Получение, очистка и общая характеристика пептидного антикоагулянта из сапропеля

Цель. Получить экстракт сапропеля, содержащий пептидный антикоагулянт, провести его очистку от соэкстрагируемых соединений, подтвердить химическую природу очищенного антикоагулянта, дать характеристику аминокислотного состава и оценить его воздействие на свёртывающую активность крови в пробирочных тестах и влияние на показатели гемостаза лабораторных животных. Методы. Источником антикоагулянта послужил сапропель озера Тараскуль (Тюменская область). Получали и очищали эффектор по разработанной нами методике, включающей экстракцию, осаждение гуминовых кислот высаливанием и удаление фульвокислот и низкомолекулярных фракций гуминовых кислот ионообменной хроматографией. Оценку чистоты и гомогенности полученного антикоагулянта проводили с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии и электрофореза в полиакриламидном геле. Определяли химическую природу эффектора, проводя его кислотный гидролиз и идентифицируя фенилтиогидантоиновые производные аминокислот с помощью обращённо-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Специфическую антикоагулянтную активность оценивали по влиянию эффектора на тромбин-зависимое превращение фибриногена в фибрин и тромбиновое время плазмы крови после введения лабораторным животным. Результаты. Из сапропеля выделен и очищен пептидный антикоагулянт, активность которого реализуется на этапе взаимодействия тромбина с фибриногеном. Эффектор удлиняет время образования фибринового сгустка как в модельной тестовой системе, так и при внутривенном введении крысам. Антикоагулянтный эффект пептида при введении животным выявляется в течение не менее 60 мин, при этом выраженное токсическое действие не проявляется. Вывод. Выделенный эффектор может послужить основой для разработки лекарственных средств с антикоагулянтным действием.

лекарственные средства природного происхождения, анализ, стандартизация, идентификация, антикоагулянт, сапропель