Адъювантное действие дисперсного фуллерена С60 на иммунный ответ против конструкций, имитирующих аминокислотные и нуклеотидные последовательности неструктурного белка NS5B вируса гепатита С

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Введение. Вакцина против гепатита С пока не разработана. Рекомбинантные белки и плазмиды, кодирующие белки вируса гепатита С (ВГС), – компоненты кандидатных вакцин – индуцируют слабый иммунный ответ и требуют использования адъювантов.

Цель работы – изучить адъювантную способность водного раствора фуллерена С60 при иммунизации мышей рекомбинантным белком NS5B (rNS5B) ВГС – РНК-зависимой РНК-полимеразой, а также плазмидой pcNS5B, экспрессирующей этот белок.

Материалы и методы. Водный раствор дисперсного фуллерена (dnC60) получен методом ультрафильтрации. Мышей C57BL/6 иммунизировали rNS5B подкожно, pcNS5B – внутримышечно в смеси с разными дозами dnC60 трёхкратно, затем оценивали гуморальный и клеточный ответ на ВГС.

Результаты. Показано, что иммунизация мышей rNS5B в смеси с dnC60 в дозах 2–50 мкг/мышь приводила к значительной индукции гуморального ответа: дозозависимый прирост титров антител IgG1 был в 7–20 раз выше. Усиления клеточного ответа к rNS5B при введении с dnC60 не наблюдалось: продукция IFN-γ лимфоцитами, стимулированными in vitro, не увеличивалась; антитела изотипа IgG2a – маркера Th1 звена иммунного ответа – не обнаруживались. Гуморальный ответ на ДНК-иммунизацию был слабым у мышей всех групп, получавших pcNS5B. Клеточный ответ при введении плазмиды в смеси с dnC60 подавлялся. Показана обратная зависимость индекса стимуляции пролиферации лимфоцитов в ответ на специфические стимуляторы in vitro от дозы dnC60, снижение количества клеток, синтезирующих IFN-γ, в реакции ELISpot, сокращение популяции CD8+-лимфоцитов.

Заключение. Дисперсный фуллерен dnC60 представляется весьма обещающим адъювантом для повышения иммуностимулирующей активности слабоиммуногенных белков, к которым относятся белки ВГС, включая поверхностные, важные для протективного ответа. Для повышения способности dnC60 усиливать клеточный иммунный ответ на компоненты кандидатной вакцины необходимы дальнейшие исследования.

Об авторах

Ольга Владимировна Масалова

ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России

Email: ol.mas@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-5571-5669
SPIN-код: 7210-0870

д-р биол. наук, ведущий научный сотр., зав. лаб.

Россия, 123098, Москва

Екатерина Ивановна Леснова

ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России

Email: wolf252006@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-2801-6843
SPIN-код: 9901-8607

научный сотр.

Россия, 123098, Москва

Сергей Михайлович Андреев

ФГБУ «Государственный научный центр «Институт иммунологии» ФМБА России

Email: sm.andreevj@nrcii.ru
ORCID iD: 0000-0001-8297-579X
SPIN-код: 2542-5260

канд. хим. наук, зав. лаб.

Россия, 115522, Москва

Надежда Николаевна Шершакова

ФГБУ «Государственный научный центр «Институт иммунологии» ФМБА России

Email: nn.shershakova@nrcii.ru
ORCID iD: 0000-0001-6444-6499
SPIN-код: 7555-5925

канд. биол. наук, зав. лаб.

Россия, 115522, Москва

Вячеслав Владимирович Козлов

ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России

Email: hyperslava@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-0502-4824
SPIN-код: 6821-2115

научный сотр.

Россия, 123098, Москва

Кристина Юрьевна Пермякова

ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России; ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии – МВА имени К.И. Скрябина» Министерства сельского хозяйства Российской Федерации

Email: kristusha164@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-3579-4416
SPIN-код: 6220-3425

мл. науч. сотр., ст. преподаватель кафедры иммунологии и биотехнологии

Россия, 123098, Москва; 109472, Москва

Наталья Андреевна Демидова

ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России

Email: ailande@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-1961-9789
SPIN-код: 8759-0277

научный сотр.

