Влияние вилдаглиптина на уровень экспрессии Р-гликопротеина в условиях нормы и аллоксан-индуцированного сахарного диабета 2 типа

Актуальность. Вилдаглиптин является одним из препаратов выбора в лечении сахарного диабета (СД) 2 типа. В ходе литературного анализа не были обнаружены данные других авторов о влиянии вилдаглиптина на уровень экспрессии белка-транспортера Р-гликопротеина (P-gp, ABCB1 белка).

Цель. В исследовании in vivo изучить влияние вилдаглиптина на уровень экспрессии Р-gp на фоне нормы и экспериментального аллоксан-индуцированного СД 2 типа.

Материалы и методы. Моделирование СД 2 типа выполняли однократной внутривенной инъекцией свежеприготовленного раствора аллоксана моногидрата в цитратном буфере (pH = 4,0) в дозе 80 мг/кг массы. Содержание глюкозы (ммоль/л) определяли глюкозооксидазным методом при помощи наборов «Human» (Германия), инсулин (мкЕД/мл) ― радиоиммунным методом с использованием набора «Immunotech» (Чехия). В качестве экспресс-метода определения уровня глюкозы в цельной крови использовали электрохимический глюкометр OneTouch UltraEasy (США). Уровень экспрессии Р-gp в тканях (тощая кишка, печень, почки, кора больших полушарий головного мозга) кроликов изучали непрямым гистохимическим методом. Гистологический материал после предварительной обработки заключали в парафин. Перед реакцией иммунного окрашивания производили демаскировку антигенов. Затем инкубировали срезы с первичными антителами к P-gp (ABCB1 antibody ― middle region, 0,1 мл (Aviva Systems Biology ARP51326-P050, США)). Для иммунного окрашивания использовали полимерную систему детекции с пероксидазной меткой (Leica Microsystems, Германия). Ядра клеток докрашивали гематоксилином. Микропрепарат фотографировали с помощью цифровой камеры Canon Power Shot G5 при увеличении в 400 раз. Анализ изображения выполняли с помощью программы для анализа и обработки цифровых изображений «ImageJ» и специально разработанного для количественного иммуногистохимического анализа плагина «IHC Profiler». Сравнивали результаты, полученные у интактных животных, на фоне аллоксан-индуцированного сахарного диабета, при введении вилдаглиптина здоровым животным и на фоне смоделированного диабета.

Результаты. После 14-дневного ведения интактным кроликам, а также на 5-й день отмены вилдаглиптина (5 мг/кг массы) не наблюдалось статистически значимых изменений экспрессии P-gp в указанных тканях, а также статистически значимых изменений уровней базальных и постпрандиальных инсулина и глюкозы крови. После 14-дневной терапии вилдаглиптином (5 мг/кг массы) аллоксан-индуцированного СД 2 типа наблюдалось статистически значимое восстановление сниженной на фоне патологии экспрессии P-gp в тканях тощей кишки, печени и почек до значений интактных кроликов, сопровождающееся статистически значимой нормализацией уровней инсулина и глюкозы крови. На 5-й день отмены препарата вновь имело место статистически значимое ингибирование экспрессии P-gp в тканях тощей кишки, печени и почек, а также статистически значимое снижение постпрандиальных инсулина и глюкозы крови. Статистически значимых изменений экспрессии ABCB1 белка в гематоэнцефалическом барьере в изучаемые сроки не наблюдалось.

Заключение. Введение вилдаглиптина (5 мг/кг массы) кроликам с аллоксан-индуцированным СД 2 типа способствует восстановлению экспрессии P-gp в тканях тощей кишки, печени и почек, сниженной на фоне патологии, в то время как введение препарата здоровым животным не оказывает влияния на экспрессию анализируемого белка.