Лейкемические дендритные клетки у больных острыми миелоидными лейкозами


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель исследования. Определение поверхностной и внутриклеточной экспрессии антигена ангиотензинпревращающего фермента (АПФ) и шаперона Bip на лейкемических дендритных клетках (ЛДК), а также изучение экспрессии генов АПФ и шаперонов Bip, Calnexin, Calreticulin в ЛДК на момент диагностики острого миелоидного лейкоза (ОМЛ) в стандартных и стрессовых условиях культивирования.
Материалы и методы. Экспрессию антигенов АПФ и Bip анализировали методом иммунофенотипирования и проточной цитометрии (использовали моноклональные антитела к шаперону Bip и к CD143), экспрессию генов АПФ и шаперонов Bip, Calnexin, Calreticulin - методом полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР). Дендритные клетки (ДК) получали методом культивирования мононуклеарной фракции периферической крови здоровых доноров и больных ОМЛ в присутствии 180 нг/мл кальциевого ионофора А23187 (Sigma) в течение 4 дней одновременно при температуре 37 и 33°C в атмосфере 5% CO2. В исследование были включены 9 больных в возрасте 39-53 года (медиана 43 года) - 5 мужчин и 4 женщины. Контрольную группу составили 8 здоровых доноров.
Результаты. Понижение температурного режима культивирования не увеличило экспрессию АПФ и незначительно (в 1,3 раза) повысило внутриклеточное содержание шаперона Bip в ДК здоровых доноров. Увеличилась экспрессия АПФ (в 15 раз) и шаперона Bip (в 11 раз) на мембране ЛДК, а содержание внутриклеточного АПФ и Bip снизилось в 11 и в 2 раза соответственно. Экспрессию исследуемых генов оценивали при понижении температуры культивирования с 37 до 33°С и выразили в виде логарифмической шкалы. Различия экспрессии генов Bip, Calnexin, Calreticulin в ЛДК и в ДК здоровых доноров не достигали статистической достоверности. Экспрессия АПФ в ЛДК статистически достоверно отличалась от экспрессии гена АПФ в ДК (p = 0,05).
Заключение. Приведенные данные позволяют сделать вывод о том, что ЛДК и ДК здоровых доноров - это клетки, различающиеся по генетическим и функциональным характеристикам. Следовательно, можно предположить неадекватную реакцию ЛДК при формировании противоопухолевого иммунного ответа. Обнаруженный феномен нормализации экспрессии антигена АПФ на клеточной мембране в условиях стресса открывает новые возможности регуляции функциональной активности ЛДК.

Об авторах

Ирина Владимировна Гальцева

ГУ Гематологический научный центр РАМН

Email: irag@blood.ru
отд. химиотерапии гемобластозов и трансплантации костного мозга, с. н. с., к. м. н; ГУ Гематологический научный центр РАМН

Валерий Григорьевич Савченко

ГУ Гематологический научный центр РАМН

Email: svg@blood.ru
директор НИИ трансплантации костного мозга и молекулярной гематологии, руководитель отд. химиотерапии гемобластозов и трансплантации костного мозга ГНЦ, член-корр. РАМН, д. м. н; ГУ Гематологический научный центр РАМН

Андрей Борисович Судариков

ГУ Гематологический научный центр РАМН

Email: dusha@blood.ru
лаборатория молекулярной гематологии, зав. лабораторией, к. б. н., научный руководитель; ГУ Гематологический научный центр РАМН

Лев Евгеньевич Пашин

ГУ Гематологический научный центр РАМН

Email: lenpge@gmail.com
отд. химиотерапии гемобластозов и ТКМ, аспирант; ГУ Гематологический научный центр РАМН

Елена Николаевна Паровичникова

ГУ Гематологический научный центр РАМН

Email: elenap@blood.ru
отд. химиотерапии гемобластозов и ТКМ, д. м. н., в. н. с; ГУ Гематологический научный центр РАМН

Сергей Михайлович Данилов

ГУ Гематологический научный центр РАМНУниверситет штата Иллинойс

Email: danilov@uic.edu
к. б. н., научный сотрудник отделения анестезиологии; ГУ Гематологический научный центр РАМНУниверситет штата Иллинойс