Россия, 123098, Москва

Владимир Треворович Валуев-Эллистон

ФГБУН «Институт молекулярной биологии имени В.А. Энгельгардта» Российской академии наук

Email: gansfaust@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-0365-570X
SPIN-код: 3492-4501

канд. биол. наук, научный сотр.

Россия, 119991, Москва

Евгений Александрович Турецкий

ФГБУ «Государственный научный центр «Институт иммунологии» ФМБА России; ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Email: ea.turetskiy@nrcii.ru
Scopus Author ID: 1006824

канд. фарм. наук, мл. науч. сотр.

Россия, 115522, Москва; 119991, Москва

Александр Владимирович Иванов

ФГБУН «Институт молекулярной биологии имени В.А. Энгельгардта» Российской академии наук

Email: aivanov@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-5659-9679
SPIN-код: 5776-5496

канд. хим. наук, ведущий научный сотрудник

Россия, 119991, Москва

Татьяна Николаевна Николаева

ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России

Email: tatyananik.55@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-6226-7251
SPIN-код: 6679-1727

д-р мед. наук, зав. лаб.

Россия, 123098, Москва

Муса Рахимович Хаитов

ФГБУ «Государственный научный центр «Институт иммунологии» ФМБА России; ФГАОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Минздрава России

Email: mr.khaitov@nrcii.ru
SPIN-код: 3199-9803

член-корр. РАН, д-р мед. наук, проф., директор

Россия, 115522, Москва; 117997, Москва

Александр Васильевич Пронин

ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России

Email: proninalexander@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-5266-9783
SPIN-код: 5736-5260

д-р биол. наук, проф., директор, зам. директора 

Россия, 123098, Москва

Алла Александровна Кущ

ФГБУ «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: vitallku@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-3396-5533
SPIN-код: 6964-1715

д-р биол. наук, проф., ведущий научный сотр.

