Модель экспериментальной бронхиальной астмы, индуцированной у мышей аллергенным экстрактом из клещей домашней пыли Dematophagoides pteronyssinus

Цель работы. разработать экспериментальную модель бронхиальной астмы на мышах, используя экстракт клещей домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus (Der p). Материалы и методы. Мышей BALB/c иммунизировали внутрибрюшинно в различных дозах (по белку) лиофили-зированного экстракта Der p три раза с трехнедельным интервалом в смеси с Al(OH) 3. Через 8 нед после последней иммунизации мышам вводили разрешающую дозу (челленджировали) Der p в течение 5 дней подряд путем ин-траназальных аппликаций (ИНА) или аэрозольно. Все мыши были разделены на 5 групп: группа 1 - иммунизация 50 мкг/мышь Der p (по белку) в смеси с 2 мг/мышь Al(OH) 3 и челленджирование Der p путем ИНА; группа 2 - иммунизация так же, как и в группе 1, и челленджирование Der p аэрозольно; группа 3 - иммунизация 100 мкг/мышь Der p (по белку) в смеси с 2 мг/мышь Al(OH) 3 и челленджирование Der p путем ИНА; группа 4 - иммунизация так же, как и в группе 3, и челленджирование Der p аэрозольно; группа 5 (отрицательный контроль) - иммунизация и челленджирование (ИНА) фосфатным солевым буфером. Спустя 24 ч после последнего челленджирования во всех группах измеряли гиперреактивность бронхов (ГРБ) в ответ на различные концентрации метахолина с помощью использования плетизмографии всего тела. Через 48 ч после последнего челленджирования во всех группах осуществляли забор крови для оценки лейкоцитарного состава, выполняли бронхо-альвеолярный лаваж (БАЛ) для выявления клеток воспаления и проводили гистологическое исследование легких. Г истопатологические изменения в легких (аллергическое воспаление) были оценены при помощи использования полуколичественной балльной системы. Анти-Der p IgE, IgG1 и IgG2a в индивидуальных сыворотках определяли твердофазным ИФА через 7 дней после последней иммунизации и через 48 ч после челленджирования. Результаты. Уровни анти-Der p IgE в группах 1-4 как до, так и после челленджирования были существенно выше, чем в группе 5 (отрицательный контроль). Наивысший уровень анти-Der p IgE наблюдался в группе 2 до и после челленджирования. Уровни анти-Der p антител изотипов IgG1 IgG2a в группах 1-4 на всех сроках наблюдения были выше, чем в группе 5 (отрицательный контроль). Б то же время максимальные уровни ан-ти-Der p IgG1 и IgG2a как после иммунизации, так и после челленджирования наблюдались в группе 3. Мыши в группах 1 и 3 (челленджирование путем ИНА) продемонстрировали максимальную ГРБ в ответ на метахолин. Анализ клеточного состава БАЛ показал выраженное увеличение числа эозинофилов в группе 3 (иммунизация 100 мкг/мышь Der p + челленджирование путем ИНА) в сравнении с другими группами. Не выявлено значительных различий в показателях лейкоцитарного состава периферической крови между экспериментальными группами. Гистологическая картина общего аллергического воспаления и перибронхиальная/периваскулярная инфильтрация воспалительными клетками (согласно балльной системе) была наиболее выражена в группе 3 в сравнении с другими группами. Заключение. Иммунизация (сенсибилизация) мышей Der p в дозе 100 мкг/мышь с Al(OH) 3 и челленджирование Der p интраназальными аппликациями является приемлемым подходом для моделирования аллергической астмы на мышах.

аллергенный экстракт из клещей домашней пыли Der p, экспериментальная мышиная модель бронхиальной астмы