Синтез стероидных трейсеров методом оксимного лигирования и их использование в поляризационном флуоресцентном иммуноанализе

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Предложен метод синтеза конъюгатов ряда кетостероидов с 6-карбоксифлуоресцеином с использованием короткого бифункционального реагента аминооксипропиламина. Стереоизомеры, образующиеся при получении оксимов стероидов, были разделены с помощью препаративной ТСХ и протестированы в поляризационном флуоресцентном иммуноанализе (FPIA) с применением моноклональных антител. Изучены кинетические параметры связывания полученных флуоресцентных производных с моноклональными антителами к прогестерону. Таким образом, разработан эффективный и универсальный подход к синтезу флуоресцентных конъюгатов для иммуноанализа с оптимальной длиной линкера, который улучшает их аналитические характеристики и упрощает их получение. Продемонстрирована перспективность полученных соединений для практического применения в клинической диагностике и при анализе объектов окружающей среды.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

И. А. Прохоренко

ФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН

Автор, ответственный за переписку.
Email: prig67@mail.ru
Россия, 117997 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Д. А. Глущенко

ФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН

Email: prig67@mail.ru
Россия, 117997 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Е. Л. Гуляк

ФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН

Email: prig67@mail.ru
Россия, 117997 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

И. В. Михура

ФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН

Email: prig67@mail.ru
Россия, 117997 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

В. А. Коршун

ФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН

Email: prig67@mail.ru
Россия, 117997 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10

