Методы количественного определения действующих веществ в плодах боярышника и препаратах на его основе

Полный текст

Введение

Препараты боярышника относятся к группе кардиотонических средств растительного происхождения и применяются в составе комплексной терапии легких форм функциональных нарушений деятельности сердечно-сосудистой системы.¹ В качестве лекарственного растительного сырья (ЛРС) заготавливают цветки и плоды боярышника. Однако сбор цветков осложняется коротким сроком их цветения, 10–12 дней, при этом рекомендовано собирать цветки в начале цветения. Плоды же пригодны к заготовке со второй половины августа до октября, после их полного созревания.² Таким образом, использование плодов боярышника как ЛРС является более перспективным с экономической точки зрения, о чем свидетельствует преобладание лекарственных препаратов из плодов боярышника среди препаратов на основе боярышника. Так, количество регистрационных удостоверений, выданных на ЛРС и лекарственные растительные препараты (ЛРП) на основе плодов боярышника, значительно превышает количество регистрационных удостоверений на ЛРС и ЛРП на основе цветков боярышника (30 против 2).³ В табл. 1 представлена обобщенная информация о комбинированных препаратах с седативным и кардиотоническим действием, в состав которых входят плоды боярышника. Наиболее востребованными являются ЛРП «Боярышника плоды» в цельном и измельченном виде и «Боярышника настойка».

 

Таблица 1. Лекарственные препараты на основе боярышника плодов

Лекарственная форма	Состав препарата	Фармакотерапевтическая группа
Плоды цельные/измельченные	Боярышника плоды	Кардиотоническое средство растительного происхождения
Настойка	Боярышника плоды	Средства для лечения заболеваний сердца; другие препараты для лечения заболеваний сердца
Капли для приема внутрь	Боярышника плодов настойка + Валерианы лекарственной корневищ с корнями настойка + Натрия бромид + [Рацементол]	Седативное средство растительного происхождения
Эликсир	Аронии черноплодной плоды + Березы почки + Боярышника плоды + Боярышника цветки + Сосны кедровой сибирской семена + [Мед]	Общетонизирующие средства и адаптогены
Настойка	Боярышника плоды + Донника трава + Кориандра плоды + Мелиссы лекарственной трава + Овса посевного зерно + Пустырника трава + Хмеля соплодия	Седативное средство растительного происхождения
Раствор для приема внутрь	Боярышника плодов экстракт + Крапивы двудомной листьев экстракт + Ландыша травы настойка	Кардиотоническое средство растительного происхождения
Экстракт для приема внутрь	Боярышника плоды + Мелиссы лекарственной трава + Пустырника трава + Шиповника плоды + Эхинацеи пурпурной трава	Седативное средство растительного происхождения

 

Боярышника плоды (Crataegi fructus) собирают в фазу полного созревания и высушивают. Заготовка сырья разрешена от дикорастущих или культивируемых кустарников 12 видов боярышника (сем. розоцветных — Rosaceae).⁴ Плоды содержат флавоноиды (основные — гиперозид, кверцетин и витексин), процианидины различной степени полимеризации, органические кислоты (лимонная, урсоловая, кратегусовая, кофейная, хлорогеновая, яблочная), тритерпеновые и флавоновые гликозиды, каротиноиды, пектины, сахара, витамины; в семенах обнаружены жирные масла и бета-ситостерин [1–3]. Стандартизация плодов боярышника проводится по процианидинам и гиперозиду, представляющему собой гликозид кверцетина [4–8].

В соответствии с требованиями Государственной фармакопеи Российской Федерации стандартизация ЛРС боярышника плоды⁵ и боярышника настойка⁶ проводится методом дифференциальной спектрофотометрии по сумме флавоноидов в пересчете на гиперозид. Нормы содержания действующих веществ составляют «не менее 0.04%» и «не менее 0.003%» соответственно. Методика основана на определении комплекса полифенольных соединений в спиртовых экстрактах боярышника с алюминия хлоридом по удельному показателю поглощения комплекса гиперозида с алюминия хлоридом. К недостаткам данной методики можно отнести низкую селективность, невозможность раздельно определять компоненты основных действующих веществ и низкую точность, так как не предусмотрено использование стандартного образца в аналогичных условиях испытания.

