Оценка профилактического эффекта нокдауна клеточных генов NXF1, PRPS1 и NAA10 при гриппозной инфекции на модели in vitro

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Введение. Грипп – острое респираторное вирусное инфекционное заболевание, индуцируемое одноименными вирусами. Существующие на сегодняшний день профилактические и терапевтические подходы имеют важное противоэпидемическое значение, однако имеется ряд проблем, таких как быстрое возникновение резистентных штаммов, отсутствие формирования перекрестного иммунитета и эффективность вакцин. Одним из подходов в создании противогриппозных средств является использование механизма РНК-интерференции и малых интерферирующих РНК (миРНК), комплементарных к матричной РНК мишени вирусных и клеточных генов.

Цель – оценка профилактического противогриппозного эффекта миРНК, направленных к клеточным генам NXF1, PRPS1 и NAA10, на модели in vitro.

Материалы и методы. Исследовали антигенные варианты вируса гриппа типа А: A/California/7/09 (H1N1), А/WSN/33 (H1N1) и A/Brisbane/59/07 (H1N1); клеточные культуры A549 и MDCK. Исследование выполняли посредством молекулярно-генетических (трансфекции, выделение нуклеиновых кислот, полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в реальном времени) и вирусологических методов (заражение клеточных культур, титрование по визуальному цитопатическому действию, оценка вирусного титра посредством метода Рамакришнана).

Результаты. Показано, что миРНК, таргетированные к клеточным генам NXF1, PRPS1 и NAA10 при профилактическом применении в клеточной культуре в концентрации 0,25 мкг на лунку, при инфицировании штаммами вируса гриппа A/California/7/09 (H1N1), А/WSN/33 (H1N1) и A/Brisbane/59/07 (H1N1) при множественности инфекции 0,01, снижают вирусную репликацию до уровня 220 ТЦД50 на 1 мл клеточной среды, тогда как в контрольных необработанных клетках вирусный урожай составил ~106 ТЦД50 на 1 мл среды.

Выводы. Снижение экспрессии указанных генов NXF1, PRPS1 и NAA10 приводит к нарушению жизненного цикла и активности вирусов гриппа. Подобный подход может быть потенциально исследован и использован для близко- и дальнородственных представителей иных семейств вирусов.

Об авторах

Евгений Алексеевич Пашков

ФГБУН «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» Минздрава России; ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Автор, ответственный за переписку.
Email: pashckov.j@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-5682-4581

канд. мед. наук, ассистент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет); младший научный сотрудник лаборатории прикладной вирусологии ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова

Россия, 105064, г. Москва; 119991, г. Москва

Дмитрий Андреевич Шиквин

ФГБОУ ВО «МИРЭА – Российский технологический университет»

Email: carrypool@gmail.com
ORCID iD: 0009-0005-9874-2081

студент кафедры биотехнологии и промышленной фармации института тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова

Россия, 119454, г. Москва

Георгий Алексеевич Пашков

ФГБУН «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» Минздрава России; ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Email: georgp2004@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-0392-9969

студент клинического института детского здоровья им. Н.Ф. Филатова

Россия, 105064, г. Москва; 119991, г. Москва

Фирая Галиевна Нагиева

ФГБУН «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» Минздрава России

Email: fgn42@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-8204-4899

д-р мед. наук, доцент, заведующая лабораторией гибридных клеточных культур

Россия, 105064, г. Москва

Екатерина Александровна Богданова

ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Email: bogdekaterin@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-5620-1843

канд. мед. наук, доцент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии

Россия, 119991, г. Москва

Анатолий Сергеевич Быков

ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Email: drbykov@bk.ru
ORCID iD: 0000-0002-8099-6201

д-р мед. наук, профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии

Россия, 119991, г. Москва

Евгений Петрович Пашков

ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Email: 9153183256@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-4963-5053

