Исследование параметров дифференцировки мезенхимных стромальных клеток у здоровых доноров и больных апластической анемией


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель исследования. Оценить способность к дифференцировке мезенхимных стромальных клеток (МСК) костного мозга (КМ) доноров и больных апластической анемией (АА) в адипогенном и остеогенном направлениях.
Материалы и методы. Из клеток КМ доноров и больных АА выращивали культуры МСК и индуцировали дифференцировку мезенхимных клеток при добавлении соответствующих реагентов. Морфологические изменения МСК изучали методом световой микроскопии. Относительный уровень экспрессии генов маркеров дифференцировок в культурах МСК до и после индукции дифференцировок анализировали с помощью метода обратной транскрипции - полимеразной цепной реакции.
Результаты. Показано, что по морфологическим характеристикам культуры МСК больных АА до и после индукции дифференцировок не отличаются от культур доноров. Однако при оценке относительного уровня экспрессии генов маркеров дифференцировок выявлены, во-первых, различия экспрессии у доноров-мужчин и женщин; во-вторых, изменения в МСК до и после индукции дифференцировок у больных АА по сравнению с донорами.
Заключение. Для выявления функциональных отличий предшественников стромального микроокружения и понимания патогенеза заболевания необходимы дальнейшие исследования.

Об авторах

Дарья Анатольевна Свинарева

ГУ Гематологический научный центр РАМН

Email: svinareva@yandex.ru
лаборатория физиологии кроветворения, н. с; ГУ Гематологический научный центр РАМН

Татьяна Владимировна Петрова

ГУ Гематологический научный центр РАМН

Email: petrozik@gmail.com
лаборатория физиологии кроветворения, аспирант; ГУ Гематологический научный центр РАМН

Ирина Николаевна Шипунова (Нифонтова)

ГУ Гематологический научный центр РАМН

Email: iranifontova@yandex.ru
лаборатория физиологии кроветворения, н. с; ГУ Гематологический научный центр РАМН

Кира Сергеевна Момотюк

ГУ Гематологический научный центр РАМН

Email: kira@blood.ru
зав. лабораторией крионоконсервирования костного мозга и биологии стволовых клеток, с. н. с, к. м. н; ГУ Гематологический научный центр РАМН

Елена Алексеевна Михайлова

ГУ Гематологический научный центр РАМН

Email: mea@blood.ru
отд. химиотерапии гемобластозов и депрессий кроветворения, в. н. с; ГУ Гематологический научный центр РАМН

Нина Иосифовна Дризе

ГУ Гематологический научный центр РАМН

Email: ndrize@yandex.ru
зав. лабораторией физиологии кроветворения; ГУ Гематологический научный центр РАМН

D A Svinareva

T V Petrova

I N Shipunova (Nifontova)

