РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ ПОЛУЧЕНИЯ И СТАНДАРТИЗАЦИИ НАСТОЙКИ НА ОСНОВЕ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ

Полный текст

Введение На сегодняшний день урология является динамично развивающейся областью медицины, связано это с ростом заболеваемости мочеполовой системы. Наиболее распространенными являются воспалительные процессы как бактериального, так и не бактериального происхождения [12]. Фитопрепараты могут стать препаратами выбора в данном случае, так как фармацевтический рынок урологических препаратов России минимален и остается актуальным вопрос расширения ассортимента лекарственных средств на основе лекарственного растительного сырья [2, 3, 5, 7]. Перед нами стояла задача подбора максимально простого и эффективного способа получения экстрактов из лекарственных растений для настойки, в составе которых преобладают флавоноиды, в частности авикулярин [4, 6, 8]. Предложено следующее соотношение лекарственного растительного сырья: трава горца птичьего(Polygonum aviculare L.s.l.) - 30%, листья березы повислой Betula pendula Roth) - 25%, трава хвоща полевого (Equisetum arvense L.) - 25%, трава зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L.) - 20%. Объектами исследования служили листья березы повислой, трава хвоща полевого, трава горца почечуйного, трава зверобоя продырявленного производства АО «Красногорлексредства», Россия, г. Красногорск, 2020 г. Экстракция проводилась с помощью испарителя ротационного «ИР-1 ЛТ». Электронные спектры измерялись на УФ-спектрофотометре UNICO 2800, тонкослойная хроматография проводилась с использованием пластин «Сорбфил-ПТСХ-П-А-УФ», подвижная фаза смесь растворителей этилацетат: муравьиная кислота: вода в соотношении (40:4:6), УФ-кабинет 254/365 НТЦ «Ленхром». Цель исследования - разработка способа получения настойки на основе лекарственного растительного сырья с максимальным выходом действующих веществ и последующей стандартизацией. Методика На первом этапе исследований была подобрана оптимальная концентрация экстрагента, в качестве экстрагента использовали спирт этиловый, соотношение сырья и экстрагента - 1:5, время экстракции - 15 минут на водяной бане и последующие 15 минут с использованием ультразвуковой бани. Максимальный выход действующих веществ наблюдался при использованием спирта этилового с концентрацией 70% (табл. 1), максимум поглощения находится в области спектра при длине волны 410±2 нм (рис.1) [1, 9, 11]. Таблица 1. Влияние концентрации экстрагента на полноту извлечения суммы флавоноидов в настойке Концентрация спирта, % Соотношение «сырьё : экстрагент» Время экстракции Содержание суммы флавоноидов в пересчете на авикулярин, % 70 1:5 15 мин. водяная баня, 15 мин. воздействие ультразвука 0,43±0,01 40 1:5 15 мин. водяная баня, 15 мин. воздействие ультразвука 0,21±0,01 15 1:5 15 мин. водяная баня, 15 мин. воздействие ультразвука 0,11±0,01 С целью увеличения выхода действующих веществ при получении настойки на основе лекарственного растительного сырья был предложен метод с применением режима вакуумного кипения с последующим воздействием ультразвуковой бани [10, 11, 13]. Выявлены оптимальными условия экстрагирования: экстрагент 70% этиловый спирт, соотношение «сырье - экстрагент» (1:5), экстракция в течение 15 мин в режиме вакуумного кипения, при температуре 90°С и 15 мин с использованием ультразвуковой бани при температуре 40°С, мощности 60 Вт и частоте 40кГц (табл. 2). Рис. 1. Электронные спектры настойки с AlCl3 70% (1), 40% (2), 15% (3) Таблица 2. Влияние режима вакуумной экстракции на полноту извлечения суммы флавоноидов в настойке Концентрация спирта, % Соотношение «сырьё : экстрагент» Время экстракции, tº C Содержание суммы флавоноидов в пересчете на авикулярин, % 70 1:5 15 мин. вакуумная экстракция, 15 мин. воздействия ультразвука, 60º 0,31±0,01 10 мин. вакуумная экстракция, 15 мин. воздействия ультразвука, 80º 0,41±0,01 15 мин. вакуумная экстракция, 15 мин. воздействия ультразвука, 90º 0,46±0,01 Методика количественного определения суммы флавоноидов: точную навеску настойки (2 г) помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводили объем раствора до метки 96% спиртом и тщательно перемешивали (раствор А). 2,0 мл раствора А помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляли 2 мл алюминия хлорида раствора 2% и доводили объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивали (раствор Б). Через 20 минут измеряли оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при аналитической длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм (рис. 2). В качестве раствора сравнения используют раствор, полученный следующим образом: 2 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора спиртом 96% до метки. С целью комплексной оценки химического состава настойки, было проведено хроматографическое исследование. После подбора для анализа лекарственной формы оптимальных условий, было выявлено, что наиболее подходящей системой растворителей для диференциации химически активных соединений является система этилацетат - муравьиная кислота - вода (40:4:6). Детекция химических соединений была проведена в видимой области спектра и в УФ-свете (254 нм и 365 нм). При просмотре пластин «Сорбфил ПТСХ-ПА-УФ» или «Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ» с полученными хроматограммами в видимой области спектра и в УФ-свете (254 нм и 365 нм), просматриваются доминирующие пятна следующей окраски: темно-зеленое пятно с величиной Rf около 0,4 (рутин), пятно, имеющее красно-розовую окраску, с величиной Rf около 0,6 (гиперицин), пятно, окрашенное в зеленый цвет, с величиной Rf около 0,5 (хлорогеновая кислота), пятно, окрашеное в красно-оранжевый цвет, с величиной Rf около 0,98 (хлорофиллы), оранжевое пятно с величиной Rf около 0,8 (кверцетин) (рис. 3). Рис. 2. Хроматограмма водно-спиртовых извлечений из травы хвоща, травы горца, листьев березы, травы зверобоя, в системе растворителей: этилацетат: муравьиная кислота : вода (40:4:6): А - детекция в УФ-свете при длине волны 365 нм; Б - детекция в УФ-свете при длине волны 254 нм; В - детекция в видимой области спектра. 1 - водно-спиртовое извлечение сырья хвоща полевого; 2 - водно-спиртовое извлечение сырья горца птичьего; 3 - водно-спиртовое извлечение сырья березы повислой; 4 - водно-спиртовое извлечение сырья зверобоя продырявленного, 5 - многокомпонентная настойка; 6 -хлорофилл, 7 - кверцетин, 8 - гиперицин, 9 - хлорогеновая кислота, 10 - рутин Результаты исследования и их обсуждение Содержание суммы флавоноидов вели в пересчете на доминирующее вещество авикулярин в настойке в % вычисляли по формуле: , где Е - оптическая плотность испытуемого раствора; m - масса навески препарата, г; 330 - удельный показатель поглощения () комплекса авикулярина с алюминием хлоридом при длине волны 410 нм. Таблица 3. Метрологические характеристики методики количественного определения суммы флавоноидов в настойке F S P, % t (P,f) DX E, % 10 0,45 0,00968 95 2,23 ±0,0216 ±4,81 Заключение По итогам исследования предложена методика получения настойки с содержанием суммы флавоноидов в пересчете на авикулярин 0,46±0,01%, что составляет выход флавоноидов по отношению к их содержанию в исходном сырье 84,3±0,04%. Разработана методика количественного анализа настойки на основе лекарственного растительного сырья березы повислой, хвоща полевого, горца почечуйного и зверобоя продырявленного. Подтверждено наличие основных действующих веществ группы флавоноиды методом тонкослойной хроматографии.