Россия, 123098, Москва

Список литературы

  1. Dustin L.B. Innate and adaptive immune responses in chronic HCV infection. Curr. Drug Targets. 2017; 18(7): 826–43. https://doi.org/10.2174/1389450116666150825110532.
  2. Pawlotsky J.M. Hepatitis C virus: standard-of-care treatment. Adv. Pharmacol. 2013; 67: 169–215. https://doi.org/10.1016/B978-0-12-405880-4.00005-6
  3. Spearman C.W., Dusheiko G.M., Hellard M., Sonderup M. Hepatitis C. Lancet. 2019; 394(10207): 1451–66. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(19)32320-7
  4. Osuch S., Metzner K.J., Caraballo Cortes K. Reversal of T cell exhaustion in chronic HCV infection. Viruses. 2020; 12(8): 799. https://doi.org/10.3390/v12080799
  5. Telatin V., Nicoli F., Frasson C., Menegotto N., Barbaro F., Castelli E., et al. In chronic hepatitis C infection, myeloid-derived suppressor cell accumulation and T cell dysfunctions revert partially and late after successful direct-acting antiviral treatment. Front. Cell. Infect. Microbiol. 2019; 9: 190. https://doi.org/10.3389/fcimb.2019.00190
  6. Elmasry S., Wadhwa S., Bang B.R., Cook L., Chopra S., Kanel G., et al. Detection of occult hepatitis C virus infection in patients who achieved a sustained virologic response to direct-acting antiviral agents for recurrent infection after liver transplantation. Gastroenterology. 2017; 152(3): 550-53.e8. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2016.11.002
  7. Wang Y., Rao H., Chi X., Li B., Liu H., Wu L., et al. Detection of residual HCV-RNA in patients who have achieved sustained virological response is associated with persistent histological abnormality. EBioMedicine. 2019; 46: 227–35. https://doi.org/10.1016/j.ebiom.2019.07.043
  8. Holmes J.A., Yu M.L., Chung R.T. Hepatitis B reactivation during or after direct acting antiviral therapy – implication for susceptible individuals. Expert Opin. Drug Saf. 2017; 16(6): 651–72. https://doi.org/10.1080/14740338.2017.1325869
  9. Ghweil A.A., Helal M.M. Reactivation of herpesvirus in patients with hepatitis C treated with direct-acting antiviral agents. Infect. Drug Resist. 2019; 12: 759–62. https://doi.org/10.2147/IDR.S184598
  10. Verma R., Khanna P., Chawla S. Hepatitis C vaccine. Need of the hour. Hum. Vacc. Immunother. 2014; 10(7): 1927–9. https://doi.org/10.4161/hv.29033
  11. Bailey J.R., Barnes E., Cox A.L. Approaches, progress, and challenges to hepatitis C vaccine development. Gastroenterology. 2019; 156(2): 418–30. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2018.08.060
  12. Ploss A., Kapoor A. Animal models of hepatitis C virus infection. Cold Spring Harb. Perspect. Med. 2020; 10(5): a036970. https://doi.org/10.1101/cshperspect.a036970
  13. Ahlén G., Frelin L. Methods to evaluate novel hepatitis C virus vaccines. Methods Mol. Biol. 2016; 1403: 221–44. https://doi.org/10.1007/978-1-4939-3387-7_11
  14. Andrianov A.K., Fuerst T.R. Immunopotentiating and delivery systems for HCV vaccines. Viruses. 2021; 13(6): 981. https://doi.org/10.3390/v13060981.
  15. Sepulveda-Crespo D., Resino S., Martinez I. Innate immune response against hepatitis C virus: targets for vaccine adjuvants. Vaccines (Basel). 2020; 8(2): 313. https://doi.org/10.3390/vaccines8020313
  16. Gaur M., Misra C., Yadav A.B., Swaroop S., Maolmhuaidh F.O., Bechelany M., et al. Biomedical applications of carbon nanomaterials: fullerenes, quantum dots, nanotubes, nanofibers, and graphene. Materials (Basel). 2021; 14(20): 5978. https://doi.org/10.3390/ma14205978
  17. Barzegar A., Naghizadeh E., Zakariazadeh M., Azamat J. Molecular dynamics simulation study of the HIV-1 protease inhibit ion using fullerene and new fullerene derivatives of carbon nanostructures. Mini Rev. Med. Chem. 2017; 17(7): 633–47. https://doi.org/10.2174/ 1389557516666160609080157
  18. Hurmach V., Platonov M., Prylutska S., Klestova Z., Cherepanov V., Prylutskyy Y., et al. Anticoronavirus activity of water-soluble pristine C60 fullerenes: in vitro and in silico screenings. Adv. Exp. Med. Biol. 2021; 1352: 159–72. https://doi.org/10.1007/978-3-030-85109-5_10.
  19. Klimova R., Andreev S., Momotyuk E., Demidova N., Fedorova N., Chernoryzh Y., et al. Aqueous fullerene C60 solution suppresses herpes simplex virus and cytomegalovirus infections. Fuller. Nanotub. Carbon Nanostructures. 2019; 28(6): 487–99. https://doi.org/10.1080/1536383x.2019.1706495
  20. Reina G., Peng S., Jacquemin L., Andrade A.F., Bianco A. Hard nanomaterials in time of viral pandemics. ACS nano. 2020; 14(8): 9364–88. https://doi.org/10.1021/acsnano.0c04117
  21. Shershakova N., Baraboshkina E., Andreev S., Purgina D., Struchkova I., Kamyshnikov O., et al. Anti-inflammatory effect of fullerene C60 in a mice model of atopic dermatitis. J. Nanobiotechnology. 2016; 14: 8. https://doi.org/10.1186/s12951-016-0159-z
  22. Kuznietsova H., Dziubenko N., Hurmach V., Chereschuk I., Motuziuk O., Ogloblya O., et al. Water-soluble pristine C60 fullerenes inhibit liver fibrotic alteration and prevent liver cirrhosis in rats. Oxid. Med. Cell. Longev. 2020; 2020: 8061246. https://doi.org/10.1155/2020/8061246