д-р мед. наук, профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии

Россия, 119991, г. Москва

Оксана Анатольевна Свитич

ФГБУН «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» Минздрава России; ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Email: svitichoa@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-1757-8389

чл.-корр. РАН, д-р мед. наук, директор ФГБНУ НИИВС им И.И. Мечникова, заведующая лабораторией молекулярной иммунологии ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова, профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)

Россия, 105064, г. Москва; 119991, г. Москва

Виталий Васильевич Зверев

ФГБУН «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» Минздрава России; ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Email: vitalyzverev@outlook.com
ORCID iD: 0000-0002-0017-1892

академик РАН, д-р биол. наук, научный руководитель ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова, профессор, заведующий кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)

Россия, 105064, г. Москва; 119991, г. Москва

Список литературы

  1. Purcell R., Giles M.L., Crawford N.W., Buttery J. Systematic review of avian influenza virus infection and outcomes during pregnancy. Emerg. Infect. Dis. 2025; 31(1): 50–6. https://doi.org/10.3201/eid3101.241343
  2. Bin N.R., Prescott S.L., Horio N., Wang Y., Chiu I.M., Liberles S.D. An airway-to-brain sensory pathway mediates influenza-induced sickness. Nature. 2023; 615(7953): 660–7. https://doi.org/10.1038/s41586-023-05796-0
  3. Kenney A.D., Aron S.L., Gilbert C., Kumar N., Chen P., Eddy A., et al. Influenza virus replication in cardiomyocytes drives heart dysfunction and fibrosis. Sci. Adv. 2022; 8(19): eabm5371. https://doi.org/10.1126/sciadv.abm5371
  4. Conrad A., Valour F., Vanhems P. Burden of influenza in the elderly: a narrative review. Curr. Opin. Infect. Dis. 2023; 36(4): 296–302. https://doi.org/10.1097/QCO.0000000000000931
  5. Watanabe T. Renal complications of seasonal and pandemic influenza A virus infections. Eur. J. Pediatr. 2013; 172(1): 15–22. https://doi.org/10.1007/s00431-012-1854-x
  6. van de Veerdonk F.L., Wauters J., Verweij P.E. Invasive aspergillus tracheobronchitis emerging as a highly lethal complication of severe influenza. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2020; 202(5): 646–8. https://doi.org/10.1164/rccm.202005-1883ED
  7. Feys S., Cardinali-Benigni M., Lauwers H.M., Jacobs C., Stevaert A., Gonçalves S.M., et al. Profiling bacteria in the lungs of patients with severe influenza versus COVID-19 with or without aspergillosis. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2024; 210(10): 1230–42. https://doi.org/10.1164/rccm.202401-0145OC
  8. Białka S., Zieliński M., Latos M., Skurzyńska M., Żak M., Palaczyński P., et al. Severe bacterial superinfection of influenza pneumonia in immunocompetent young patients: case reports. J. Clin. Med. 2024; 13(19): 5665. https://doi.org/10.3390/jcm13195665
  9. Pleguezuelos O., James E., Fernandez A., Lopes V., Rosas L.A., Cervantes-Medina A., et al. Efficacy of FLU-v, a broad-spectrum influenza vaccine, in a randomized phase IIb human influenza challenge study. NPJ Vaccines. 2020; 5(1): 22. https://doi.org/10.1038/s41541-020-0174-9
  10. Isakova-Sivak I., Rudenko L. Next-generation influenza vaccines based on mRNA technology. Lancet Infect. Dis. 2025; 25(1): 2–3. https://doi.org/10.1016/S1473-3099(24)00562-0