Существуют примеры более селективного определения флавоноидов боярышника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Так в Фармакопею США⁷ включена монография на смесь цветков с листьями, которые стандартизуют по содержанию С-гликозилированных флавонов в пересчете на витексин и О-гликозилированных флавонов в пересчете на гиперозид, определенных методом ВЭЖХ. Ранее нами была предложена ВЭЖХ-методика количественного определения действующих веществ в препарате «Боярышника цветки» [9]. Близкий химический состав цветков и плодов боярышника позволяет считать перспективным разработку аналогичной методики определения суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид для плодов и настойки боярышника.

Монографии на плоды боярышника включены в Европейскую фармакопею и Государственную фармакопею Республики Беларусь⁸ (ГФ РБ), где в цельных плодах определяют содержание процианидинов в пересчете на цианидина хлорид спектрофотометрическим методом с нормой «не менее 0.06%». В ГФ РБ дополнительно предусмотрено спектрофотометрическое определение суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид по методике, аналогичной методике ГФ РФ.

В Фармакопее КНР описаны плоды боярышника перистонадрезанного (Crataegus pinnatifida Bge), отличающегося от европейских видов боярышника. Данный вид произрастает на территории России в Приморье и Приамурье, за ее пределами — в Китае и Корее. Согласно фитохимическим исследованиям в плодах боярышника перистонадрезанного обнаружены терпеноиды, фенилпропаноиды, лигнаны, флавоноиды, тритерпеновые кислоты [10]. В монографию Фармакопеи КНР⁹ включено определение органических кислот в пересчете на лимонную кислоту титриметрическим методом с нормой «не менее 5.0%» и экстрактивных веществ, растворимых в спирте, которых должно быть не менее 21.0%. Для нас представляло интерес оценить содержание органических кислот в плодах боярышника, заготавливаемых в Российской Федерации, по методике Фармакопеи КНР с целью возможного использования ее для стандартизации.

Цель работы — разработка селективной ВЭЖХ-методики определения суммы флавоноидов в лекарственных средствах «Боярышника плоды» и «Боярышника настойка»; определение подходов к гармонизации методов количественного определения действующих веществ плодов боярышника с требованиями ведущих фармакопей.

Задачи исследования:

• провести количественную оценку суммы флавоноидов и процианидинов в плодах боярышника методом спектрофотометрии, органических кислот методом кислотно-основного титрования с использованием зарубежных и отечественных фармакопейных методик;
• разработать селективную методику определения суммы флавоноидов в плодах и настойке боярышника методом ВЭЖХ.

Материалы и методы

Объекты исследования. Образцы препаратов «Боярышника плоды, плоды цельные» (образец 1, образец 2, образец 3) и «Боярышника настойка» (образец 4, образец 5) нескольких отечественных производителей.

Методы исследования. Исследование осуществляли методом ВЭЖХ с УФ-детектированием на жидкостном хроматографе Infinity II 1260 DAD (Agilent); спектрофотометрией с регистрацией УФ-спектров на спектрофотометре Agilent 8453Е и методом кислотно-основного титрования с индикатором. В процессе пробоподготовки для метода ВЭЖХ использовали прибор для непрерывной экстракции (прибор Сокслета), предназначенный для экстракции веществ из твердых образцов с помощью летучих растворителей. Влажность образцов препарата боярышника плодов определяли в термошкафу суховоздушном ED53 (Binder GmbH).

В качестве стандартного образца при определении методом ВЭЖХ использовали кверцетина дигидрат (ЕP СRS, каталожный № Y0001009 содержание действующего вещества 81.7%). Готовили метанольный раствор с концентрацией 0.5 мг·мл^–1.

Статистическую оценку экспериментальных данных и валидацию разработанной ВЭЖХ-методики проводили в соответствии с требованиями ОФС.1.1.0013 «Статистическая обработка результатов физических, физико-химических и химических испытаний» и ОФС.1.1.0012 «Валидация аналитических методик» ГФ РФ XV изд. соответственно.

Обсуждение результатов

Оценка объектов испытания по утвержденным фармакопейным методикам для дальнейшего заключения о целесообразности включения методик в фармакопейную статью на плоды боярышника при актуализации ГФ РФ. Методом спектрофотометрии определяли две группы веществ в плодах боярышника: процианидины в пересчете на цианидина хлорид и сумму флавоноидов в пересчете на гиперозид. Образцы препарата предварительно измельчали до частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, и определяли влажность гравиметрическим методом.

