (H₂L⁺), а вероятность наличия цвиттерионной формы (HL^±) составляет менее 4% [15].

Установлено образование в буферном растворе молекулярных комплексов His и Lys с изомерами (NA, INA, PA) со стехиометрией 1:2 и 1:1 соответственно, что сопровождается отрицательными изменениями энтальпии и положительными значениями энтропии. Тенденции изменения термодинамических параметров (lgК_с, Δ_cH^o, TΔ_cS^o) сохраняются при образовании комплексов His и Lys в ряду изомеров пиридинкарбоновых кислот. Вместе с тем, величина констант связывания реагентов больше для гистидина, чем для лизина: lgK_c(His) > lgK_c(Lys). Катионная форма лизина образует менее устойчивые комплексы с анионной формой изомеров PyCOOH, чем цвиттерионая форма His. Экзотермичность процесса образования комплексов Lys/PyCOOH значительно уменьшается [15] по сравнению с комплексами His/2PyCOOH. При специфическом связывании большую роль играет комплементарность при взаимодействии активных групп аминокислот и пиридинкарбоновых кислот. По-видимому, в буферном растворе более выражено структурное соответствие между изомерами PyCOOH и гетероциклической молекулой His, чем лизина, молекула которого имеет линейную боковую цепь (NH₂-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-). Это подтверждается и более положительными изменениями энтропии в случае образования комплексов Lys/L, чем His/2L (где L – NA, PA, INA). Показано, что молекулярные комплексы His с NA, INA и PA стабилизированы преимущественно энтальпийным вкладом, а молекулярные комплексы Lys с NA и INA – энтропийным вкладом в свободную энергию Гиббса комплексообразования. Стабильность комплекса Lys с PA определяется балансом между энтальпийной и энтропийной составляющими энергии Гиббса [15]. Полученные результаты подтверждают доминирование электростатических взаимодействий и образование водородных связей среди других типов взаимодействий (гидрофобных, ван-дер-ваальсовых, π-стэкинга) при связывании указанных аминокислот с изомерами пиридинкарбоновой кислоты в комплекс в условиях буферного раствора, рН 7.4.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Методом калориметрии при 298.15 К определены энтальпии растворения гетероциклической аминокислоты L-гистидина в водных буферных растворах (рН 7.4), содержащих структурные 2-, 3- и 4-изомеры пиридинкарбоновой кислоты (PyCOOH) при 298,15 К; рассчитаны термодинамические функции (lgK_c, ∆_cG^o, ∆_cH^o, T∆_cS^o) процесса комплексообразования между реагентами. Установлено образование в буферном растворе комплексов His с изомерами (NA, INA, PA) средней силы со стехиометрией 1:2. Показано влияние структурной изомерии пиридинкарбоновой кислоты на стабильность образуемых комплексов с гистидином; значения констант стабильности (lgК_с) повышаются в ряду изомеров PyCOOH: PA < NA < INA. Энтропия комплексообразования становится более благоприятной (более положительной) при “смещении” карбоксильной группы из орто- (PА) в мета- (NА) и пара- (INA) положения относительно атома азота пиридинового кольца. Установлено, что экзотермический эффект взаимодействия His с изомерами PyCOOH преобладает над эндотермическим эффектом их дегидратации в буферном растворе. Молекулярные комплексы His с NA, INA и PA стабилизированы преимущественно энтальпийным вкладом в энергию Гиббса комплексообразования. Основными движущими силами процесса образования комплексов His/2PyCOOH являются электростатические взаимодействия и образование водородных связей между цвиттерионами L-гистидина и анионными формами изомеров NA, PA, INA в условиях фосфатного буферного раствора, рН 7.4.

Об авторах

Е. Ю. Тюнина

Автор, ответственный за переписку.
Email: tey@isc-ras.ru
Россия, Иваново, 153045

И. Н. Межевой

Email: tey@isc-ras.ru
Россия, Иваново, 153045

Список литературы

Дополнительные файлы

Доп. файлы

Действие

1. JATS XML

Скачать

2. Рис. 1. Структура исследуемых соединений.

Скачать (65KB)

Метаданные

3. Рис. 2. Зависимости энтальпий переноса L-гистидина (His) из буфера в буферный раствор изомеров пиридинкарбоновой кислоты (1 – INA, 2 – NA, 3 – PA) от концентрации PyCOOH при Т = 298.15 К. Моляльность аминокислоты mHis=0.0064 моль кг–1.

Скачать (72KB)

Метаданные