  23. Liu J., Feng X., Chen Z., Yang X., Shen Z., Guo M., et al. The adjuvant effect of C60(OH)22 nanoparticles promoting both humoral and cellular immune responses to HCV recombinant proteins. Mater. Sci. Eng. C Mater. Biol. Appl. 2019; 97: 753–9. https://doi.org/10.1016/j.msec.2018.12.088
  24. Xu L., Liu Y., Chen Z., Li W., Liu Y., Wang L., et al. Morphologically virus-like fullerenol nanoparticles act as the dual-functional nanoadjuvant for HIV-1 vaccine. Adv. Mater. 2013; 25: 5928–36. https://doi.org/10.1002/adma.201300583
  25. Andreev S., Purgina D., Bashkatova E., Garshev A., Maerle A., Andreev I., et al. Study of fullerene aqueous dispersion prepared by novel dialysis method: simple way to fullerene aqueous solution. Fuller. Nanotub. Carbon Nanostructures. 2015; 23(9): 792–800. https://doi.org/10.1080/1536383x.2014.998758
  26. Shershakova N.N., Andreev S.M., Tomchuk A.A., Makarova E.A., Nikonova A.A., Turetskiy E.A., et al. Wound healing activity of aqueous dispersion of fullerene C60 produced by “green technology”. Nanomedicine. 2023; 47: 102619. https://doi.org/10.1016/j.nano.2022.102619
  27. Ivanov A.V., Korovina A.N., Tunitskaya V.L., Kostyuk D.A., Rechinsky V.O., Kukhanova M.K., et al. Development of the system ensuring a high-level expression of hepatitis C virus nonstructural NS5B and NS5A proteins. Protein Expr. Purif. 2006; 48(1): 14–23. https://doi.org/10.1016/j.pep.2006.02.011
  28. Himoudi N., Abraham J.D., Fournillier A., Lone Y.C., Joubert A., Op De Beeck A., et al. Comparative vaccine studies in HLA-A2.1-transgenic mice reveal a clustered organization of epitopes presented in hepatitis C virus natural infection. J. Virol. 2002; 76(24): 12735–46. https://doi.org/10.1128/jvi.76.24.12735-12746.2002
  29. Ikram A., Zaheer T., Awan F.M., Obaid A., Naz A., Hanif R., et al. Exploring NS3/4A, NS5A and NS5B proteins to design conserved subunit multi-epitope vaccine against HCV utilizing immunoinformatics approaches. Sci. Rep. 2018; 8(1): 16107. https://doi.org/10.1038/s41598-018-34254-5.
  30. Nitschke K., Barriga A., Schmidt J., Timm J., Viazov S., Kuntzen T., et al. HLA-B*27 subtype specificity determines targeting and viral evolution of a hepatitis C virus-specific CD8+ T cell epitope. J. Hepatol. 2014; 60(1): 22–9. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2013.08.009.
  31. Tan A.C., Eriksson E.M., Kedzierska K., Deliyannis G., Valkenburg S.A., Zeng W., et al. Polyfunctional CD8(+) T cells are associated with the vaccination-induced control of a novel recombinant influenza virus expressing an HCV epitope. Antiviral Res. 2012; 94(2): 168–78. https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2012.03.009
  32. Vertuani S., Bazzaro M., Gualandi G., Micheletti F., Marastoni M., Fortini C., et al. Effect of interferon-alpha therapy on epitope-specific cytotoxic T lymphocyte responses in hepatitis C virus-infected individuals. Eur. J. Immunol. 2002; 32(1): 144–54. https://doi.org/10.1002/1521-4141(200201)32:1<144::AID-IMMU144>3.0.CO;2-X.
  33. Масалова О.В., Леснова Е.И., Иванов А.В., Пичугин А.В., Пермякова К.Ю., Смирнова О.А. и др. Сравнительный анализ иммунного ответа на ДНК-конструкции, кодирующие неструктурные белки вируса гепатита С. Вопросы вирусологии. 2013; 58(2): 21–8.
  34. Ivanov A.V., Smirnova O.A., Ivanova O.N., Masalova O.V., Kochetkov S.N., Isaguliants M.G. Hepatitis C virus proteins activate NRF2/ARE pathway by distinct ROS-dependent and independent mechanisms in HUH7 cells. PLoS One. 2011; 6(9): e24957. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0024957
  35. Rao X., Hoof I., van Baarle D., Kesmir C., Textor J. HLA preferences for conserved epitopes: a potential mechanism for hepatitis C clearance. Front. Immunol. 2015; 6: 552. https://doi.org/10.3389/fimmu.2015.00552
  36. Масалова О.В., Шепелев А.В., Атанадзе С.Н., Парнес З.Н., Романова В.С., Вольпина О.М. и др. Иммуностимулирующее действие водорастворимых производных фуллерена – перспективных адъювантов для вакцин нового поколения. Доклады РАН. 1999; 369(3): 411–3.
  37. Шершакова Н.Н., Барабошкина Е.Н., Андреев С.М., Шабанова Д.Д., Смирнов В.В., Камышников О.Ю. и др. Отсутствие острой токсичности у водного раствора фуллерена С60. Immunologiya. 2016; 37(6): 325–9. https://doi.org/10.18821/0206-4952-2016-37-6-325-329
  38. Funakoshi-Tago M., Miyagawa Y., Ueda F., Mashino T., Moriwaki Y., Tago K., et al. A bis-malonic acid fullerene derivative significantly suppressed IL-33-induced IL-6 expression by inhibiting NF-kappaB activation. Int. Immunopharmacol. 2016; 40: 254–64. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2016.08.031
  39. Башкатова Е.Н., Андреев С.М., Шершакова Н.Н., Бабахин А.А., Шиловский И.П., Хаитов М.Р. Изучение модулирующей активности производных фуллерена С60 на реакцию гиперчувствительности замедленного типа. Физиология и патология иммунной системы. 2012; 16(2): 17–27.
  40. Yamashita K., Sakai M., Takemoto N., Tsukimoto M., Uchida K., Yajima H., et al. Attenuation of delayed-type hypersensitivity by fullerene treatment. Toxicology. 2009; 261(1-2): 19–24. https://doi.org/10.1016/j.tox.2009.04.034