Определение флавоноидов проводили после трехкратной экстракции образца препарата этиловым спиртом 96% при нагревании на кипящей водяной бане и реакции комплексообразования флавоноидов с алюминия хлоридом по методике ГФ РФ.¹⁰ Измеряли оптическую плотность испытуемого раствора в видимой области спектра при длине волны 410 нм (рис. 1). Содержание суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид в абсолютно сухом сырье составило 0.04% (образец 1) и 0.08% (образец 2).

 

Рис. 1. Cпектры испытуемого раствора лекарственного препарата «Боярышника плоды» при определении содержания: а — процианидинов в пересчете на цианидина хлорид, б — суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид.

 

Процианидины извлекали спиртом этиловым 70%, подвергали кислотному гидролизу и трижды экстрагировали полученные растворы бутанолом. Измеряли оптическую плотность объединенных органических фракций при длине волны 555 нм (рис. 1). Содержание процианидинов рассчитывали с использованием удельного показателя поглощения цианидина хлорида, равного 1200, в соответствии с методикой Европейской фармакопеи.¹¹ Результат для образцов 1 и 2 составил 0.07 и 0.12% соответственно.

Органические кислоты в пересчете на лимонную кислоту в боярышника плодах определяли, соблюдая условия и режим экстракции, приведенные в Фармакопее КНР.¹² Около 1 г (точная навеска) образца препарата настаивали в 100 мл воды при комнатной температуре 4 ч при периодическом перемешивании. Затем фильтровали в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили водой до метки. К 25 мл полученного раствора прибавляли 50 мл воды и титровали 0.1 М раствором натрия гидроксида с индикатором фенолфталеин до малиново-красного окрашивания. Методика, приведенная в Фармакопее КНР, потребовала доработки, поскольку из-за низкого содержания органических кислот в плодах боярышника фармакопейных видов (около 1.4%) объем титранта составил менее 1.0 мл. Увеличение навески образца приводило к усилению окраски испытуемого раствора и не позволяло адекватно оценить конечную точку титрования. Наиболее оптимальными оказались условия определения органических кислот, указанные в методике, описанной в ФС.2.5.0093 «Рябины обыкновенной плоды» ГФ РФ XV изд. Содержание органических кислот в пересчете на яблочную кислоту составило 1.21% (образец 1) и 1.42% (образец 2). В табл. 2 приведены результаты количественного определения действующих веществ в плодах боярышника по фармакопейным методикам.

 

Таблица 2. Результаты количественного определения действующих веществ в лекарственном препарате «Боярышника плоды»

Наименование образца	Сумма флавоноидов в пересчете на гиперозид,* %	Содержание процианидинов в пересчете на цианидина хлорид,** %	Органические кислоты в пересчете на яблочную кислоту,*** %
Образец 1, влажность = 10.6%	0.04 (RSD = 2.85%)	0.07 (RSD = 1.14%)	1.16 (RSD = 0.58%)
Образец 2, влажность = 6.5%	0.08 (RSD = 0.64%)	0.12 (RSD = 0.37%)	1.43 (RSD = 1.47%)
Норма содержания	Не менее 0.06	Не менее 0.06	Не менее 5.0

Примечание. RSD — относительное стандартное отклонение.

* Определено методом спектрофотометрии по методике ФС.2.5.0061 Боярышника плоды. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. 2023.

** Определено методом спектрофотометрии по методике Monograph 07/2016:1220 Hawthorn berries (Crataegi fructus). European Pharmacopoiea. 11^th Ed. 2016.

*** Определено методом титриметрии по методике Monograph Crataegi fructus. Pharmacopoiea of the Peopleʹs Republic of China. V. 1a. 2020.

 

На основании проведенной работы был сделан вывод о целесообразности гармонизации фармакопейных требований ГФ РФ с требованиями Европейской фармакопеи и ГФ РБ (методики идентичны) и стандартизации плодов боярышника по содержанию процианидинов. Содержание органических кислот в плодах официнальных видов боярышника низкое, и воспроизводимые результаты при определении этой группы веществ получить не удалось. Поэтому определение органических кислот в плодах боярышника считаем избыточным.

Разработка методики определения суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид в плодах боярышника методом ВЭЖХ. Основные этапы пробоподготовки включали экстракцию флавоноидов из испытуемого образца в аппарате Сокслета, концентрирование пробы и проведение кислотного гидролиза.

