Влияние тепловой инактивации сывороток крови хорьков на выявление противокоронавирусных IgG-антител в иммуноферментном анализе

Обоснование. Определение уровней сывороточных антител к новому коронавирусу SARS-CoV-2 — необходимый инструмент оценки гуморального иммунитета для лиц, перенесших COVID-19 или привитых специфическими вакцинами, а также иммунного ответа на вирусные антигены у лабораторных животных. Сыворотки крови инфицированных людей и животных считаются потенциально заразным материалом, а тепловая инактивация образцов при 56 °C в течение 1 ч — возможным методом снижения риска инфицирования персонала при проведении серологических исследований. Однако эта процедура может повлиять на показатели специфичных к вирусу антител класса IgG и IgM, что затруднит интерпретацию полученных результатов.

Цель работы — оценить влияние тепловой инактивации сывороток крови хорьков на связывание IgG-антител с новым коронавирусом SARS-CoV-2.

Материалы и методы. Авторы настоящей статьи анализировали три варианта сыворотки крови хорьков, неиммунных и иммунных к SARS-CoV-2: 1) нативные сыворотки крови; 2) сыворотки крови, прогретые при 56 °C в течение 1 ч; 3) сыворотки крови, обработанные рецепторразрушающим ферментом. Образцы изучали в иммуноферментном анализе с подложкой рекомбинантного белка RBD — рецепторсвязывающего домена S-белка SARS-CoV-2 и последующим определением уровней специфичных антител до и после обработок.

Результаты. Показано, что тепловая инактивация сывороток крови неиммунных к SARS-CoV-2 хорьков может приводить к появлению ложноположительных результатов, тогда как обработка рецепторразрушающим ферментом способна нивелировать эффект неспецифического связывания IgG-антител с RBD-доменом S-белка SARS-CoV-2.

Заключение. Структурная перестройка специфичных к SARS-CoV-2 IgG-антител и образование иммуноглобулиновых комплексов при тепловой инактивации сывороток крови может влиять на авидность комплекса антиген – антитело и приводить к появлению ложноположительных результатов при постановке иммуноферментного анализа. Один из возможных методов по снижению риска их появления — обработка сывороток крови рецептор-разрушающим ферментом, нивелирующая эффект тепловой инактивации.