Об авторах

Анна Анатольевна Шмыгарева

Оренбургский государственный медицинский университет

Email: email@example.com
доктор фармацевтических наук, заведующая кафедрой управления и экономики фармации, фармацевтической технологии и фармакогнозии ФГБОУ ВО «ОрГМУ» Министерства здравоохранения Российской Федерации Россия, 460014, Оренбург, Советская ул., 6

Владимир Александрович Куркин

Самарский государственный медицинский университет

Email: email@example.com
доктор фармацевтических наук, заведующий кафедрой фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии ФГБОУ ВО «СамГМУ» Министерства здравоохранения Российской Федерации Россия, 443099, Самара, Чапаевская ул., 89

Майя Викторовна Лабковская

Оренбургский государственный медицинский университет

Email: email@example.com
кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры управления и экономики фармации, фармацевтической технологии и фармакогнозии ФГБОУ ВО «ОрГМУ» Министерства здравоохранения Российской Федерации Россия, 460014, Оренбург, Советская ул., 6

Ольга Алексеевна Дорохина

Оренбургский государственный медицинский университет

Email: email@example.com
кандидат биологических наук, доцент кафедры управления и экономики фармации, фармацевтической технологии и фармакогнозии ФГБОУ ВО «ОрГМУ» Министерства здравоохранения Российской Федерации Россия, 460014, Оренбург, Советская ул., 6

Анна Александровна Кочукова

Оренбургский государственный медицинский университет

Email: email@example.com
кандидат биологических наук, доцент кафедры управления и экономики фармации, фармацевтической технологии и фармакогнозии ФГБОУ ВО «ОрГМУ» Министерства здравоохранения Российской Федерации Россия, 460014, Оренбург, Советская ул., 6

Список литературы

Дополнительные файлы