Опосредованное miR-155-5p повышение содержания р53 в клетках меланомы, индуцируемое дакарбазином

Обоснование. Процесс старения клеток представляет собой реакцию на стресс, возникающую, например, в результате воздействия химиотерапевтическими препаратами, которая вызывает остановку клеточного цикла в фазе G₀/G₁ и индуцирует многочисленные изменения, в том числе продукцию секреторного фенотипа, ассоциированного со старением. Известны индукторы таких изменений, одним из которых является онкосупрессор p53, однако механизмы реализации данных процессов остаются не до конца изученными.

Цель. Определить механизмы реализации неапоптотических функций белка p53 при воздействии цитостатическим агентом дакарбазином на клетки меланомы.

Материалы и методы. Исследование проводили на клеточных линиях меланомы кожи BRO и SK-MEL-2. Клетки меланомы инкубировали с цитостатическим препаратом дакарбазином, после чего выполняли иммуноцитохимическое исследование для определения доли G₀-положительных клеток и уровня экспрессии белка опухолевого супрессора p53. Для выявления механизмов регуляции активности p53 были выполнены биоинформатический анализ и оценка уровня экспрессии экзосомальной микроРНК miR-155-5p, геном-мишенью которой является p53.

Результаты. Цитостатический препарат дакарбазин увеличивает долю клеток, находящихся в G₀-фазе клеточного цикла. Онко-микроРНК miR-155-5p экспрессировалась в экзосомах двух исследуемых клеточных линий меланомы BRO и SK-MEL-2, что подтверждает её наличие в экзосомах, высвобождаемых опухолевыми клетками. Изменения уровня экспрессии p53 коррелируют с изменениями экспрессии miR-155-5p: не было выявлено изменений уровня miR-155-5p и её гена-мишени р53 в BRO, а повышение доли G₀-положительных клеток может быть связано с активацией других механизмов ареста клеточного цикла в фазе G₀/G₁. Напротив, в SK-MEL-2 повышение уровня р53 происходило на фоне снижения экспрессии miR-155-5p, что косвенно подтверждает функционирование р53 в качестве гена-мишени данной микроРНК.

Заключение. Выявлено разнородное влияние цитостатического препарата дакарбазина на биологическое поведение клеток меланомы. В клетках SK-MEL-2 дакарбазин ингибирует miR-155-5p, что активирует онкосупрессор p53, чего не наблюдалось в линии BRO.