Аналитическую пробу, около 10 г (точная навеска) препарата, предварительно измельченную до частиц размером 2 мм, помещали в патрон из фильтровальной бумаги, размещали его в экстракторе аппарата Сокслета с рабочим объемом 500 мл. В колбу-приемник прибавляли 250 мл метанола и экстрагировали в течение 5 ч. Экстракт охлаждали и упаривали под вакуумом до объема 15 мл. Упаренный экстракт количественно переносили в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводили метанолом до метки. 20.0 мл полученного раствора переносили в колбу с обратным холодильником, добавляли 2 мл 25% раствора кислоты хлористоводородной и нагревали на водяной бане при температуре 85°С в течение 60 мин. Содержимое колбы охлаждали, переносили в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводили метанолом до метки и перемешивали. Полученный раствор фильтровали через мембранный фильтр 0.45 мкм CHROMAFIL Xtra PET-45/25.

Хроматографирование проводили на обращеннофазовой колонке Gemini C18, размер колонки 250 × 4.6 мм, размер частиц 5 мкм. Детектирование осуществляли с помощью спектрофотометрического детектора при длине волны 370 нм. Скорость потока составляла 1.5 мл·мин^–1, температура колонки 25°С, объем вводимой пробы — 10 мкл, подвижная фаза — смесь метанол:вода:фосфорная кислота концентрированная в соотношении 100:100:1 (об.).

Использовали метод внешнего стандарта. Время удерживания кверцетина в описанных условиях составляло около 10 мин. Расчет проводили по кверцетину (агликон флавоноидов), образовавшемуся после гидролиза. В качестве стандартного раствора использовали 0.005%-ный раствор кверцетина в метаноле. Типичные хроматограммы испытуемого раствора и стандартного образца кверцетина представлены на рис. 2.

 

Рис. 2. Хроматограммы стандартного образца кверцетина (1) и испытуемого раствора лекарственного препарата «Боярышника плоды» (2); К — пик, соответствующий кверцетину.

 

В формуле расчета (1) учитывали коэффициент для пересчета кверцетина на гиперозид, равный отношению молекулярных масс гиперозида и кверцетина (1.536).

$X=\frac{S_1·a·25·50·P·100·100·1.536}{S_0·100·m·20·100·(100-w)}$ ,(1) 

где Х — содержание суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид в препарате, %; S₀ — площадь пика кверцетина на хроматограмме раствора стандартного образца; S₁ — площадь пика кверцетина на хроматограмме испытуемого раствора; a — навеска стандартного образца кверцетина, г; m — навеска препарата, г; w — влажность препарата, %; Р — содержание действующего вещества в стандартном образце кверцетина, %.

Оценка пригодности хроматографической системы по хроматограмме стандартного образца удовлетворяла требованиям ОФС.1.2.1.2.0001 «Хроматография» ГФ РФ XV изд. (значение асимметрии пика кверцетина — 1.02; эффективность колонки по пику кверцетина — 7652 теоретических тарелок; относительное стандартное отклонение площади пика кверцетина для 6 определений — 0.59%).

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид составило 0.024%, относительное стандартное отклонение (RSD) = 1.80% (образец 1), 0.043%, RSD = 0.21% (образец 2) и 0.021%, RSD = = 1.92% (образец 3).

Разработанная методика количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид была также адаптирована для ЛП «Боярышника настойка». Пробоподготовка заключалась в проведении кислотного гидролиза, концентрировании пробы и хроматографирования полученного испытуемого раствора в условиях, описанных для боярышника плодов. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид в настойке боярышника составило 0.0025%, RSD = 3.9% (образец 4) и 0.0020%, RSD = 0.5% (образец 5) (табл. 3).

 

Таблица 3. Данные статистической оценки методики определения содержания суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид в лекарственном препарате «Боярышника настойка»

Наименование образца	Объем выборки n	Среднее значение выборки Х, мг·мл–1	Стандартное отклонение S	Критерий Стьюдента	Полуширина доверительного интервала неопределенности среднего результата ∆X
Образец 4	10	0.02458	0.00064	2.26	0.00045
Образец 5	10	0.01768	0.0006	2.26	0.00004

 

В рамках валидационных исследований была проведена оценка специфичности, линейности, повторяемости, внутрилабораторной прецизионности ВЭЖХ-методики определения суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид в ЛС «Боярышника плоды». (табл. 4).