I V Galtseva

V G Savchenko

A B Sudarikov

L E Pashin

E N Parovichnikova

S M Danilov

Список литературы

  1. Campana D., Pui C. Detection of minimal residual disease in acute leukemia: methodolologic advances and clinical significans. Blood 1995; 85: 1416-1426.
  2. Steinman R. M., Cohn Z. A. Identification of a novel cell type in peripheral lymphoid organs of mice. Morphology, quantitation, tissue distribution. J. Exp. Med. 1973; 137 (5): 1142-1162.
  3. MacPherson G., Kushnir N., Wykes M. Dendritic cells, B cells and the regulation of antibody synthesis. Immunol. Rev. 1999; 172: 325-334.
  4. Gerosa F., Baldani-Guerra B., Nisii C. et al. Reciprocal activating interaction between natural killer cells and dendritic cells. J. Exp. Med. 2002; 195: 327-333.
  5. Sallusto F., Lanzavecchia A. Efficient presentation of soluble antigen by cultured human dendritic cells is maintained by granulocyte/macrophage colony-stimulating factor plus interleukin 4 and downregulated by tumor necrosis factor alpha. J. Exp. Med. 1994; 179: 1109-1118.
  6. Grouard G., Rissoan M. C., Filgueira L. et al. Dendritic cells: multi-lineal and multi-functuinal. Nature 2003; 425: 1101- 1111.
  7. Rissoan M. C., Soumelis V., Kadowaki N. Reciprocal control of T helper cell and dendritic cell differentiation. Science 1999; 283: 1183-1190.
  8. Grabbe S., Murphy K. M., Reiner S. L. The lineage decisions of helper T cells. Nat. Rev. Immunol. 2002; 2: 933-943.
  9. Banchereau J., Steinman R. M. Dendritic cells and the control of immunity. Nature 1998; 392; 245-251.
  10. Rotheft T., Goschorek A., Barts H. et al. Antigen dose, type of antigen-presenting cell and time of differentiation contribute to the T helper 1/T helper 2 polarizationof naive T cell. Immunology 2003; 110: 430-439.
  11. Садовникова Е. Ю., Стрельникова Т. Б., Паровичникова Е. Н., Савченко В. Г. Индукция костимуляторных молекул на поверхности бластных клеток у больных острыми миелобластными лейкозами. Тер. арх. 2001; 7: 34-40.
  12. Robinson S. P., English N., Jaju R. et al. The in vitro generation of dendritic cells from blast cells in acute leukemia. Br. J. Haematol. 1998; 103: 763-771.
  13. Waclavicek M., Berer A., Oehler L. et al. Calcium ionophore: a single reagent for the differentiation of primary human acute myelogenous leukemia cells towards dendritic cells. Brt. J. Haematol. 2001; 114: 466-473.
  14. Cignetti A., Bryant E., Allione B. et al. CD34(+) acute myeloid and lymphoid leukemic blasts can be induced to differentiate into dendritic cells. Blood 1999; 94: 2048-2055.
  15. Charbonnier A., Gaugler B., Saity D. et al. Human acute myeloblastic leukemia cells differentiate in vitro into mature dendritic cells and induce the differentiation of cytotoxic T cells against autologous leukemias. Eur. J. Immunol. 1999; 29: 2567-2578.
  16. Савченко В. Г., Садовникова Е. Ю., Паравичникова Е. Н. и др. Индукция противоопухолевой активности T-лимфоцитов антиген-презентирующими клетками, полученными из бластных клеток у больных острыми лейкозами. Тер. арх. 2000; 7: 14-21.
  17. Sokolovsky M., Lodish H., Daley G. Control of hematopoietic differentiation: Lack of specificity in signaling by cytokine receptors. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1998; 95: 6573-6575.
  18. Maekawa T., Metcalf D. Clonal suppression of HL60 and U937 cells by recombinant human leukemia inhibitory factor in combination with GM-CSF or G-CSF. Leukemia 1989; 3: 270-276.
  19. Sachs L. The control of growth and differentiation in normal and leukemic blood cells. Cancer 1990; 65: 2196-2206.
  20. Абелев Г. И. О связи опухолевого фенотипа и дифференцировки в опухолевых клетках при гемобластозах. В кн.: Клиническая онкогематология. М.: Медицина; 2007: 172-173.
  21. Danilov S. M., Sadovnicova E., Scharenborg N. et al. Angiotensin-converting enzyme (CD 143) is abundantly expressed by denritic cells and discriminates human monocyte-derived denritic cells from acute myeloid leukemia-derived dendritic cells. Exp. Hematol. 2003; 31: 1301-1309.
  22. Садовникова Е. Ю., Свинарева Д. А., Паровичникова Е. Н. и др. Адгезивные свойства и экспрессия интегринов клетками больных острыми миелоидными лейкозами (ОМЛ), стимулированными в культуре ионофором для ионов кальция. Цитология 2004; 46 (4): 337-345.
  23. Kizhakkekara R. Specific cellular proteins associate with angiotensin-converting enzyme and regulate its intracellular transport and cleavage-secretion. J. Biol. Chem. 2008; 275: 23253-23258.
  24. Castellino F., Boucher P. E., Eichelberg K. et al. Receptor-mediated uptake of antigen/heat shock protein complexes results in major histocompatibility complex class antigen presentation via two distinct processing pathway. J. Exp. Med. 2000; 191: 1957.
  25. Singh-Jasuja H., Toes R. E. M., Spee P. et al. Cross-presentation of glycoprotein 96-associated antigens on major histocompatibility complex class I molecules requires receptor-mediated endocytosis. J. Exp. Med. 2000; 191: 1965-1976.
  26. Li C. Y., Lee J. S., Ko Y. G. et al. Heat shock protein 70 inhibits apoptosis downstream of cytochrome c release and upstream of caspase-3 activation. J. Biol. Chem. 2000; 275: 25665-25671.
  27. Buzzard K. A., Giaccia A. J., Killender M., Anderson R. L. Heat shock protein 72 modulates pathways of stress-induced apoptosis. J. Biol. Chem. 1998; 273: 17147-17153.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО "Консилиум Медикум", 2009

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
 
 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».