  11. Hodgson D., Sánchez-Ovando S., Carolan L., Liu Y., Hadiprodjo A.J., Fox A., et al. Quantifying the impact of pre-vaccination titre and vaccination history on influenza vaccine immunogenicity. Vaccine. 2025; 44: 126579. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2024.126579
  12. Gaitonde D.Y., Moore F.C., Morgan M.K. Influenza: diagnosis and treatment. Am. Fam. Physician. 2019; 100(12): 751–8.
  13. Li Y., Huo S., Yin Z., Tian Z., Huang F., Liu P., et al. The current state of research on influenza antiviral drug development: drugs in clinical trial and licensed drugs. mBio. 2023; 14(5): e0127323. https://doi.org/10.1128/mbio.01273-23
  14. Wang J., Li Y. Current advances in antiviral RNA interference in mammals. FEBS J. 2024; 291(2): 208–16. https://doi.org/10.1111/febs.16728
  15. Traber G.M., Yu A.M. RNAi-based therapeutics and novel RNA bioengineering technologies. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2023; 384(1): 133–54. https://doi.org/10.1124/jpet.122.001234
  16. Qureshi A., Tantray V.G., Kirmani A.R., Ahangar A.G. A review on current status of antiviral siRNA. Rev. Med. Virol. 2018; 28(4): e1976. https://doi.org/10.1002/rmv.1976
  17. Chokwassanasakulkit T., Oti V.B., Idris A., McMillan N.A. SiRNAs as antiviral drugs – Current status, therapeutic potential and challenges. Antiviral. Res. 2024; 232: 106024. https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2024.106024
  18. Wang L., Dai X., Song H., Yuan P., Yang Z., Dong W., et al. Inhibition of porcine transmissible gastroenteritis virus infection in porcine kidney cells using short hairpin RNAs targeting the membrane gene. Virus Genes. 2017; 53(2): 226–32. https://doi.org/10.1007/s11262-016-1409-8
  19. Lambeth L.S., Zhao Y., Smith L.P., Kgosana L., Nair V. Targeting Marek’s disease virus by RNA interference delivered from a herpesvirus vaccine. Vaccine. 2009; 27(2): 298–306. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2008.10.023
  20. Chen W., Liu M., Jiao Y., Yan W., Wei X., Chen J., et al. Adenovirus-mediated RNA interference against foot-and-mouth disease virus infection both in vitro and in vivo. J. Virol. 2006; 80(7): 3559–66. https://doi.org/10.1128/JVI.80.7.3559-3566.2006
  21. Keene K.M., Foy B.D., Sanchez-Vargas I., Beaty B.J., Blair C.D., Olson K.E. RNA interference acts as a natural antiviral response to O’nyong-nyong virus (Alphavirus; Togaviridae) infection of Anopheles gambiae. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004; 101(49): 17240–5. https://doi.org/10.1073/pnas.0406983101
  22. Ahmed F., Kleffmann T., Husain M. Acetylation, methylation and allysine modification profile of viral and host proteins during influenza A virus infection. Viruses. 2021; 13(7): 1415. https://doi.org/10.3390/v13071415
  23. Izumi H. Conformational variability prediction of influenza virus hemagglutinins with amino acid mutations using supersecondary structure code. Methods. Mol. Biol. 2025; 2870: 63–78. https://doi.org/10.1007/978-1-0716-4213-9_5
  24. Lesch M., Luckner M., Meyer M., Weege F., Gravenstein I., Raftery M., et al. RNAi-based small molecule repositioning reveals clinically approved urea-based kinase inhibitors as broadly active antivirals. PLoS Pathog. 2019; 15(3): e1007601. https://doi.org/101371/journal.ppat.1007601