 

Таблица 4. Результаты валидации аналитической методики количественного определения суммы флавоноидов в лекарственном средстве «Боярышника плоды» в пересчете на гиперозид

Характеристика	Требования	Результат
Специфичность	Методика позволяет определить конкретное вещество	Время удерживания основного вещества испытуемого раствора соответствует времени удерживания кверцетина на хроматограмме стандартного раствора. На УФ-спектре испытуемого раствора присутствует характерный максимум поглощения (370 нм), совпадающий с максимумом поглощения УФ-спектра стандартного раствора кверцетина
Линейность	Данные экспериментальных измерений аналитических сигналов 7 проб с различным содержанием определяемых веществ обработаны методом наименьших квадратов с использованием линейной модели: y = bx + a Коэффициент корреляции: |r| ≥ 0.99	Концентрация кверцетина Площадь пика, у. е. мг·мл–1 % 0.0125 30 208.493 0.0208 50 343.431 0.0333 80 544.492 0.0417 100 677.972 0.0500 120 823.855 0.0625 150 1012.828 0.0833 200 1350.893 Уравнение прямой: y = 16135х + 7.9127 Коэффициент корреляции: r2 = 0.9999 |r| > 0.99
Аналитическая область	Методика применима в интервале 30–200% от минимального допустимого значения	Соответствует на основании данных по изучению линейности

Характеристика	Требования	Результат
Прецизионность Повторяемость	% RSD результатов 6 определений количественного содержания суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид должно быть ≤3.0%	Результаты 6 определений количественного содержания суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид:
		№ определения	Значение
		1	0.0241
		2	0.0238
		3	0.0232
		4	0.0237
		5	0.0240
		6	0.0238
		Среднее значение = 0.0237 S = 0.0003; RSD = 1.32% Доверительный интервал (Р = 95%. α = 0.05) ± 0.0003
Внутрилабораторная прецизионность	Полученное значение критерия Фишера, вычисленное по результатам проведения испытаний разными исполнителями на разном оборудовании, должно быть меньше табличного значения F = S12/S22 F ≤ Fтабл	№ Исполнитель 1 Оборудование 1 Исполнитель 2 Оборудование 2 1 0.0201% 0.0201% 2 0.0199% 0.0207% 3 0.0200% 0.0208% S 0.0001 0.00038 S2 0.000000010 0.000000014 F = 0.000000014/0.000000010 = 14.4 Fтабл(0.05; 2; 2) = 19.00 F < Fтабл F = 0.000000014/0.000000010 = 14.4 Fcrit(0.05; 2; 2) = 19.00 F ≤ Fcrit

Примечание. RSD — относительное стандартное отклонение; F, F_табл — критерий Фишера полученный и табличный соответственно; S₁, S₂ — стандартное отклонение; Р = 95% — доверительная вероятность, α = 0.05 — уровень значимости.

 

Оценку линейности проводили по стандартному раствору кверцетина. Полученные данные статистически обрабатывали и строили график зависимости аналитического сигнала от концентрации определяемого вещества в анализируемой пробе в пределах аналитической области методики от 30 до 200%. Зависимость содержания действующих веществ в испытуемом образце (мг·мл^–1) от площади пика кверцетина описывалась линейным уравнением. Квадрат коэффициента корреляции (r²) составил 0.9999 (критерий линейности ≥0.99), что подтверждает линейность в рассматриваемом диапазоне.

Прецизионность оценивали для 6 определений для испытуемых растворов со 100% содержанием определяемого вещества с помощью валидированных программ статистической обработки экспериментальных данных Microsoft Excel с вычислением граничных значений доверительного интервала среднего результата и определением ошибки единичного определения.

В ходе проведения валидации методики получены результаты, соответствующие критериям приемлемости. Разработанная методика количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид в боярышника плодах позволяет получать достоверные, воспроизводимые результаты.

Выводы

Проведен комплексный анализ подходов ведущих фармакопей к количественному определению действующих веществ плодов боярышника. Показана целесообразность включения в ФС «Боярышника плоды» определения содержания процианидинов в пересчете на цианидина хлорид по методике Европейской фармакопеи и Фармакопеи Республики Беларусь. Определение органических кислот в плодах боярышника является избыточным, поскольку содержание их в произрастающих в России видах низкое.