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Активность антител изотипа IgG1 к рекомбинантному белку rNS5B вируса гепатита С в сыворотках мышей, иммунизированных rNS5B в смеси с дисперсным фуллереном: а – кривые титрования сывороток в ИФА; б – кратность увеличения титров антител в группах мышей, за единицу принят титр антител в группе 1 (1 : 105). ОП – оптическая плотность при 450 нм.

Скачать (150KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Клеточный ответ к рекомбинантному белку NS5B в спленоцитах мышей, иммунизированных rNS5B в смеси с дисперсным фуллереном. Пролиферативный ответ лимфоцитов выражен в виде индекса стимуляции пролиферации, секреция IFN-γ – концентрация в пг/мл; индекс стимуляции пролиферации рассчитывали как отношение радиоактивности (в имп/мин) в лунках со стимуляторами к радиоактивности в лунках со средой. Контрольной группе вводили только физиологический раствор.

Скачать (103KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Снижение пролиферативной активности in vitro спленоцитов мышей, иммунизированных плазмидой pcNS5B с дисперсным фуллереном, в ответ на стимуляцию белком rNS5В. Индекс стимуляции пролиферации рассчитывали как отношение радиоактивности (в имп/мин) в лунках со стимулятором (rNS5B) к радиоактивности в лунках со средой.

Скачать (45KB)
Метаданные
5. Рис. 4. Различия в количестве IFN-γ-синтезирующих клеток, полученных от мышей, иммунизированных плазмидой pcNS5B в присутствии/отсутствии dnC60. Результаты представлены как разница в количестве спотов на 106 клеток в лунках со стимуляторами и в контрольных лунках без стимуляторов (со средой); р1–р6 – пептиды, перечисленные в таблице, представляющие последовательности вируса гепатита С.

Скачать (79KB)
Метаданные
6. Рис. 5. Определение доли лимфоцитов CD4+ и CD8+ в группах мышей, иммунизированных плазмидой pcNS5В в сочетании с дисперсным фуллереном, методом проточной цитометрии. *Статистически значимые различия (p < 0,05) по сравнению с контрольной группой, которой вводили только физиологический раствор.

Скачать (90KB)
Метаданные

© Масалова О.В., Леснова Е.И., Андреев С.М., Шершакова Н.Н., Козлов В.В., Пермякова К.Ю., Демидова Н.А., Валуев-Эллистон В.Т., Турецкий Е.А., Иванов А.В., Николаева Т.Н., Хаитов М.Р., Пронин А.В., Кущ А.А., 2022

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».