K S Momotyuk

E A Mikhailova

N I Drize

Список литературы

  1. Caplan A. I. The mesengenic process. Clin. Plast. Surg. 1994; 21 (3): 429-435.
  2. Horwitz E. M., Le Blanc K., Dominici M. et al. Clarification of the nomenclature for MSC: the International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy 2005; 7 (5): 393-395.
  3. Jorgensen C., Gordeladze J., Noel D. Tissue engineering through autologous mesenchymal stem cells. Curr. Opin. Biotechnol. 2004; 15 (5): 406-410.
  4. Barry F. P., Murphy J. M. Mesenchymal stem cells: clinical applications and biological characterization. Int. J. Biochem. Cell Biol. 2004; 36 (4): 568-584.
  5. Caplan A. I. Osteogenesis imperfecta, rehabilitation medicine, fundamental research and mesenchymal stem cells. Connect. Tissue Res. 1995; 31 (4): S9-S14.
  6. Horwitz E. M., Prockop D. J., Fitzpatrick L. A. et al. Transplantability and therapeutic effects of bone marrow-derived mesenchymal cells in children with osteogenesis imperfecta. Nat. Med. 1999; 5 (3): 309-313.
  7. Deans R. J., Moseley A. B. Mesenchymal stem cells: biology and potential clinical uses. Exp. Hematol. 2000; 28 (8): 875-884.
  8. Vercelli A., Mereuta O. M., Garbossa D. et al. Human mesenchymal stem cell transplantation extends survival, improves motor performance and decreases neuroinflammation in mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Neurobiol. Dis. 2008; 31 (3): 395-405.
  9. Flores-Figueroa E., Montesinos J. J., Flores-Guzman P. et al. Functional analysis of myelodysplastic syndromes-derived mesenchymal stem cells. Leukemia Res. 2008; 32 (9): 1407-1416.
  10. Zhang Y. Z., Zhao D. D., Han X. P. et al. In vitro study of biological characteristics of mesenchymal stem cells in patients with low-risk myelodysplastic syndrome. Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi 2008; 16 (4): 813-818.
  11. Hirano N., Butler M. O., Guinan E. C. et al. Presence of anti-kinectin and anti-PMS1 antibodies in Japanese aplastic anaemia patients. Br. J. Haematol. 2005; 128 (2): 221-223.
  12. Takamatsu H., Feng X., Chuhjo T. et al. Specific antibodies to moesin, a membrane-cytoskeleton linker protein, are frequently detected in patients with acquired aplastic anemia. Blood 2007; 109 (6): 2514-2520.
  13. Hirano N., Butler M. O., Bergwelt-Baildon M. S. et al. Autoantibodies frequently detected in patients with aplastic anemia. Blood 2003; 102 (13): 4567-4575.
  14. Wang Y., Hu X., Guo C. et al. Polarization of natural killer T cells towards an NKT2 subpopulation occurs after stimulation with alpha-galactosylceramide and rhG-CSF in aplastic anemia. Acta Haematol. 2008; 119 (3): 178-186.
  15. Solomou E. E., Rezvani K., Mielke S. et al. Deficient CD4+ CD25+ FOXP3+ T regulatory cells in acquired aplastic anemia. Blood 2007; 110 (5): 1603-1606.
  16. Gu Y., Hu X., Liu C. et al. Interleukin (IL)-17 promotes macrophages to produce IL-8, IL-6 and tumour necrosis factor-alpha in aplastic anaemia. Br. J. Haematol. 2008; 142 (1): 109-114.
  17. Hotta T., Kato T., Maeda H. et al. Functional changes in marrow stromal cells in aplastic anaemia. Acta Haematol. 1985; 74 (2): 65-69.
  18. Juneja H. S., Gardner F. H. Functionally abnormal marrow stromal cells in aplastic anemia. Exp. Hematol. 1985; 13 (3): 194-199.
  19. Marsh J. C., Chang J., Testa N. G. et al. In vitro assessment of marrow 'stem cell' and stromal cell function in aplastic anaemia. Br. J. Haematol. 1991; 78 (2): 258-267.
  20. Chomczynski P., Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction. Analyt. Biochem. 1987; 162 (1): 156-159.
  21. Nissen C., Wodnar-Filipowicz A., Slanicka-Krieger M. S. et al. Persistent growth impairment of bone marrow stroma after antilymphocyte globulin treatment for severe aplastic anaemia and its association with relapse. Eur. J. Haematol. 1995; 55 (4): 255-261.
  22. Scopes J., Ismail M., Marks K. J. et al. Correction of stromal cell defect after bone marrow transplantation in aplastic anaemia. Br. J. Haematol. 2001; 115 (3): 642-652.
  23. Vidal-Puig A., Bjorbaek C. Molecular genetics of non insulin dependent diabetes mellitus. Med. Clin. (Barc.) 1997; 109 (3): 107-114.
  24. Чертков И. Л., Гуревич О. А. Стволовая кроветворная клетка и ее микроокружение. М.: Медицина; 1984.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© ООО "Консилиум Медикум", 2009

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
 
 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».