Разработана и валидирована селективная методика количественной оценки суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид в плодах и настойке боярышника методом ВЭЖХ, получены данные содержания суммы флавоноидов после гидролиза в плодах — «не менее 0.02%» и в настойке «не менее 0.002%». Разработанная методика может быть рекомендована для включения в раздел «Количественное определение» фармакопейных статей «Боярышника плоды» и «Боярышника настойка» Государственной фармакопеи Российской Федерации.

Финансирование работы

Работа выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00026-24-01 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР 124022300127-0).

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов, требующего раскрытия в данной статье.

Информация о вкладе авторов

Все авторы подтверждают соответствие своего авторства критериям ICMJE. Наибольший вклад распределен следующим образом: Е. П. Шефер — написание текста рукописи, анализ и обобщение данных литературы; Н. П. Антонова — концепция и дизайн работы, критический пересмотр его содержания; Н. Е. Семенова — проведение экспериментальных исследований методом ВЭЖХ; Т. А. Голомазова — проведение валидационного исследования и обработка его результатов; С. Д. Кахраманова — проведение экспериментальных исследований методом титриметрии; С. С. Прохватилова — консультация по вопросам проведения отдельных этапов экспериментальных работ, критический пересмотр содержания текста рукописи; С. А. Кучугурин — проведение экспериментальных исследований методом спектрофотометрии.

 

¹ https://www.vidal.ru/drugs/crataegi_fructus__18061

https://grls.rosminzdrav.ru

² Атлас лекарственных растений России / Под ред. Н. И. Сидельникова. М.; 2021.

³ https://grls.rosminzdrav.ru

⁴ ФС.2.5.0061 Боярышника плоды. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. М.; 2023.

⁵ Там же.

⁶ ФС.3.4.0001.18 Боярышника плодов настойка. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. М.; 2023.

⁷ Hawthorn leaf with flower. Monograph. United States Pharmacopeia. 41^th Ed.

⁸ Monograph 07/2016:1220 Hawthorn berries (Crataegi fructus). European Pharmacopoeia. Strasbourg; 2016.

Государственная фармакопея Республики Беларусь. Изд. 2. Молодечно; 2016.

⁹ Monograph Crataegi fructus. Pharmacopoeia of the Peopleʹs Republic of China. V. 1a. Bejing; 2020.

¹⁰ ФС.2.5.0061 Боярышника плоды. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. М.; 2023.

¹¹ Monograph 07/2016:1220 Hawthorn berries (Crataegi fructus). European Pharmacopoeia. Strasbourg; 2016.

¹² Monograph Crataegi fructus. Pharmacopoeia of the Peopleʹs Republic of China. V. 1a. Bejing; 2020.

Об авторах

Елена Павловна Шефер

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Автор, ответственный за переписку.
Email: shefer@expmed.ru
ORCID iD: 0000-0001-8389-4799

канд. фарм. наук

Россия, 127051, г. Москва, Петровский б-р, д. 8, стр. 2

Наталия Петровна Антонова

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Email: shefer@expmed.ru
ORCID iD: 0000-0002-7818-5303

канд. биол. наук

Россия, 127051, г. Москва, Петровский б-р, д. 8, стр. 2

Наталья Евгеньевна Семенова

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Email: shefer@expmed.ru
ORCID iD: 0000-0002-6787-0647
Россия, 127051, г. Москва, Петровский б-р, д. 8, стр. 2

Татьяна Александровна Голомазова

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Email: shefer@expmed.ru
ORCID iD: 0000-0002-9917-9367
Россия, 127051, г. Москва, Петровский б-р, д. 8, стр. 2

Сабина Джейхуновна Кахраманова

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Email: shefer@expmed.ru
ORCID iD: 0000-0002-8160-7829
Россия, 127051, г. Москва, Петровский б-р, д. 8, стр. 2

Светлана Степановна Прохватилова

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Email: shefer@expmed.ru
ORCID iD: 0000-0002-3278-1994

канд. фарм. наук

Россия, 127051, г. Москва, Петровский б-р, д. 8, стр. 2

Сергей Александрович Кучугурин

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Email: shefer@expmed.ru
ORCID iD: 0000-0001-9439-9611
Россия, 127051, г. Москва, Петровский б-р, д. 8, стр. 2

Список литературы

Дополнительные файлы