  25. Li X., Berg N.K., Mills T., Zhang K., Eltzschig H.K., Yuan X. Adenosine at the interphase of hypoxia and inflammation in lung injury. Front. Immunol. 2021; 11: 604944. https://doi.org/10.3389/fimmu.2020.604944
  26. Read E.K., Digard P. Individual influenza A virus mRNAs show differential dependence on cellular NXF1/TAP for their nuclear export. J. Gen. Virol. 2010; 91(Pt. 5): 1290–301. https://doi.org/10.1099/vir.0.018564-0
  27. Ramakrishnan M.A. Determination of 50% endpoint titer using a simple formula. World J. Virol. 2016; 5(2): 85–6. https://doi.org/10.5501/wjv.v5.i2.85
  28. Пашков Е.А., Самойликов Р.В., Пряников Г.А., Быков А.С., Пашков Е.П., Поддубиков А.В. и др. Иммуномодулирующий эффект комплексов миРНК in vitro при гриппозной инфекции. Российский иммунологический журнал. 2023; 26(4): 457–62. https://doi.org/10.46235/1028-7221-13984-IVI httpss://elibrary.ru/byxobk
  29. Estrin M.A., Hussein I.T.M., Puryear W.B., Kuan A.C., Artim S.C., Runstadler J.A. Host-directed combinatorial RNAi improves inhibition of diverse strains of influenza A virus in human respiratory epithelial cells. PLoS One. 2018; 13(5): e0197246. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0197246
  30. Файзулоев Е.Б. Изучение противовирусной активности антисмысловых РНК и рибозимов в отношении инфекции, вызываемой вирусом алеутской болезни норок: Автореф. диcс. ... канд. биол. наук. М.; 2002.
  31. Lee H.K., Loh T.P., Lee C.K., Tang J.W., Chiu L., Koay E.S. A universal influenza A and B duplex real-time RT-PCR assay. J. Med. Virol. 2012; 84(10): 1646–51. https://doi.org/10.1002/jmv.23375
  32. Bustin S.A., Benes V., Nolan T., Pfaffl M.W. Quantitative real-time RT-PCR – a perspective. J. Mol. Endocrinol. 2005; 34(3): 597–601. https://doi.org/10.1677/jme.1.01755
  33. Howard C.W., Zou G., Morrow S.A., Fridman S., Racosta J.M. Wilcoxon-Mann-Whitney odds ratio: A statistical measure for ordinal outcomes such as EDSS. Mult. Scler. Relat. Disord. 2022; 59: 103516. https://doi.org/10.1016/j.msard.2022.103516
  34. Ge Q., Filip L., Bai A., Nguyen T., Eisen H.N., Chen J. Inhibition of influenza virus production in virus-infected mice by RNA interference. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004; 101(23): 8676–81. https://doi.org/10.1073/pnas.0402486101
  35. Sui H.Y., Zhao G.Y., Huang J.D., Jin D.Y., Yuen K.Y., Zheng B.J. Small interfering RNA targeting M2 gene induces effective and long-term inhibition of influenza A virus replication. PLoS One. 2009; 4(5): 5671. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0005671
  36. Piasecka J., Lenartowicz E., Soszynska-Jozwiak M., Szutkowska B., Kierzek R., Kierzek E. RNA secondary structure motifs of the influenza A virus as targets for siRNA-mediated RNA interference. Mol. Ther. Nucleic. Acids. 2020; 19: 627–42. https://doi.org/10.1016/j/omtn.2019.12.018
  37. Zhou Y., Liu Y., Gupta S., Paramo M.I., Hou Y., Mao C., et al. A comprehensive SARS-CoV-2-human protein-protein interactome reveals COVID-19 pathobiology and potential host therapeutic targets. Nat. Biotechnol. 2023; 41(1): 128–39. https://doi.org/10.1038/s41587-022-01474-0
  38. Hu J., Zhang L., Liu X. Role of post-translational modifications in influenza A virus life cycle and host innate immune response. Front. Microbiol. 2020; 11: 517461. https://doi.org/10.3389/fmicb.2020.517461