Л. И. Мухаметова

МГУ им. М.В. Ломоносова

Email: prig67@mail.ru

химический факультет

Россия, 119991 Москва, Ленинские горы, 1, стр. 3

С. А. Еремин

МГУ им. М.В. Ломоносова

Email: prig67@mail.ru

химический факультет

Россия, 119991 Москва, Ленинские горы, 1, стр. 3

Список литературы

  1. Zamri M.F.M.A., Bahru R., Pramanik S.K., Fattah I.M.R. // J. Water Proc. Engin. 2021. V. 41. 102017. https://doi.org/10.1016/j.jwpe.2021.102017
  2. Miller W.L., Auchus R.J. // Endocr. Rev. 2011. V. 32. P. 81. https://doi.org/10.1210/ER.2010-0013
  3. Куджаев А.М., Андрианова А.Г., Гущина А.Е., Смирнов И.В., Ротанова Т.В. // Биоорг. химия. Т. 48. С. 381–414. [Kudzhaev A.M., Andrianova A.G., Gustchina A.E., Smirnov I.V., Rotanova T.V. // Russ. J. Bioorg. Chem. 2022. V. 48. P. 678–709.] https://doi.org/10.1134/S1068162022040136
  4. Gore A.C. // JAMA Int. Med. 2016. V. 176. P. 1705–1706. https://doi.org/10.1001/jamainternmed.2016.5766
  5. Abraham G.E. // J. Steroid Biochem. 1975. V. 6. P. 261–270. https://doi.org/10.1016/0022-4731(75)90141-7
  6. Relave F., Lefebvre R.C., Beaudoin S., Price C. // Can. Vet. J. 2007. V. 48. P. 823–826.
  7. Stanczyk F.Z., Lee J.S., Santen R.J. // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2007. V. 16. P. 1713–1719. https://doi.org/10.1158/1055-9965.EPI-06-0765
  8. Tate J., Ward G. // Clin. Biochem. Rev. 2004. V. 25. P. 105–120.
  9. Hall M.D., Yasgar A., Peryea T., Braisted J.C., Jadhav A., Simeonov A., Coussens N.P. // Methods Appl. Fluoresc. 2016. V. 4. P. 022001. https://doi.org/10.1088/2050-6120/4/2/022001
  10. Smith D.S., Eremin S.A. // Anal. Bioanal. Chem. 2008. V. 391. P. 1499–1507. https://doi.org/10.1007/s00216-008-1897-z
  11. Choi M.J., Choi J., Yoon D.Y., Park J., Eremin S.A. // Biol. Pharm. Bull. 1997. V. 20. P. 309–314. https://doi.org/10.1248/bpb.20.309
  12. Колосова A.Ю., Еремин С.А., Гаврилова Е.М., Егоров А.М. // Проблемы эндокринологии. 1994. Т. 40. С. 48–51. https://doi.org/10.14341/probl12147
  13. Hong J.Y., Choi M.J. // Biol. Pharm. Bull. 2002. V. 25. P. 1258–1262. https://doi.org/10.1248/bpb.25.1258
  14. Quémener D., Davis T.P., Barner-Kowollik C., Stenzel M.H. // Chem. Commun. 2006. V. 48. P. 5051–5053. https://doi.org/10.1039/B611224B
  15. Clède S., Lambert F., Sandt C., Kascakova S., Unger M., Harté E., Plamont M.-A., Saint-Forth R., Deniset- Besseau A., Guerouiab Z., Hirschmugl C., Lecomte S., Dazzi A., Vessières A., Policar C. // Analyst. 2013. V. 138. P. 5627–5638. https://doi.org/10.1039/C3AN00807J
  16. Robinson S.W., Beer P.D. // Org. Biomol. Chem. 2017. V. 15. P. 153–159. https://doi.org/10.1039/ c6ob02339h
  17. Khomutov A.R., Vepsalainen J.J., Shvetsov A.S., Hyvönen T., Keinänen T.A., Pustobaev V.N., Eloranta T.O., Khomutov R.M. // Tetrahedron. 1996. V. 52. P. 13751–13766. https://doi.org/10.1016/0040-4020(96)00836-8
  18. Sapozhnikova A., Misyurin V.A., Ryazantsev D.Y., Kokin E.A., Finashutina Yu.P., Alexeeva A.V., Ivanov I.A., Kocharovskaya M.V., Tikhonova N.A., Popova G.P., Alferova V.A., Ustinov A.V., Korshun V.A., Brylev V.A. // Int. J. Mol. Sci. 2022. V. 22. P. 12845. https://doi.org/10.3390/ijms222312845
  19. Kolmer D.K., Cool E.T. // Chem. Rev. 2017. V. 117. P. 10358–10376. https://doi.org/10.1021/acs.chemrev.7b00090
  20. Adamczyk M., Chen Y.-Y., Grote J., Mattingly P.G. // Steroids. 1999. V. 64. P. 283–290. https://doi.org/10.1016/S0039-128X(99)00004-5
  21. Мухаметова Л.И., Крылов В.Б., Соловьев A.C., Яшунский Д.В., Матвеев A.Л., Тикунова Н.В., Еремин С.А., Нифантьев Н.Э. // Известия Акад. наук. Сер. хим. 2021. №. 5. С. 975–981.
  22. Zhao Q., Bai Y., Wang H. // Talanta. 2020. V. 217. P. 121018. https://doi.org/10.1016/j.talanta.2020.121018

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Структура описанных ранее трейсеров для FPIA на основе стероидных гормонов: (а) – Pg3CMO-EDF (амид карбоксиметилоксима прогестерона с этилендиаминфлуоресцеинтиокарбаматом); (б) – 11-α-гидроксипрогестерон, ацилированный янтарным ангидридом.

Скачать (137KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Стереоизомерные фрагменты оксимов (VII) и (VIII).

Скачать (58KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Изменение сигнала поляризации флуоресценции свободных трейсеров Е(VII), Z(VII) и Pg3CMO-EDF (2.5 нМ) при образовании комплексов со специфическими антителами к прогестерону MAb-Pg (20 нМ) в сравнении с неспецифическими MAb-3G11 (30 нМ).

Скачать (197KB)
Метаданные
5. Рис. 4. Зависимость изменения сигнала поляризации флуоресценции от концентрации антител для трейсеров Е(VII) (кривая 1), Z(VII) (кривая 2) и Pg3CMO-EDF (кривая 3) (концентрации трейсеров 2.5 нМ); рН 8.5, 25°С.

Скачать (198KB)
Метаданные
6. Рис. 5. Градуировочные зависимости (а) и нормированные градуировочные зависимости (б) для трейсеров Е(VII) (кривая 1), Z(VII) (кривая 2) и Pg3CMO-EDF (кривая 3) (концентрации трейсеров 2.5 нМ); рН 8.5, 25°С.

Скачать (332KB)
Метаданные
7. Схема 1. Синтез бифункционального линкерного реагента (V).

Скачать (111KB)
Метаданные
8. Схема 2. Синтез этоксиэтилидензащищенного аминооксипроизводного (VI) 6-карбоксифлуоресцеина (6-FAM) и флуоресцентных трейсеров (VII) и (VIII).

Скачать (205KB)
Метаданные

© Российская академия наук, 2024

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».