Определение IL-10 и IL-17 в супернатантах клеточных культур при экспансии γδ Т-лимфоцитов, выделенных из крови больных реактивными эритемами

Реактивные эритемы – группа дерматозов со сложным иммуногенезом, в котором, как и в развитии многих аутовоспалительных заболеваний, принимают участие субпопуляции γδ Т-клеток. Несмотря на важную роль IL-17 в функционировании иммунной системы, его избыточный синтез, в том числе γδ Т-клетками, способен индуцировать аутовоспаление. При этом IL-10, напротив, играет ключевую роль в контроле врожденных иммунных реакций, подавляя функцию моноцитов/макрофагов. Цель – определение содержания IL-10 и IL-17 в супернатантах клеточных культур при экспансии γδ Т-лимфоцитов, выделенных из крови больных реактивными эритемами. Мононуклеарные клетки периферической крови (МНПК) выделяли от 8 пациентов с реактивными эритемами и двух здоровых доноров в возрасте от 23 до 70 лет и культивировали для селективного размножения γδ T-лимфоцитов в среде RPMI-1640 с добавлением 10%-ной аутологичной сыворотки (первые 3 суток – с 3 мкМ золедроната, далее 4 суток с IL-2 (100 МЕ/мл) и IL-15 (10 нг/мл)). Клеточный состав культуры анализировали методом проточной цитометрии. Спонтанную и индуцированную секрецию цитокинов определяли методом твердофазного ИФА с использованием наборов Human IL-17 ELISA Kit (RK00397, ABclonal Biotechnology Co., Китай) и «Интерлейкин-10-ИФА-БЕСТ» (АО «Вектор-Бест», Россия) согласно инструкциям производителей. Обработку данных осуществляли с построением калибровочных кривых путем применения онлайн-калькулятора ELISA calculation sheet (Hycult Biotech, США). У пациентов с реактивными эритемами в процессе культивирования с золедронатом, IL-2 и IL-15 было получено к 7-му дню культивирования до 62,8% МНПК с экспрессией γδ TCR. В группе обследованных больных выявлены высокие уровни индуцированной продукции IL-17, что может указывать на наличие аутоиммунного компонента в патогенезе заболевания или отражать тяжесть течения. Показано, что высокие значения спонтанной и индуцированной продукции IL-10 ассоциируются с длительной ремиссией. Полученные данные указывают на вероятную прогностическую значимость этих аналитов как биомаркеров. Однако необходимы дальнейшие исследования в этом направлении, в том числе при других нозологических формах.