  39. Zhang K., Cagatay T., Xie D., Angelos A.E., Cornelius S., Aksenova V., et al. Cellular NS1-BP protein interacts with the mRNA export receptor NXF1 to mediate nuclear export of influenza virus M mRNAs. J. Biol. Chem. 2024; 300(11): 107871. https://doi.org/10.1016/j.jbc.2024.107871
  40. Esparza M., Bhat P., Fontoura B.M. Viral-host interactions during splicing and nuclear export of influenza virus mRNAs. Curr. Opin. Virol. 2022; 55: 101254. https://doi.org/10.1016/j.coviro.2022.101254
  41. Dawson A.R., Wilson G.M., Coon J.J., Mehle A. Post-Translation Regulation of Influenza Virus Replication. Annu. Rev. Virol. 2020; 7(1): 167–87. https://doi.org/10.1146/annurev-virology-010320-070410
  42. Husain M. Influenza A virus and acetylation: the picture is becoming clearer. Viruses. 2024; 16(1): 131. https://doi.org/10.3390/v16010131
  43. Mei M., Cupic A., Miorin L., Ye C., Cagatay T., Zhang K., et al. Inhibition of mRNA nuclear export promotes SARS-CoV-2 pathogenesis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2024; 121(22): e2314166121. https://doi.org/10.1073/pnas.2314166121
  44. Zhang K., Xie Y., Muñoz-Moreno R., Wang J., Zhang L., Esparza M., et al. Structural basis for influenza virus NS1 protein block of mRNA nuclear export. Nat. Microbiol. 2019; 4(10): 1671–9. https://doi.org/10.1038/s41564-019-0482-x
  45. Wendt L., Brandt J., Bodmer B.S., Reiche S., Schmidt M.L., Traeger S., et al. The Ebola virus nucleoprotein recruits the nuclear RNA export factor NXF1 into inclusion bodies to facilitate viral protein expression. Cells. 2020; 9(1): 187. https://doi.org/10.3390/cells9010187
  46. Chen J., Umunnakwe C., Sun D.Q., Nikolaitchik O.A., Pathak V.K., Berkhout B., et al. Impact of nuclear export pathway on cytoplasmic HIV-1 RNA transport mechanism and distribution. mBio. 2020; 11(6): e01578–20. https://doi.org/10.1128/mBio.01578-20
  47. Guo J., Zhu Y., Ma X., Shang G., Liu B., Zhang K. Virus infection and mRNA nuclear export. Int. J. Mol. Sci. 2023; 24(16): 12593. https://doi.org/10.3390/ijms241612593
  48. Пак А.В., Пашков Е.А., Абрамова Н.Д., Поддубиков А.В., Нагиева Ф.Г., Богданова Е.А. и др. Действие противовирусных миРНК на выработку цитокинов in vitro. Тонкие химические технологии. 2022; 17(5): 384–93. httpss://doi.org/10.32362/2410-6593-2022-17-5-384-393 httpss://elibrary.ru/meflst
  49. Banerjee A., Mukherjee S., Maji B.K. Manipulation of genes could inhibit SARS-CoV-2 infection that causes COVID-19 pandemics. Exp. Biol. Med. (Maywood). 2021; 246(14): 1643–9. https://doi.org/10.1177/15353702211008106

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Изменение транскриптов генов NXF1, PRPS1 и NAA10 в динамике. На оси абсцисс представлены миРНК и их одноименные целевые клеточные гены; на оси ординат ‒ процент изменения уровня транскрипта. Данные критерия Пфаффля представлены в процентах. * ‒ р ≤ 0,05.

Скачать (123KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Противовирусный эффект миРНК, специфичных к клеточным генам NXF1, PRPS1 и NAA10. а ‒ A/California/7/09 (H1N1); б ‒ A/Brisbane/59/07 (H1N1); в ‒ A/WSN/1933 (H1N1). По оси абсцисс ‒ миРНК и их одноименные целевые клеточные гены; по оси ординат ‒ показатель вирусного титра lg ТЦД50/мл относительно вирусного и неспецифического контроля. * ‒ р < 0,05 относительно неспецифического контроля siL2.

Скачать (329KB)
Метаданные

© Пашков Е.А., Шиквин Д.А., Пашков Г.А., Нагиева Ф.Г., Богданова Е.А., Быков А.С., Пашков Е.П., Свитич О.А., Зверев В.В., 2025

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».