МИКРОВАРИАНТ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АМИЛОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ АЛЬФА-АМИЛАЗЫ СЛЮНЫ


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Известно, что по концентрации альфа-амилазы в слюне можно определить ее каталитическую активность, снижение которой происходит при различных патологических процессах в полости рта. Подавляющее количество способов определения каталитической активности ферментов предполагают использование большого объема реагентов и образцов, что затрудняет исследование слюны в больших группах. Цель исследования - оценить возможности применения микроварианта реакции для определения активности альфа-амилазы слюны, а также проанализировать зависимость активности фермента от его концентрации. Материал и методы. Слюну получали у 15 людей с интактным пародонтом и зубным рядом, без соматической патологии. Для исследований in vitro готовили растворы альфа-амилазы с концентрацией фермента 10; 5; 2,5; 1; 0,5 и 0,25 мг/мл ex tempore. Для экономии образцов и реагентов объем участников реакции пропорционально уменьшили. Дальнейшую процедуру анализа осуществляли согласно инструкции производителя набора реагентов «АМИЛАЗА-ВИТАЛ» для определения активности альфа-амилазы. Статистический анализ результатов проводили с помощью t-критерия Стьюдента в программе Statistica 7.0. Результаты. Показана сопоставимость результатов определения активности альфа-амилазы с помощью классического и микропланшетного вариантов реакции. При увеличении концентрации альфа-амилазы от 0 до 2,5 мг/мл наблюдается прямо пропорциональное возрастание активности фермента. В случае увеличения концентрации альфа-амилазы выше 2,5 мг/мл показано снижение ее активности, что возможно связано с выпадением части фермента в осадок. Активность фермента в слюне практически здоровых лиц при использовании микроварианта реакции составила - 528,6±2,4 Е/л. Заключение. Таким образом, использование микроварианта реакции определения активности альфа-амилазы может быть оправдано для большого числа обследуемых. Показана линейная зависимость активности фермента от его концентрации в пределах 0-2,5 мг/мл.

Об авторах

А. П Годовалов

ФГБОУ ВО «Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера» Минздрава России

614000, Пермь, Россия

Михаил Владимирович Яковлев

ФГБОУ ВО «Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера» Минздрава России

Email: mikhailyak@mail.ru
студент стоматологического акультета ФГБОУ ВО «Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера» Минздрава России 614000, Пермь, Россия

И. И Задорина

ФГБОУ ВО «Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера» Минздрава России

614000, Пермь, Россия

Список литературы

  1. Feng Y., Li Q., Chen J., Yi P., Xu X., Fan Y., et al. Salivary protease spectrum biomarkers of oral cancer. Int J. Oral Sci. 2019;11(1): 7.
  2. Zhang Q., Chen B., Zhu D., Yan F. Biomarker levels in gingival crevicular fluid of subjects with different periodontal conditions: A cross-sectional study. Arch. Oral Biol. 2016; 72: 92-8.
  3. Максутова В.О., Цветков В.О., Шпирная И.А., Ибрагимов Р.И. Определение активности амилолитических ферментов по гидролизу субстрата, иммобилизованного в полиакриламидном геле. Доклады Башкирского университета, 2017; 295): 736-40.
  4. Садовничий В.А., Ветров Д.П., Вишневский В.В. и др. Математический метод определения каталитической активности ферментов в сложных биологических растворах. Интеллектуальные системы. Теория и приложения (ранее: Интеллектуальные системы по 2014, № 2, ISSN 2075-9460). 2013; 17(1-4. - С.): 517-22.
  5. Яковлев М.В., Батог К.А. Изучение антибиопленочной активности альфа-амилазы. Материалы XVII научной конференции молодых ученых и специалистов с международным участием «Молодые ученые - медицине». Владикавказ; 2018: 339-41.
  6. Мельник К.Н., Баишева Г.М., Гильмиярова Ф.Н., Аллатова Т.А. Саливадиагностика как метод определения иммунологической адаптации к учебному стрессу в условиях различного питьевого поведения. Клиническая лабораторная диагностика. 2018; 63(6): 353-7.
  7. Биохимия ротовой жидкости в норме и при патологии. Учебно-методическое пособие. Под ред. Шестопалова А.В. /ФГБОУ ВО РНИМУ имени Н.И. Пирогова Минздрава России. М.: ИКАР; 2017.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© ООО "Эко-Вектор", 2019


 


Согласие на обработку персональных данных

 

Используя сайт https://journals.rcsi.science, я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных») даю согласие на обработку персональных данных на этом сайте (текст Согласия) и на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика» (текст Согласия).